DNA基础知识

otolaryngology 我现在有个问题求助各位大侠：我想检测一个不太成熟的基因在不同组织的isoform,可是不知道采用什么方法呀？生物信息学方法能为我们提供什么帮助呢？这个基因的其他物种的基因组序列尚未完全标注。还有就是请问各位大侠，EST数据库应该如何用呢？问题比较多，谢啦！otolaryngology 请各位大侠指点迷津，我的Email:hollyzyl@126.comzhujoker 请问楼上的你所谓的“一个 ...

zjhua 请教下各位，人类基因组计划的样本采集是怎么样的？是在全世界范围内采集部分人的进行测序吗？freecell .....蒙特利尔大学的Bartha M. Knoppers法学及理学博士说，“例如，我们精心设计了社群参与和样本采集的策略，以确保不同人群中所有参与者都是在对本计划完全了解后才同意参加的."该研究science已经刊载。在methods里面应该可以找到方法。http://www.hku.hk/cpaoesite/ht ...

zsutx2005 最近经常做转染，所以经常会提质粒。我们用的是Omega的去内毒中提，最后溶水也是用的Endotoxin-free Elution Buffer. 提好的质粒一般放-20备用。由于隔段时间就会用，所以就出现冻融的问题。每次解冻会发现管里的白色物质有析出。拿去测定浓度，发现质粒浓度会下降20%-30%左右，这样如果继续按照之前测定的浓度做转染，就会影响质粒的定量。不知道质粒为什么会析出？有谁碰到过这种情况？如果一直 ...

mnidr 请问最早的质粒是在哪发现的？原始的野生型大肠杆菌是不是没有质粒？我做实验用试剂盒提质粒有的大肠杆菌就提不出。多谢freecell 1946年，莱德伯格(Lederburg)和塔特姆(Tatum)发现的F因子是最早发现的质粒，1952年，由Lederburg正式命名为质粒。确切地讲，质粒是细菌内的共生遗传因子，它能在细菌中垂直遗传并赋予宿主细胞一些表型，例如对抗生素的抗性，产生抗生素，降解复杂有机化合物及限制酶 ...

luoqq1985 请问各位大侠，研究启动子，除了构建质粒，通过双报告基因检测之外，还可以做点哪方面的研究实验？如果要发文章，貌似只做点双报告基因很单调~~请各位指点，谢谢gzctxin 不知道您想问的是技术方法问题还是科学内容的问题。方法上除了报告基因技术，还有启动子克隆、酵母单杂交法、噬菌体展示技术、DNA足迹法、DNA迁移率变动法等等。内容上有基因启动子的鉴定，启动子结合蛋白的鉴定，启动子在基因工程上的运用等。zhu ...

254774755 请问各位大侠：我的基因构建结果如下CMV目的基因IRES目的基因PolyA我要做上面基因的pcr鉴定，请问CMV，IRES，polyA碱基个数有人知道吗？freecell 那你得先问自己了： 你为何要把做这样的克隆？zhujoker 呵呵，引起Freecell版主亲自关注了。的确你问的问题有的不是很清楚，既然质粒是你自己构建的，那么当初你不是用PCR的方法将你上面所谓的目的基因P出来的在连接上去？如果你当 ...

luoqq1985 这里做基因调控区的前辈一定不少，希望能给点意见，我在研究一个基因的5‘非翻译区是否含有低氧转录因子的结合位点，前期的工作是通过软件分析该区域是否存在这个结合位点的疑似序列，然后将这疑似的序列构人到PGL-3sv40中，转染细胞，经过低氧处理（低氧转录因子会增加）检测双萤光素酶的表达变化。如果有，还可以通过突变碱基进一步确定，但是如果不存在这样的结合位点，那我构出来的这个调控区质粒，不知道还可以做 ...

shenqi0622 请问，抑制DNA的合成分为哪些方式啊，例如抑制DNA合成的相关酶类，还有什么别的方式吗freecell 经过下述途径可达到此目的：1、使合成DNA所需的4种脱氧核苷酸形成障碍2、酶活力受抑制3、使DNA模板损伤4、使启动和调控DNA合成的复制子减少5、使DNA合成所需的能量供应障碍shenqi0622 非常感谢，总结的好！shiwei0708 影响因素就可作为抑制因素吧sanshenglou 学习啦hyj ...

arthur1999 :(正、反义表达载体是什么意思，我不明白，请大家赐教。不胜感激！！！freecell 正反义表达载体就是把目的基因正向或者反向插入到质粒中再转染质粒中含有正向插入目的基因的就是正义表达载体含有反向插入的就是反义表达载体arthur1999 学习，谢谢了本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

无痕风 求助基因芯片如何分析 各位大虾谁有经验 或知道哪里可以做相关的培训 请告诉小妹啊 呵呵谢了freecell http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20060905/544223/wangke80 看你是坐哪方面的芯片了，表达谱？CNV？microRNA？还是其它？不同的芯片有自己一些特殊的分析方法。基础了解的话一方面是看文献了，在dxy里面查一查一些基本概念，和一些简单的分析介绍，另外david是 ...

zhenyuyll194 在这请教各位大侠，若想找到一个疾病的基因缺陷比如某个先天性疾病，应该如何着手？请多指点！多谢！lqz816 是医学吗？是植物的话就好办，图位克隆就成。我是搞植物的，对人体外行，瞎说说啊：1、先要调查遗传规律吧，2、先检查染色体形态有没有巨大的缺失等变异，如果没有差异就下一步3、如果病是由于基因不表达或表达失控引起：做芯片，看表达差异，则可能发现候选基因。4、如果基因表达没有差异，就看序列差异，如果病是 ...

