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实验基础

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消毒与灭菌

一、消毒与灭菌的概念   在延期界中,微生物无处不有,无孔不入,如制种所用的原料、水、工具、设备、操作的双手和衣着以及空间,都有大量的微生物存在。因此要分离和培养食用菌纯种,首先必须将培养基进行灭菌达到灭菌状态,并对生产过程的各个环节以及环境也必须进行消毒,昼减少其它微生物的存活而造成生产的污染,因此消毒灭菌是菌种生产过程中必须掌握的最主要关键技术之一。 (一)消毒 具有杀死致病微生物的作用或方法 ...

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链霉菌(放线菌)超声破碎条件

放线菌属于原核生物系统进化树上的(G+C)摩尔百分含量(mol%)高的革兰氏阳性菌(Eubacteria)分枝类群,它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性,但在其不同类群中,细胞壁的化学组分变化很大。在做大肠杆菌超声时,采用的是400W,破碎5s停5s的方法,效果不错,但是用在链霉菌上,由于细胞壁组成差异一般没什么效果。 链霉菌(放线菌)超声破碎前处理一般是配置成一定浓度的菌悬液。 ...

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黄连上清丸微生物限度检查方法学验证

【摘要】 目的:对黄连上清丸微生物限度检查方法进行方法学验证。方法:采用平皿记数法,分组分别使用5种实验菌验证。试验组取供试液加菌液注入培养基中培养。菌液组分别取各实验菌液注入培养基中培养。稀释剂对照组取稀释剂加菌液注入培养基中培养。供试品对照组取供试液注入培养基中培养。通过3次独立的平行试验,分别计算各试验菌每次试验的回收率。采用观察大肠埃希菌、大肠菌群与阴性金黄色葡萄球菌在相同环境下的培养来验 ...

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大肠杆菌培养方法

使用牛肉膏蛋白胨培养基 组成成分:牛肉膏 3g蛋白胨 10gNacl 5g琼脂 15~20g水1000mLPH7.4~7.6。 具体配置步骤: 1.称药品 按实际用量计算后按配方称取各种药品放入大烧杯中.牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量随后放入热水中牛肉膏使与称量纸分离立即取出纸片.蛋白胨极易吸潮故称量时要迅速. 2.加热溶解 在烧杯中加入少于所需要的水 ...

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细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法

一、常用培养基1、LB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用1NNaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。2、SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。分成100ml的小份,高压灭菌。培养 ...

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大肠菌群简介

1、大肠菌群是指一群好氧及兼性厌氧在37℃、24h能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌它主要来源于人畜粪便通常可作为水体粪便污染的指标菌  2、大肠菌群是指37℃生长时能发酵乳糖在24h内产酸产气的革兰阴性无芽孢杆菌除包括大肠埃希氏杆菌属外还包括肠杆菌科的肠杆菌属、枸椽酸菌属、克雷伯菌属  3、大肠菌群是指一群能在36℃24h内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌. ...

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大肠菌群测定的操作细则

大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。 食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。 1 设备和材料 1.1 温箱:36±1℃。 1.2 冰箱:0~4℃。 1.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。 1.4 天平。 1.5 显微镜。 1 ...

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大肠杆菌的检测方法

大肠菌群是一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌,该菌主要来源于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中的大肠菌群数系以100ml(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。 2.仪器设备与器具: 2.1 恒温培养箱:36±1℃。 2.2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。 2.3 接种针。 2.4 显微镜 ...

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酵母的同性交配

病原体酵母“白念珠菌”过去曾被认为是严格无性生殖的,但现在人们知道,这种生物有一个秘密交配循环。交配通常涉及a-细胞类型和alpha-细胞类型的融合,与相关酵母“酿酒酵母”中所见的类似。现在,另外一种新颖的有性生殖模式已在“白念珠菌”中被发现:在特定情况下,即在没有为一种分泌出的蛋白酶编码的BAR1基因存在的情况下,高效同性交配可在a-型细胞之间进行。“白念珠菌”的同性交配与相关真菌病原体“新型隐 ...

