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碱性磷酸酶标记试剂的使用

实验试剂 碱性磷酸酶缓冲液:100mmol/L NaCl,5mmol/L MgCl2,100mmol/L Tris(pH9.5);NBT溶液(0.5gNBT用10ml 70%DMF溶解,贮存在4℃);BCIP溶液(0.5gBCIP用10ml100%DMF溶解,贮存在4℃); 20mmol/LEDTA用PBS溶解,DPX。 实验设备 光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果) ...

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外质体是抗鼠先天性弓形体病的有效疫苗

实验材料 1. 动物 6-10周的CBA/J小鼠 2. 寄生虫 鼠弓形虫 RH株速殖子 76K株囊肿 实验步骤 1. 弓形虫属超声处理的准备清洗速殖子,超声处理,离心。最后一次离心的上清液作为抗原的来源。蛋白浓度用蛋白试剂盒检测,以牛血清蛋白(BSA)作为标准。等分装好存于-80度备用。2. DC细胞系和外质体分离SRDC DC系SRDC是脾细胞DC系,形态、表型和活性与 ...

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Immunocytochemistry Protocol Using Anti-GFP Antibodies(使用抗GFP抗体的免疫细胞化学实验方案)

实验试剂 X Dulbecco’s Phosphate-buffered saline (D-PBS)Fixative solution: 4% Formaldehyde solution in PBS pH 7.4Permeabilizing solution: 0.25% Triton® X-100 in PBS pH 7.4Blocking solution: 5% Normal Goat ...

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Genome-wide Screen for miRNA Targets Using the MISSION Target ID Library

实验材料 NameCompanyCatalog NumberCommentsJumpStart REDTaq ReadyMixSigma-AldrichP0982GanciclovirSigma-AldrichG2536G418Sigma-AldrichG8168PuromycinSigma-AldrichP9620Topo TAInvitrogenKNM4500-01 GenElu ...

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Specimen Preparation, Imaging, and Analysis Protocols for Knife-edge Scanning Microscopy

实验步骤 1. Specimen preparation: Golgi-Cox 1) This protocol closely follows the protocol of Mayerich et al.7. 2) The C57BL/6J mouse is deeply anesthetized using isoflurane inhalant anest ...

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Vacuum Protocol: Purification of Viral Nucleic acid from Plasma or Serum

实验试剂 Regents supplied by user1. Ethanol -approximately 0.3 ml per sample. 实验设备 Equipments supplied by user1. Tabletop microcentrifuge and sterile 1.5 ml tubes2. Vacuum Manifold3. Water bath - se ...

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噬神经元的腺病毒载体的构建

实验试剂 人类胚胎肾(HEK)293T细胞腺病毒转移载体质粒腺病毒包装载体PLP1,pLP2(之前),PLP / VSVGDMEM培养基青霉素,链霉素-谷氨酰胺(100X)磷酸盐缓冲液PBS(-) 胎牛血清凝聚胺 实验设备 10-cm的细胞培养皿50毫升锥形离心管Steriflip-GP过滤器(0.22微米) 超离心管17.0mL5%二氧化碳培养箱荧光显微镜生物安全柜离心机 ...

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Isolation of Untouched Human CD4+ T Cells from Peripheral Blood Mononuclear Cells (PBMC)

实验原理 A mixture of mouse IgG antibodies against the non-CD4 T cells is added to the starting sample and allowed to bind to the cells. Depletion MyOne™ Dynabeads® are added and will bind to the antibo ...

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酵母蛋白质和 RNA 的制备(稀碱法)

实验原理 酵母细胞富含蛋白质和核酸。用稀碱液(0.2% 的氢氧化钠)处理酵母使细胞裂解,离心收集上清液,得到酵母核蛋白抽提液。用盐酸调节抽提液 pH 至 3.0 (核蛋白的等电点),核蛋白溶解度下降大量沉出,离心收集沉淀物为酵母蛋白质粗制品。酵母核蛋白是一种结合蛋白质,是蛋白质与核酸的复合物。酵母核酸主要是 RNA (含量为干菌体的 2.67 %-10.0 %), DNA 含量较少,仅为 0.0 ...

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Miniprep of Plasmid DNA (Alkaline Lysis Method)

实验步骤 1.Inoculate 2 ml of L2 media containing the appropriate antibiotic with a single bacterial colony picked using a sterile toothpick. Incubate at 37 degrees overnight with vigorous shaking.2.Tra ...

