DNA基础知识

Amicon Ultra-0.5 mL Centrifugal Filters for DNA Purification and Concentration操作示意图：With their vertical membrane design Amicon Ultra 0.5 mL filters deliver great performance and lower spin timesConcen ...

shRNA 苷酸序列的设计方法设计方法 确定一段合适的21 个碱基的靶序列是有效的敲低某个基因的非常重要的第一步。现在一些互联网上的服务器能够帮助提供一些线索。例如，由Whitehead 生物医学研究所（TheWhitehead Institute for Biomedical Research）设立和维护的siRNAext 程序（http://jura.wi.mit.edu/siRNAext）， ...

慢病毒包装步骤 慢病毒包装简要步骤：以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。1、取1.5ml灭菌EP管，加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血清培养基。轻柔混匀，室温孵育5min。2、取1.5ml灭菌EP管，取9μl 脂质体2000l溶于250μl无血清培养基中。轻柔混匀，室温孵育5min。3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20min4、 ...

美国MicroFab公司，成立于1984年，一直致力于喷墨打印技术在工业领域的应用和发展。至今MicroFab的产品和技术已经涉及到非常广泛的生产和科研领域。每个领域都会有专业的应用工程师提供建议和解决方案，从制造业到研究机构，MicroFab都能为您提供精确微量点滴的产品和技术方案。包括有： 铅与无铅焊料的粘合剂； 光学和电子聚合物； 蛋白质及DNA等生物 ...

Abstract Lumigen HyPerBlu reagent is a one solution chemical substrate based on dioxetane chemiluminescent technology. With HyPerBlu reagent a direct reaction with hydrogen peroxide produces an intens ...

Abstract Spatial and proteomic information are retained and varying combinations of biomarkers can be investigated including nuclear-to-cytoplasmic expression of a single marker colocalization of two ...

1、pCMVp-NEO-BAN载体特点: 该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对，主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成， 在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因。更重要的是，由于该真核细胞表达载体中抗neo基因存在，转染细胞后，用G418筛选，可建立稳定的、高表达目的基因的细胞株。插入外源基因的克隆位点包括Sa ...

滤血膜使用方法说明.pdf

2.1 基因文库基因文库：是某种特定的生物所含有的能够包含所有基因的足够数目的克隆的集合。基因文库是通过纯化细胞总DNA，然后利用特定的限制性酶酶切产生能插入载体的片段，一般是λ替换载体、粘粒或者是YAC。图5-21 基因文库的构建过程 对于植物、动物，所需要的克隆数很大，鉴定目的基因是一项艰巨的任务。对于这些生物体，可以使用细胞特异的cDNA文库。cDNA文库是将mRNA反转录成cDNA， ...

标记育种是利用与目标性状基因紧密连锁的遗传标记，对目标性状进行跟踪选择的一项育种技术。与育种有关的遗传标记主要有四种类型: 形态标记（morphological marker）、细胞标记（cytological markers）、生化标记（Biochemical marker）和分子标记（molecular marker）。早在1923年，Sax等就提出利用微效基因与主基因的紧密连锁，对微效基因进 ...

克隆基因的方法有很多，根据研究基础的不同，可以使用以下的方法克隆目的基因： 1. PCR或RT-PCR法2. 从基因文库中分离基因3. 从cDNA文库中分离基因4. 转座子标签法5. 图位克隆法6. 差减杂交法、扣除杂交、差异显示法7. 人工合成法本章中主要介绍从基因文库中筛选目的基因的几种方法。获的目的克隆的方法有两种1） 目的基因的直接选择2） 从基因文库中筛选称为鸟枪射击法，建立一个包含所有 ...

Construction and Characterization of Adenovirus VectorsP. Joel Ross and Robin J. Parks Adapted from Gene Transfer: Delivery and Expression of DNA and RNA (eds. Friedmann and Rossi). CSHL Press Cold Sp ...

第二章 酵母双杂交筛选 1. 操作流程 诱饵基因转化筛库宿主菌Y190――含诱饵基因的Y190 保种――诱饵基因的 自激活检测――筛库(组织库或者小文库)――挑选鉴定阳性克隆――抽提阳 性克隆中PREY 质粒并在细菌中扩增――猎物(Prey)质粒与诱饵(Bait)质粒共 同转化Y190，验证其相互作用 2. 方 法 2. 1 诱饵基因转化筛库宿主菌Y190 1） 3 个1mm 克隆接种于3mlYP ...

第一章 基因克隆 1. 操作流程 收集基因信息——设计引物——PCR ——回收目的片段——与载体 连接，取得连接产物 —— 用感受态细胞做转化 ——接菌——阳性克隆鉴 定(酶切法或PCR)——质粒抽提——质粒测序——测序结果分析——克隆 信息输入数据库——质粒实物保存 2. 方法 2.1 设计引物 引物设计要求：引物长度为25bp-35bp.forward primer 和reverse prim ...

一、原理SNP (Single Nucleotide Polymorphism)即单核苷酸多态性，是由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性(Polymorphism)。据估计，在人类基因组中，大约每千个碱基中有一个SNP，无论是比较于限制性片段长度多态性(RFLP)分析还是微卫星标记(STR)，都要广泛得多。SNP是我们考察遗传变异的最小单位据估计，人类的所有群体中大约存在一千万个SNP位点。一 ...

一、简介：SSR简单序列重复标记（Simple sequence repeat 简称SSR标记），也叫微卫星序列重复，是由一类由几个核苷酸（1-5个）为重复单位组成的长达几十个核苷酸的重复序列，长度较短，广泛分布在染色体上。由于重复单位的次数的不同或重复程度的不完全相同，造成了SSR长度的高度变异性，由此而产生SSR标记或SSLP标记。虽然SSR在基因组上的位置不尽相同，但是其两端序列多是保守的单 ...

1.6　TAlL-PCR 　　很早就有用随机引物的PCR，但由于无法有效地控制由随机引物引发的非特异产物的产生，所以一直未能广泛应用。近年来由IJiu等设计的TAIL-PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫热不对称交错PCR，则解决了这个问题，后来有研究表明，经改良过的TAIL-PCR成功地从突变体中克隆到外源插入基因的旁侧序列，从而为启动子的克隆提供了有效 ...

Introduction:One microarray set consists of 7 nylon membranes with 2.5 x 7.5 cm dimension. 2304 genes were spotted onto nylon membranes (Schleicher and Schuell GmbH Dassel Germany) using a GMS417 Micr ...

基因工程：将不同的生命元件按照类似于工程学的方法组装在一起，生产出人们所期待的生命物质。内含子，外显子：一个基因往往由几个互不相邻的段落组成，它的内部还包含一段或几段最终不相应出现在成熟mRNA中的片段，称为内含子。而相应出现在成熟mRNA中的片段则称为外显子。基因：是一个含有特定遗传信息的核苷酸序列，它是遗传物质的最小功能单位。蛋白质的一级结构：多肽链的氨基酸顺序。蛋白质的二级结构：多肽链中有规 ...

专题一：RNA干扰技术（RNAi）1995年，康奈尔大学的Su Guo博士用反义RNA阻断线虫基因表达的试验中发现，反义和正义RNA都阻断了基因的表达，他们对这个结果百思不得其解。直到1998年， Andrew Fire的研究证明，在正义RNA也阻断了基因表达的试验中，真正起作用的是双链RNA。这些双链RNA是体外转录正义RNA时生成的。这种双链RNA对基因表达的阻断作用被称为RNA干预（RNA ...