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菌种中英文对照表

Abiotrophia adjacens 毗邻贫养菌 Abiotrophia defectiva 软弱贫养菌 Achromobacter spp 无色杆菌属某些种 Acinetobacter /Pseudomonas spp 不动杆菌/假单胞菌属某些种 Acinetobacter baumannii 鲍氏不动杆菌 Acinetobacter calcoaceticus 醋酸钙不动杆菌Acineto ...

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菌种保藏的几种方法【基本实验技术】

基本原理   微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。  低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可分为以下几种:1.传代培养保藏法  又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4 ...

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金色葡萄球菌具有自控毒素机制

加拿大西安大略大学的研究人员发现金色葡萄球菌具有自我控制毒素机制,这有助于人类更好地了解该超级细菌的自我演化进程,从而开发出新的抗生素。相关研究成果发表在5月24日《自然·医学》网络版上。   金色葡萄球菌是医院交叉感染的主要原因,也是普通人群中的第二大常见感染源。在北美,每年有超过50万人因此类感染入院,所消耗的医疗费用高达60多亿美元。金色葡萄球菌中含有的致命超级抗原会引起免疫系统的大规模有害 ...

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E.coli genotypes(大肠杆菌基因型)

Nomenclature & AbbreviationsA listed gene name means that gene carries a loss of function mutation a Δ preceding a gene name means the gene is deleted. If a gene is not listed it is not known to ...

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大肠杆菌常用菌株(Commonly used strains)

AG1endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 glnV44 hsdR17(rK- mK+)AB1157thr-1 araC14 leuB6(Am) Δ(gpt-proA)62 lacY1 tsx-33 qsr'-0 glnV44(AS) galK2(Oc) LAM- Rac-0 hisG4(Oc) rfbC1 mgl-51 rpoS396(Am) rpsL31(s ...

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快速检测(纸片法)常见问题

1、纸片法采用的检测原理?-- 显色培养基法2、检测大肠菌群时对检样,为什么国标方法不需要调节PH值,而快速检测纸片法(包括3M等产品)需要调节PH值至中性?---原因有二,第一国标法是根据产气管数,对照MPN表出结果,受酸碱性对颜色的影响可忽略,而纸片法是通过颜色对照出结果,受酸碱性影响大,不调PH值会影响结果;第二,培养基已调治中性,而且用量与检样相比很大。可以中和检样的酸碱性,而纸片法不能。 ...

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em菌种制作方法

EM原液的基本用法1、直接稀释法  根据使用目的,将EM原液按一定比例用水直接稀释,用于作物叶面喷施、农田浇灌、畜禽饮用、环境除臭等等(稀释比例请参照各领域应用方法)。注意:稀释用水最好是井水,如使用自来水,应放置一昼夜使氯气散发后使用(下同)。2、制作活性液  将EM原液与等量糖蜜(可用红糖代替,下同),按10-50倍不同比例用水稀释后(糖蜜或红糖要先用热水溶化,下同),置于密封容器内厌氧发酵( ...

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em菌种配方微生物饲料配方

制作方法与配方一、【EM原液发酵方法】 :制作EM菌种发酵液——EM原液 A、菌种活化:用EM菌种10克、红糖0.1公斤(红糖先用热水溶化),加入1公斤的水。注:(先把水加热到100°C后加入红塘或白糖,而后继续加热5分钟。冷却到40°C时加入EM菌种),密闭发酵(35°C-37°C温度)下发酵3-5天,第3天可以放气一次!打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。可以作为液体菌种使用。 B、制作原液:将 ...

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原核生物与真核生物翻译起始阶段有何异同?

相同之处:(1)都需生成翻译起始复合物;(2)都需多种起始因子参加;(3)翻译起始的第一步都需核糖体的大、小亚基先分开;(4)都需要mRNA和氨 酰- tRNA结合到核糖体的小亚基上;(5)mRNA在小亚基上就位都需一定的结构成分协助。(6)小亚基结合mRNA和起始者tRNA后,才能与大亚基结 合。(7)都需要消耗能量。不同之处:(1)真核生物核糖体是80S(40S+60S);eIF种类多(10多 ...

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微生物菌种保藏方法

1、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生产菌种的保存。  传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 ...

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标准菌株质控品

菌株品名 菌号 用途 金黄色葡萄球菌(敏感菌珠) ATCC25923 用于葡萄菌属或肠球菌属K-B法药敏质控凝固酶血浆(+)、染色液质控 ...

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