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免疫检验

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免疫细胞化学(ICC)和免疫荧光(IF)实验方案

免疫细胞化学/免疫荧光(ICC/IF)是一种使用荧光抗体或染料来检测细胞内靶抗原的技术。本实验方案详述了使用 Cytospin™ 离心对悬浮细胞进行 ICC/IF 的流程。点击下载此实验方案一般流程1. 用聚乙.烯亚胺或多聚赖氨酸涂覆盖玻片,在室温下放置 1 小时。2. 用无菌水充分漂洗盖玻片 3 次,每次 1 小时。3. 充分干燥盖玻片,在紫外光下灭菌至少 4 小时。4. 使细胞在玻璃盖玻片上生长,或制备 Cytospin 或涂片制备物。5. 用磷酸盐缓冲液 (PBS) 简单漂洗。推荐使用 1 × PBS 0.1% Twe ...

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白介素21(IL21)在人生物样本中的精确检测实验

DL-IL21-HuOverview:Other names:Za11Function:Cytokine with immunoregulatory activity. May promote the transition between innate and adaptive immunity. Induces the production of IgG(1) and IgG(3) in B-cells. May play a role in proliferation and maturation of natural killer (NK) ...

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白介素1ζ(IL1Z)在人生物样本中的精确检测实验

DL-IL1z-HuOverview:Other names:IL1F7; IL37; FIL1; FIL1(ZETA); FIL1Z; IL-1F7; IL-1 H4; IL-1RP1; IL1 H4; IL1RP1; Interleukin 37; Interleukin-1-Related Protein; Interleukin 1 Family, Member 7Function:Suppressor of innate inflammatory and immune responses involved in curbing ex ...

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UltraMAB 如何用 17K 蛋白芯片验证抗体

抗体是生物学研究中的最常用的一种工具,广泛应用于与免疫检测相关的研究技术中,包括酶联免疫吸附检测、免疫印迹、免疫沉淀和免疫组化等。同时,抗体也是临床监控的重要工具,可用于相关的诊断和治疗。然而,近年来,科学家们发现,抗体相关研究一直存在严重的「重现危机」。研究使用的抗体在质量和性能一致性方面存在巨大的差异,对生物医学研究的可重复性造成了显着的不良影响。而当抗体用于临床诊断时,如果出现非特异性交叉反应,则会出现意想不 ...

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HumaBlot 44FA 全自动免疫印迹检测系统

在 2017 年 9 月举办的 Human 全球经销商大会上,Human 发布了具有全自动加样、全自动结果分析的全自动免疫印迹检测系统——HumaBlot 44FA。HumaBlot 44FA 的全自动过程包括自动加样、自动稀释、温育清洗、膜条烘干、高速成像以及结果判读,可实现全程无人工干预,以 ANA-LIA Maxx 17 项为例, HumaBlot 44FA 仅需两小时就能输出结果,能大幅提高检测效率。产品特点:1. 全自动加样多达 44 个膜条样本位条形码识别系统可直接在温育槽进行样 ...

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化个妆,美美哒~让你的免疫荧光样本拥有两米八的超模气场!

2016 年里约奥运会的开幕式上,超模吉赛尔·邦臣一袭银衣气场全开的走秀震撼了全世界,吉娘娘美得让人窒息!一日,某小博对着吉娘娘的时尚硬照冒「星星眼」时,突然想——我的免疫荧光样本如何拍的像吉娘娘一样 「美艳不可方物」呢?小博同学仔细回顾了以前做过的片子,闭关参悟苦心求索,终于顿悟:免疫荧光要拍好,模 (yàng) 特 (běn) 颜 (zhuàng) 值 (tài) 是诀窍。先天得有好容貌,后 (miǎn) 天 (yì) 化 (rǎn) 妆 (sè) 更重要!通过免疫荧光对样本进行染色,整个流 ...

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手把手课程之 IHC 关键操作步骤

本文重点讲述 IHC 操作流程中的关键步骤,并提供数据以支持及解释 CST 在实验过程中所提的建议。最后,本指南列出了 CST 科学家内部常用且最适用于与抗体配套使用的 IHC 试剂。抗原修复—热诱导的抗原表位修复 (HIER)缓冲液适用于 HIER 的缓冲液有多种。而 CST 常推荐的两种缓冲液是:pH6, 10 mM 柠檬酸盐缓冲液和 pH 8, 1 mM EDTA 缓冲液。缓冲液是否适用于您的实验取决于您所使用的一抗。请查阅产品说明书中所推荐的用于特异性抗体的修复缓冲液。一般而言,EDTA 缓冲 ...