水仙子2005 我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒，用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3（promega）中。另外，promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer，该选择哪个？水仙子2005 继续求助sxd5266 pGL3-basic 没有SV40增强子pGL3-enhancer 有SV40增强子研究启动子 ...

chenke520520 本人做转染实验，由于小鼠的细胞实在是养不活，我能否将小鼠的insig-1基因（insulin induce gene-1）转染到大鼠细胞中？能否其发挥功能？急！请战友们解答！谢谢！shao74 可以。你是需要稳定表达还是瞬间表达？若稳定表达，你可采取病毒感染的方式，如曼病毒；逆转录病毒和腺病毒；若后者你可用一般的转染方式就够了，这样一般可持续7天左右。hustokyo 不同种属的基因和细胞，外源基因表达出的蛋白 ...

小猪默默 请教高人：我现在想用GFP做报告基因，在大肠杆菌中表达蛋白，想请教一下大家用GFP做报告基因是就是在含有GFP的质粒中扩GFP的全长吗？有没有人对GFP基因进行过改造？让报告基因的序列最短还能使表达的蛋白发荧光？Fasta921 1、如果你单纯想表达GFP蛋白，那么转化含GFP基因的表达载体即行。2、如果你想表达GFP融合蛋白，那么在GFP上游或下游插入目的基因即可。只是有些细节要注意的。3、有人改造GFP基 ...

pumcliu 关于基因芯片结果分析方面，请高手帮忙，多谢！小长 QT (Quality Threshold) Clustering Clustering是聚类的意思。基因芯片研究中，也许可以译为“共表达分析”。基因的共表达分析（QT Clustering）下图是使用QT clustering方法对一个时间系列实验进行聚类，每一类的基因具有相似的表达谱，QT clustering方法并不一定要把所有的基因都进行分类，它根据您规定的最小相关性和最小 ...

th_chen 基因转录调控中，存在大量的活化子和抑制子。通常人们会把他们区别对待，活化子如Gal4，行使转录激活功能；抑制子如HDAC，行使转录抑制功能。但是，目前越来越多的实验表明，很多活化子能同时作为抑制子存在。如Oct4是干细胞中一种相当重要的调控因子。它与启动子的结合激活了多潜能基因的表达，却抑制了发育基因的表达。现在的问题是：在同样的细胞环境中，作为抑制子，它募集的是沉默复合物，而作为活化子，它最终募集的是 ...

feiyu1024 在看一篇文献 看到-344 T allele and -344 CT/TT genotype 请问 这几个是什么区别 请高人指点Fasta921 gene polymorphism个人觉得：某对等位基因344位所对应的碱基为CT或TT。344 CT/TT genotype 作为载体包含T allele 。feiyu1024 在文章中 好像二者是有区别的 就是没看明白本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师 ...

jellyfish102 Tenascin和Aggrecan与VEGF之间是什么关系，Tenascin和Aggrecan是VEGF的下游基因吗，课题需要，请专家答疑，谢谢。chuckdouble 不是专家的个人意见首先, 是否**因子是**因子的上游或下游 这种问题, 需要具体到哪种模型, 哪种细胞, 哪种亚型. 不然一般不存在答案.tenascin 是个家族, 有 TNC, TNR, TNX 等等. 已有的报道是TNX会和VEGF结合, 诱导其VEGF的活性(293T cells). ...

zlacrobat 这几天看到论坛上的一些关于等位基因的帖子，有个想法想向各位请教一下。以人为例，每一个基因都由来自父母的2个等位基因构成，如果这两个等位基因的序列有差异，那么DNA的互补配对是怎么实现的呢？DNA的2条链并不是完全相同么？Fasta921 zlacrobat wrote:这几天看到论坛上的一些关于等位基因的帖子，有个想法想向各位请教一下。以人为例，每一个基因都由来自父母的2个等位基因构成，如果这两个等位 ...

xfnidage 我要做拟南芥的转基因，构建了一个双35S启动子的T质粒用来转化，就是两个35S启动子串联。不知道这样做会不会产生负面影响，望各位指教！freecell 什么叫“负面影响”？Fasta921 xfnidage wrote:我要做拟南芥的转基因，构建了一个双35S启动子的T质粒用来转化，就是两个35S启动子串联。不知道这样做会不会产生负面影响，望各位指教！针对蛋白表达量而言不会产生负面影响。CaMV35S双启动子 ...