lsdcfhyj 请教前辈,将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中,建立稳定的细胞系,用哪种转染方法比较好?中间有什么细节是值得注意的chenjing198345 如果lab经费充裕的话可以用试剂盒包装慢病毒,然后感染真核细胞,完全按照protocol做就行,没啥特别的,sbi的kit不错。如果经费有限,一般是用磷酸钙转染法,这种方法在《分子克隆》里面有介绍,缓冲液的ph值很关键。lsdcfhyj 谢谢,但是我看很多外文 ...
springhello 我分离的启动子内部有很多停止密码子,由于启动子是自己建立创造的,不是哪个基因的。请问,可以用吗?song333 no problem. these are just DNA sequence. stop codon is locates in an open reading frame.In your case, is NOT.springhello 谢谢song333本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师 ...
longgyin8341 我想研究细胞在氧化应激损伤过程中核受体NFkB对于下游一些目的基因(如ICAM-1等)转录调控的影响,是不是需要把NFkB在基因组上的特异性结合元件克隆出来,与虫荧光素酶报告基因质粒构建重组质粒,然后转染细胞?若是如此:NFkb由于可以调控多种下游基因的表达,它在基因组上每个调控基因的结合序列都是特异的吗?或者说这段序列是固定的吗?如何在网上找呢?谢谢longgyin8341 继续求助中。。。 ...
parrot 5’-GACACTTAGCATTCCGATGAAGTG-3’是cox-2的一段启动子序列,TAGCATTCCGAT是其中的关键序列,请问怎样分析在不同物种间的保守性?请大家帮帮忙,谢谢!:)freecell Refer to:http://www.jsbi.org/pdfs/journal1/GIW06/GIW06P088.pdfhttp://www.biomedcentral.com/1471-2105/7/114parrot ...
longgyin8341 最近想做虫荧光素酶报告基因,但是从来没有做过,想求院子里高手指教:我是要观察一种药物是否能作用于细胞内的几种核受体(NFkB,PPAR,ER(目前还不清楚究竟是哪个,需要分别试验))的启动子区域,影响这几个核受体的转录水平,从而影响细胞的一些功能(比如凋亡等)。计划将这三种核受体的启动子区域分别扩增出来,然后与虫荧光素酶(或其他报告基因)构建重组质粒。再分别转染细胞,加入药物处理,观察荧光素酶的 ...
liufengxi 我是做基因载体的,刚开始研究生生活。在一篇文献中看到 Octaarginine-modified multifunctional envelope-type nanoparticles for gene delivery。请问Octaarginine应该翻译成?精氨酸,希望熟悉此内容的前辈,能给出中文意思,及简要的介绍gingivalis 前缀octa 是 “八”的意思。Octaarginine 那就是 八精氨酸寡肽liufengxi 谢谢哈, ...
清风重重吹 想合成LNA探针,地高辛标记,哪家公司比较好?zhujoker 这类求助你可以上丁香通,这样会得到更多的信息,每个公司会将他产品的优势告诉你的,然后根据你的要求选择。willion1985 Exiqonbolycc1988 LNA设计合成可以咨询××××本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming
学习勤快 基因的象形文字。IT CTA=1 ist IT ;G=01T10T 00 11C1TTC10T1TC1CCTT0T110TC-+- 0+00 - -C-++C- 0+-+C-CC++0+- -0+C+-,太阳与月亮,这是基因的象形文字。0也可做基因断句断读符号。注:太阳与月亮指G或0,与C,或读圆圈,半圈。+,-指T与A-----第1个英文字母,1T或it化为-+表示。+对-太阳对月亮/读起来更象形(文字。)CT扫描:C是月亮T是+C,T都是嘧啶。G,与C划——代替。本文为《NATURE》1 ...
shuxian1 目前有哪些方法或手段可以提高外源基因在植物中的表达水平?熟鱼片 植物重组蛋白表达现状的一篇综述文章shuxian1 谢谢了本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming
包小子 请问高手基因芯片有哪几种?他们每孔或者每张芯片的最低样品用量是多少?谢谢!zjubell 这个是个论述题,回答起来太累。建议楼主先google搜索一下,扫扫盲先。xiaoyuan 芯片的样品量要求较高,通常在10微克以上熟鱼片 先给楼主扫扫盲。多年前的一个生物芯片培训教材熟鱼片 楼主分好高啊,借我点吧,55555漠夜长风 谢谢了。。。zhoujueyu 建议上各个公司网站看看。我们以前做的Agilent基因表达谱芯片所需的起始总R ...