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Western Blot 中如何选择内参抗体

Western Blot 即免疫印迹试验,可以利用 Western Blot 来比较在不同条件下,不同细胞组织中目的蛋白表达量的差异,属于定性,半定量试验。既然有差异性比较,参照物必不可少。Western Blot 试验中的标准(表达量)参照物即内参,有了参照物才能准确地比较目的蛋白表达量的差异。内参一般选用管家基因表达的蛋白,它们在各个组织细胞中表达相对恒定,不会因为外部条件变化而引起表达量的变化。而且内参可以监测整个试验体系是否正常, ...

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流式细胞术应用 | 鉴别 NLRP3 敲除小鼠的循环髓系细胞群

实验简介表面标志物通常用于区分循环血液中的群体。使用表面标志物 Ly6C(造血细胞)、Ly6 G(粒细胞 / 嗜中性粒细胞)和 CD115(MCSF 受体),我们能够描述来自 C57BL/6J 野生型对照小鼠和 NLRP3 敲除样品的新鲜血液中的 循环细胞群。由于 NLRP3 可影响炎症小体形成,所以我们假设单核细胞与粒细胞比例会有差异。此外,我们有兴趣观察对照组与基因敲除组之间 CD115(MCSF 受体)的表达。CytoFLEX 流式细胞仪对于探寻血液循环中的不同亚群具有 ...

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如何做好肥达、外斐试验

作者:赵晴 昆明市东川区人民医院检验科 肥达反应(Widal test): 用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原,检测受检血清中有无相应抗体的半定量凝集试验,称肥达反应(Widal test)。本试验与细菌分离培养同时进行或在前者失败的情况下,能辅助诊断伤寒、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌引起的肠热症。 外斐反应(Wiel-Felix): 斑疹伤寒等立克次体与变形杆菌某些X株的菌体抗原(OXk、OX19 、OX2抗原)具有共同的耐热性多糖类属抗原,常用后者代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应,这种交叉凝集试验称为外斐反应,用于立克次体病的辅助诊断。 传统的肥达、外斐试验采用试管法,存在试剂用量大、结果不易观察等缺点,现介绍一种较实用的平板法,试剂用量仅为试管法1/2、结果易判定等优点。 试验的第一步(准备): 准备一块U型反应板,长18厘米,宽9 厘米,每孔容积1 毫升,并在上面做出清晰标识。 试验第二步(加样): 为方便说明加样步骤,先看反应板示意图: 第五排 ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ 第四排 ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ ○ 第三排 ○ ○

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经常做 western blot,您有了解过 CCD 时间积分吗

CCD积分时间就是曝光时间,就相当于普通胶片相机的快门打开~关闭的时间,积分时间越长,快门打开时间越长,进入相机到CCD表面的光线越多,拍出来的图像越亮,亮到一定程度后,图像有部分或者全白,称为饱和或者过饱和。积分时间越短,图像越暗。应该根据环境光强,合理的选择和设置积分时间。曝 光时间这个概念几乎是每个有摄影常识的人都懂得怎么调,但在化学发光实验中这个指标并不好调。这是因为化学发光是有时间效应的,通俗的说每时每刻发 ...

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基于抗体标记的病毒快速定量系统

ViroTag 检测系统实时提供关键任务数据病毒既危害人类健康,但也可以作为一种工具(如病毒疫苗)治疗疾病,因此近年来对病毒的研究越来越受到重视。然而,科学家们遇到了不少挑战,其中最主要的就是一直缺乏实时的、在线的分析方法,用于以病毒为直接产物或者病毒为载体的蛋白表达系统的研发和生产中。现在,我们找到了一种检测病毒的新方法,应用 ViroTag 检测系统,只需要标记粗制或纯化后的样品,用 Virus Counter3100 6 min 即可获 ...

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入坑之前需谨慎:盘点 CAR-T 实验十大雷区

话说肿瘤医院的熊主任自从看到陈博上期的《CAR-T 实体瘤靶点英雄谱:夜空中最闪亮的星》之后,鸡血满满,奋发图强要做 CAR-T 实体瘤研究!派出得力干将汪博士!选择靶标!设计载体!体外验证!体内实验!过伦理!上临床!出任院长!迎娶白富美!走上人生巅峰!然而,半年过去了,熊主任内牛满面抱着陈博大腿哭诉:「一入 CAR-T 深似海,从此节操是路人」「为啥我的实验不顺利?」「为啥 CAR-T 研究到处都是坑?」陈博也很无奈:「老熊啊,你就是太顽皮,讲座听得不认真, ...

