DNA基础知识

1. 限制性内切酶反应一般在灭菌的0.5ml离心管中进行。 2. 20μl体积反应体系如下：

染色体制片技术显示染色体一般的形态和结构成功的关键是获得大量染色体缩短适宜的分裂细胞。 1. 压片法 ① 取材：在适当的时间选取细胞分裂旺盛的组织。 ② 预处理：秋水仙素进行活体或离体处理。 ③ 固定：卡诺固定液固定，迅速杀死生活细胞使染色体的组成蛋白变性，保持染色体形态和结构。 ④ 解离：1mol/L HCl60℃进行酸解，不同的材料的酸解时间不同。 ⑤ 染色：改良石炭酸品红染色。 ⑥ 压片染 ...

Immediately before indcution it is advisable to test the culture to determine the fraction of cells that still carry the target plasmid. This involves plating of cells on four different plates. ...

义翘神州2012年年会力作之《光影故事》，生物专业必看！

二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌：取体重250g左右的封闭群大白鼠，雌雄不拘。 按性别分笼饲养。除给普通食物外，饲以致癌物，即用0.25%DEN水溶液灌胃，剂量为10mg/kg，每周一次。其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由饮用。共约4个月可诱发成肝癌。或单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。 4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌：用含0.06%DBA的饲料喂 ...

生物标志物与早期临床药物研发抗-TWEAK复合物研发举例TWEAK（肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子）是一种多功能细胞因子，可控制包括细胞增殖、迁移、分化、凋亡、血管生成，以及炎症在内的多种细胞活动。TWEAK通过与Fn14结合发挥作用，Fn14 是一种具有高度诱导性的细胞表面受体，与包括细胞核因子- kB（NF-kB）途径在内的多种细胞内信号途径具有相关性。

稻穗籽粒灌浆过程不是同步的，一个圆锥花序中颖花开花迟早与灌浆速率和粒充实率密切相关。先开的颖花（强势颖花）灌浆速率和粒充实率高；后开的颖花(弱势颖花)灌浆速率低，甚至不结颖果，因此弱势颖花低的灌浆速率严重影响和限制了“超级”水稻产量。水稻灌浆过程实际上是一个淀粉积累的过程，受脱落酸(ABA)和乙烯等激素的影响，然而强弱势颖花之间灌浆差异的出现是否与淀粉和激素合成相关基因的 ...

Q1.引物是如何合成的？ 目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种无论采用什么机器合成，合成的原理都相同，主要差别在于合成产率的高低，试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。 (1) 去保护：加入Deblocking脱去碱基上5'- OH的保护基团DMT，获得游离的5'- OH； (2) 耦 ...

本文由丁香园站友 宇宙cosmos 转载，点此查看详情 据美国每日科学网站7月22日报道，美国科学家在7月21日出版的《科学》杂志上撰文指出，他们找到了DNA的第7种、第8种碱基，并在人体胚胎干细胞和实验老鼠器官染色体组的DNA中发现了这两个碱基的踪迹。科学家们指出，最新发现对干细胞和癌症研究非常重要。 几十年来，科学家们一直认为DNA中只包含有4种碱基：腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶，这4种 ...

功能简介： MS-H-Pro的工作模式：A、B、C三种模式。 A模式工作特征如下： ♦ 具有加热和搅拌功能。 ♦用户可以通过仪器前面板进行控制，也可以进行远程控制。 ♦可以设置余热警告、安全温度限制及搅拌子失速监测等功能。 B模式下工作特征如下： ♦具有加热和搅拌功 ...

本文由丁香园站友 Docofsoul 转载并编译，点此查看详情 《科学日报》（２０１１年７月１5日报道）——　编辑基因的能力，象古腾堡的印刷机那样，创新性强、见效快且潜力无穷。不过，也象古腾堡的发明，虽然技术炫目，但创新伊始，仍难尽如人意：大多数的DNA编辑工具既慢且贵，而且难用。但哈佛大学的研究者目前正在开发基因组规模编辑工具，可以象字处理软件那样，通过应用&ldquo ...