gene122 本人遗传学准研究生,现在在实验室,看到有报告基因实验,但是不知道这个实验的原理及目的,哪位好心人解释下zhujoker 这个原理已经在这个版块讨论过了,自己学会搜索吧!下面链接有一些初步的介绍:http://www.biox.cn/content/20050411/10190.htm3090547 多多自己动手本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 ...
polo6892 请问哪个实验室的同学或是老师有Notch1质粒,有点朋友请和我联系下好吗?有事情咨询!多谢!我的EMAIL :zhouwei5352877@163.com,QQ 286358161,我是武汉大学人民医院实验室的研究生!谢谢!liudaifu1997 我也感兴趣,等qinvicky 我们实验室做基因转染的,一直用N2质粒,不过我懂得不是很多~不知能否帮得上你kevinddd 我也需要啊!polo5352877 谢谢,你能把你 ...
qianxubo 今日在阅读文献时见到了“allele specific expression (ASE) assay”,翻译成中文是否应该是“等位基因表达试验”?我以前从来没见过这种试验,请教高手以下问题:1、这种检验方法的由来?2、检验的机理是什么?3、这种检验方法的主要用途?还有,这段话中Conclusion: By using the largest cohorts analysed to date, as well as a standardized phenotype defini ...
zgq8888 求助:我想做一个QPCR检测肝癌组织及正常组织的一个基因表达,我是用哪个做标准品建立标准曲线;另外关于人的内参NAPDH的引物序列,不同文献不同,我应该怎样选择。谢谢zjubell 你要做绝对定量还是相对定量?既然你提取用内参,那应该就是相对定量了所以不需要标准品做标准曲线。但你需要对你的两对引物进行扩增效率测试也是10倍稀释,就拿cDNA即可。如果两个梯度间的Ct值差异刚好是3.326,就非常好了,达 ...
zhangfen5667 因实验需要,想学习关于基因克隆和表观遗传学的基础知识及实验技术,该看什么书或是有什么好的建议吗?bigbang_0_0 分子克隆第三版adamsw 楼上正解,或者你也可以看看current protocol in molecular biology,这个的话不知道你们学校图书馆订了这个没有,是Wiley的,属于current protocol丛书系列,很全很详细。zhangfen5667 谢谢前辈们的指教!:)本文由丁香 ...
带刺蔷薇 各位大侠:我的芯片实验已做完,公司给了差异基因和PATHWAY,GO等分析结果。可我有一大堆的问题和困惑:1.因为公司用了两套软件(Beadstation,genespring)来分析我的结果,所以差异基因有两套,可差别很大,公司说选择和我想要的结果相近的那一套。2.可我怎样从筛选出的几千个差异基因中找到我想要的几个基因呢?查文献?人家已经研究过的我再重复做也没意义了呀!在数据库中找线索?合算序列数据库有好几 ...
fenglei_1 想知道一个基因的读法(JARID1B),希望了解的老师同学不吝赐教,先说声谢谢了freecell Jumonji, AT rich interactive domain 1Badamsw 全称的话就是按照楼上的那样,要是就想读的话,我觉得就按字面拼就可以,【dʒʌrid one B】,读着顺口差不多就行了。本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixion ...
rendangli NF-KB与IL-8 promter区域可以结合,荧光素酶报告基因已经验证了,他们之间还有没有可能存在其他作用方式ylhuang0502 1. Co-IP to test they can physically associate/bind.2. If you can get positive data from #1 experiment, you may try NF-KB inhibitor to see if it can block the associate between NF-KB and IL-8.Good luck! ...
种瓜种豆3 如何描述一个基因在染色体的位置?比如说某基因位于8p12.23, 8q10.12等怎么正确理解这个意思?看了书,查了下,竟然查不到!请懂行的战友告诉下,谢谢版主freecell留言:求助问题时,尽量在标题把问题表述清楚。侠骨仁医 每条显带染色体根据ISCN规定的界标(landmark)分为若干个区(region),每个区又包括若干带(band)。界标包括染色体两臂的末端、着丝粒和某些明显恒定的带。两相邻界标之间为区。每 ...
fanxiaochou 请教:CONSTANS(CO)是什么?谢谢slytjiaofei CONSTANS是一个基因的名字,CO是它的缩写,建议自己先在baidu上搜搜,以下链接可参考以下!!!http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_fdxb200605021.aspxfanxiaochou CONSTANS是长日照途径上控制开花的基因,这个基因的具体信息查不到,想多了解一点。qzhaojing ...