Pour Acrylamide Gel:1. Assemble Plates spacers and clamps. Seal with 1% agarose to prevent leaks.2. Pour 5% acrylamide GelPlate size Large MediumH2O ...
按照常见的protocol大多使用的是non-denaturing PAGE。其实最早的时候,主要有两种胶,一种是PAGE一种是agarose。但是开始的时候agarose主要是用以比较大的complex,例如TFIID-DNA等。文献可见:(1)ZerbyD. and LiebermanP.M. (1997) Functional Analysis of TFIID-Activator Inte ...
1. Introduction2. Materials3. Methods4. NotesPreparation of Probes and CompetitorsOptimization of Reaction ParametersControls for SpecificityElectrophoretic ConditionsExtended ApplicationsReferences从原 ...
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离 ...
本文主要介绍了影响泳动度的各种主要因素。
电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。
分子生物学的从业者们都知道EB染料的有害性。百泰克公司2009年推出了新一代的凝胶透射仪,可用于核酸和蛋白质电泳凝胶样品的观察、处理、分析和拍照。可以避免EB的影响,又可以影响实验的效果。
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
聚丙烯酰胺凝胶电泳,普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大适用于分离同工酶及其亚型,大分子核酸等应用较广。琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA段。
这个方法是以phenol 及chloroform 溶菌后直接进行电泳分析,并未将质体DNA与宿主细菌染色体DNA 分离,得到的DNA 也不能用限制酶作用。
老外教你跑胶(琼脂糖凝胶电泳)
电泳分析
PFEG(Plused-Field Gel Electrophoresis)技术是将细菌完全包裹在一种特殊的琼脂中,然后加入一些化学试剂,比如十二烷基肌氨酸钠,蛋白酶K等,将细菌中的蛋白成分全部溶化,消化,只剩下整个序列的DNA。经稀有限制性内切酶消化后,切割成大小不等的片断,然后将其置于脉冲场电泳槽中电泳,完成片段分离的过程。经染色脱色后,在读胶仪上显现酶切后的电泳图谱,并经统计软件的分析,即可判断出条带的不同,同时做出细菌的同源性分析,从而达到分型的目的。其中能影响电泳图谱的参数很多,如电泳的转换时间,电泳的总时间,电泳的角度,电压,电泳液的温度等等,且不同的参数会得到不同的电泳图谱。
第一堂课:电泳教程
PCR-SSCP实验步骤
PCR产物的电泳鉴定
DNA电泳 agarose胶
凝胶电泳是分子克隆的中心技术之一,DNA的凝胶电泳和RNA 电 泳
DNA酶解技术的应用 琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段原理及其操作