来源自：http://protein.dxy.cn/bbs/topic/17898080 当抗体孵育、TBST漂洗结束后，进入ECL显影步骤。当然，目前国内一些实验室已经换用仪器扫描荧光信号，而我们更是二抗直接连荧光蛋白连ECL和常规的底片显影都省略了，因此以下所讨论的某些细节问题可能不再出现。 首先坛子上还有少数实验室处于DAB显色时代，奉劝一句，都走到最后一步了就不要节省了；DAB显色的灵敏 ...

单核苷酸多态性( single nucleotide olymorphisms ,SNPs)，主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA 序列多态性。

基因是DNA上具有遗传学效应的核苷酸顺序 基因的概念随着遗传学的发展与研究的深入，不断变换形式，扩大内涵，人们所知的基因种类也日益增多，可以说遗传学的发展史是对基因的认识史。 孟德尔在分离定律和自由组合定律中认为生物性状的遗传是由遗传因子决定的，这是最初的基因概念，但当时并不知道遗传因子的物质基础是什么，位于生物体的什么位置。1909年丹麦遗传学家约翰生(W.Johansen)提出 ...

基因的本质是一段有功能的DNA 一个基因是编码一条多肽链或功能RNA(tRNA、rRNA、snRNA等)所必需的全部核苷酸序列。决定性状表现的遗传物质――基因的本质是一段有功能的DNA(有时是RNA)，从以下实验得到证明。 1928年英国细菌学家格里费斯(Fred Griffith)利用肺炎双球菌(Streptococcus pneumoniae)的光滑型(有荚膜，毒性强，可引发肺 ...

免费分子生物学软件 互联网上有许多免费分子生物学软件，一些是在线使用的，也有一些可以下载在PC机上使用。(一)质粒作图软件(P1asmidProcessor) PlasmidProcessor是一种免费绘制质粒图软件，可以绘制线状或环状DNA。用户定义限制位点、基因段与多克隆位点，还可插入或删除DNA片段，支持剪贴板、打印和存盘功能。下载站点：http：//www.uku.fi/_k ...

四聚体染色技术【试剂与设备】（1）待检细胞：PBMC，脾细胞，淋巴结细胞或经过相应病毒感染细胞（注意其HLA-A型别）刺激形成的CTL细胞（2）FACS缓冲液（FB）：PBS+2%小牛血清+0.1%叠氮钠（3）2 X HLA-I/抗原肽四聚体：2倍使用浓度的HLA-I/抗原肽四聚体（4）1%多聚甲醛(PFA)的PBS（5）离心机（6）流式细胞分选仪（7）加样器、吸头等【操作步骤】（1）将待检细胞 ...

核酸疫苗接种方法 (1)注射法：医用注射器是最简单和最常用的接种工具。由于骨骼肌细胞并非唯一可以摄取DNA疫苗组分的，根据疫苗的性质特点也可选择其他途径的注射方式，如静脉注射、皮内注射、皮下注射、腹腔注射等。 (2)“无针头”注射导人系统：“无针头”注射装置是一种强力喷射系统，即在高压下使接种物形成细流喷射而出，可穿越组织和细胞。当DNA从该装置中喷出时，DNA在高压下可能发生断裂 ...

Feulgen反应步骤 标本需经固定后方可染色，Carnoy固定液可按无水乙醇：三氯甲烷：冰醋酸为6：3：1比例配制。固定后石蜡切片即可。尽量不用新鲜组织恒冷箱切片，因胞质中存在的缩醛磷脂会出现非特异染色。若必须使用恒冷箱切片，需做切片后固定。用已固定的组织石蜡切片可消除缩醛磷脂。减少非特异染色，具体操作如下： 1．切片脱蜡入水； 2．用lmol／L HCl浸洗； 3．切 ...

ceshi