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ELISA实验牛奶样本处理方法

在酶联免疫ELISA实验中,涉及到牛奶样本的时候,具体的牛奶样本处理方法有以下两种:样本处理1:取 10ml牛奶放入离心管,加入10ml乙酸乙酯,超声震荡30min,然后4000g离心10min(如两相之间出现乳化层,则将样品瓶放在80℃的水浴 中约5min,再离心)移取1ml乙酸乙酯层至另外试管中,60℃氮气流下蒸干,残留物用缓冲液2ml缓冲后备用,前处理过程约需2小时。处理2:取 10ml牛奶10℃3500G离心10MIN, ...

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详解16种肿瘤标志物,看完不再困惑

肿瘤标志物在1978年就被发现了,它是指在血液、体液及组织中可检测到的与肿瘤相关的物质,达到一定水平时,可反映某些肿瘤的存在。 血清肿瘤标志物分类: 一个最广谱的指标:癌胚抗原(CEA)1965年发现的CEA可谓是最广谱的指标,它的升高可见于结/直肠癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫及子宫颈癌、泌尿系肿瘤等,其他恶性肿瘤也有不同程度的阳性率。总之,腺癌中CEA最容易升高,其次是鳞癌和低分化癌。肿瘤分期晚、瘤体负荷大、肿 ...

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MHC 四聚体技术:检测抗原特异性 T 细胞的金标准

细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分 T 淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体(TCR),与 MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽,启动获得性/特异性免疫应答机制,比如 T 细胞介导的细胞免疫和 B 细胞介导的体液免疫。由于 TCR 与 MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低,半衰期短,相互结合后容易快速脱落,重组的可溶性 MHC-抗原肽复合物单体并不适合用于抗原 ...

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基于抗体标记的病毒快速定量系统

病毒既危害人类健康,但也可以作为一种工具(如病毒疫苗)治疗疾病,因此近年来对病毒的研究越来越受到重视。然而,科学家们遇到了不少挑战,其中最主要的就是一直缺乏实时的、在线的分析方法,用于以病毒为直接产物或者病毒为载体的蛋白表达系统的研发和生产中。现在,我们找到了一种检测病毒的新方法,应用 ViroTag 检测系统,只需要标记粗制或纯化后的样品,用 Virus Counter3100 6 min 即可获得高精度的病毒定量结果。快速追踪生产体系 ...

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ELISA 中常见问题及解决方法

ELISA 试验以灵敏度较高、特异性较好的特点得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我公司将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期提高试验质量。Elisa 试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡至少 30 分钟。2 加样 可能原因:1)血清或血浆标本分离不好即进行 ...

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免疫荧光的 10 种检测方法你知道吗?

标记免疫技术发展最早的一种是免疫荧光,它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术,通过将抗体与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括,细胞固定和通透,封闭,孵育一抗,二抗等。除了这些基本步骤,接下来的实验方法希望可以帮到您。1. 细胞固定和通透为达到最佳的检测效果,细胞需要经过固定和通透。步骤很重要,细胞和抗原需要保证最佳的结构,并利于抗体与抗原结合。通常情 ...

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诊断慢性乙型肝炎:HBV DNA检测知多少?

诊断慢性乙型肝炎可能需要进行几项血液检测,以确定感染是否对肝脏造成损害,并明确感染阶段。当决定患者是否需要进行治疗以及应如何监测时,医生会考虑所有这些结果。 现在,我们一起来讨论上述检测之一,HBV DNA检测或病毒载量检测,看看它如何快速提供患者的乙肝感染信息。 血清中乙肝病毒DNA水平是乙肝病毒复制的可靠定量指标。聚合酶链反应(PCR)技术是最常用的检测HBV DNA的方法,可以检测血液样本中迅速生成的HBV DNA片段。目前,病毒载量通常采用“国际单位/毫升” (IU/mL) 为单位。然而,在过去,它的数量单位以拷贝/升(拷贝/毫升)来表示,如果检测到的HBV DNA≥105拷贝/毫升说明乙肝病毒复制较活跃,体内的病毒量较多。在一些地区和实验室,仍然使用这一计量单位。如果需要将拷贝换算为国际单位,大约为1个国际单位≈5.6拷贝,国内一些厂家试剂盒的换算系数为1。因此,面对不同试剂的HBV DNA检测报告,需要了解检测试剂国际单位与拷贝间的换算系数,才能进行比较。 HBV DNA 检测的敏感性可能受不同实验室测试的影响,因此,最好使用相同的实

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