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Sea Urchin Axonemes

实验试剂 1.4 Male S. purpuratus sea urchins. (It is impossible to tell what sex sea urchins are until they shed gametes from the five pores on the top center of the animal thus order twice as many anima ...

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Pre-Cast Gels for Safe Nucleic Acid Analysis

实验步骤 1. Loading E-Gel® with SYBR Safe™ Gels1) Pre-running E-Gel® with SYBR Safe™ i. Plug the E-Gel® PowerBase™ v.4 into an electrical outlet using th ...

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E.Z.N.A. Mag-Bind Blood DNA Protocol (1-100 ul Blood)

实验试剂 Regents to be provided by user1. Absolute ethanol (96%-100%) 实验设备 Equipments to be provided by user1. Nuclease-free 1.5 mL centrifuge tube (for single tube preparation)2. 500 ul Nuclease-fr ...

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流式细胞术急性分离小鼠小胶质细胞

实验步骤 1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。 2. 用剪刀去头。 3. 剥开头骨的软组织。 4. 除去下颌骨。 5. 除去头骨延髓到上颌骨之间的组织。 6. 手术剪刀,取出头骨顶部,顺时针方向切割,开始和结束于右后鼓膜钩。 7. 舀出大脑,维持组织的完整性。 8. 立即将脑组织置于预冷的流式细胞术缓冲液中(1%BSA 1mM的EDTA的 pH值7.4 0.1M PBS,50 ...

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三色书虱外部形态的扫描电镜观察

实验试剂 饿酸戊二醛叔丁醇单宁酸乙腈 实验设备 光学显微镜S-3000N电子显微镜 E-1010/E离子溅射仪 实验材料 三色书虱采自野外,在实验室内建立种群。 实验步骤 1. 玻片制作将用75%-80%酒精浸泡的书虱标本用70%的酒精洗涤2-3次,用加拿大胶封固,在45℃烘箱中烘15天左右,干燥后用指甲油加封盖玻片的四周,第一次干燥后,再二次加封,防止固定胶内的水 ...

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Percoll细胞分离液的使用方法

实验原理 Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(O),粘度也很小,可形成高达1.3g/mL密度,采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200~1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低,所形成的梯度十分稳定。此外,Percoll不穿透生物膜,对细胞无毒害,因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒,还可将受损细胞及其碎片与完好的活细 ...

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噬菌体抗体库的富集筛选

实验步骤 1. 将用于筛选特异性抗体的抗原用0.1mol/L pH值8.6碳酸钠碳酸氢钠溶液做一定量稀释后包被96孔板,一般抗原浓度要求至少25μg/ml,每孔50~60μl,4℃过夜。2. 次日洗去板中未吸附的抗原,用3% BSAPBS或用4%~5%脱脂奶粉PBS于37℃封闭1h 。3. 弃封闭液,在每孔加入50~70μl噬菌体抗体库,37℃孵育2h。4. 弃孔中未结合噬菌体 ...

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水稻RGA基因组规模的鉴定与分析

实验步骤 1. 水稻RGA的搜索搜集已报道的45个R基因,然后用它们对粳稻蛋白质数据库进行BLASTP (参数取E,最小长度为该基因的80%),获得所有粳稻的RGA序列。去除粳稻数据库中存在的重复克隆,建立一个粳稻RGA蛋白数据库。同时,根据每个BLASTP搜索中匹配最好的结果,得到这些粳稻RGA的核普酸序列。此外,去除粳稻数据库中存在由于的克隆重复造成的R基因的重复。2. 水稻RGA的结构分类 ...

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E.Z.N.A.® Protocol for Bacteria

实验试剂 Additional materials to be supplied by user1. RNase-free Lysozyme 2. TE buffer (10 mM Tris-HCl pH 7.6 1 mM EDTA) Procedure 实验步骤 1. Harvest Cells and resuspend in 500 ul TE/lysozyme and ...

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Reprogramming Fibroblasts with the CytoTune-iPS Reprogramming Kit

实验试剂 1. CytoTune™ Sendai Reprogramming VectorsNote: For successful reprogramming you need all four reprogramming vectors.2.Human neonatal foreskin fibroblast cells to reprogram3.Gibco® Mouse Embryo ...

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