免疫细胞与组织染色实验

免疫荧光技术直接免疫荧光法测抗原基本原理　　将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。试剂与仪器l 磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4l 荧光标记的抗体溶液：以0.01mol/L，pH7.4的PBS进行稀释l 缓冲甘油：分析纯无荧 ...

ELISA的概念、原理、操作步骤ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 　　(一)　原理　　ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗 ...

ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题,本人在刚开始做ELISA时就面临很多困难,虽然有师兄师姐铺路,但还是常常做得一塌糊涂,比如说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空白还低......自己也为此苦恼过很长一段时间,随着自己技术水平得提高,或多或少地也掌握了ELISA体系的脾气,也是熟能生巧吧,现在做方阵,做ELISA已是轻车熟 ...

免疫荧光组化技术一、荧光的特征分子都含有电子，电子在不停地运动着。根据量子理论，运动着的电子可以处于一系列不连续的能量状态中，电子遵守一定的规则，要以从一个能级向另一能级跃迁，并伴随着与能级差相对应的特定能量的吸收或释放。激发 当电子吸收能量跃迁到较高能级，这个过程叫激发。发射 以辐身方式跃迁时，能量转化成相应波长的光，这个过程叫发射。荧光 跃迁到激发态的电子，大多处于单重激发态。如果电子直接从单重激发态以辐身方式跃迁到基态 ...

今天因为要学做免疫组化，在网上找了很久才找到一本介绍免疫组化的好书，很系统，也很全面，请大家共享!实用免疫细胞与核酸分子杂交技术http://www.37c.com.cn/literature/library/theory/102/前言第一章　总论　　第一节 有关的免疫学理论　　　　一、抗原、抗体的概念及抗原抗体的关系　　　　　　（一）抗原　　　　　　（二）抗体　　　　　　（三）抗原与抗体的关系　　　　二、抗原的性质及种类　　　　　　（一）抗原的性质　　　　　　（二）抗原的种类　　　　三、抗体的性质和种类　　　　　　（一）抗体的一般性质　　　　　　（二）抗原性和 ...

一、免疫细胞化学技术的概述•免疫细胞化学(immunocytochemistry, ICC)–是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定细胞内抗原的成分(主要是多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为～。(一) 对抗原和抗体的要求•具有特异性高和亲和力强的抗体是实验成功的首要条件。–对抗体的要求：纯度高、比活性强；•高度特异性抗体的获得，取决于抗原的纯度。–对抗原 ...

免疫荧光细胞化学染色方法一、标本制作　　可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。二、荧光抗体染色方法　　（一）直接法　　1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），在室温或37℃染色30min，切片置入能保持潮湿的染色盒内，防止干燥。　　2．洗片 　倾去存留的荧光抗体，将切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗两次，搅拌，每 ...

转自http://www.congenes.com/htm/support_1.htmELISA的实验操作所要求的条件是比较严格的，无论是对实验的硬件条件还是对实验的操作人员的技术要求，都是如此。下面所提到的就是一些在进行ELISA实验时所要注意的一些问题。一、ELISA实验通用规则1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。2、要配备20ul、50ul、100ul、1 ...

说明：这是我今年做免疫组化的一点体会，奉献给大家。如有不正确的地方，敬请指教。同时，这也是我应付《免疫组化》的一份作业，老师给了我85分。斑竹呀，如果觉得有点用，就请鼓励一下，加点分吧！:D:D:D应用SABC法进行免疫组化染色的体会SABC（Strept Actividin-Biotin Complex）法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。由于该方法中的链霉亲和素的等电点接近中性（pH=6.0-6.5） ...

如何选择二抗——根据一抗种属及类型选择合适的二抗二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，**捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑：【一抗的种属来源】二抗 ...

免疫组化基础知识免疫组织化学的概念：免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。免疫组化实验所用的抗体有哪些？免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接 ...

Staining, histochemistry and histotechnologycompiled byJ. A. Kiernan,Department of Anatomy and Cell Biology,The University of Western Ontario,London, CanadaTable of ContentsFIXATION, FREEZING ETundefined_Carbodiimides_as_fixativeundefined_Carnoy_~8amp~J_alcoholic_fixativeundefined_Perfu_...

固定是免疫组化的第一步，很多人都忽视了这一步，认为用福尔马林就行，其实学问也挺大的用于免疫组织化学的固定剂种类较多，性能各异，在固定半稳定性抗原时，尤其重视固定剂的选择，介绍如下。　　1．醛类固定剂　　双功能交联剂，其作用是使组织之间相互交联，保存抗原于原位，其特点是对组织穿透性强，收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K链和λ链的标记效果良好，背景清晰，是常用的固定剂。　　（1）10%钙-福尔马林液（浓甲醛10ml，饱和碳酸钙90 ...

最近论坛对免疫组化双重染色的问题比较多，我想和大家集中讨论一下双重染色的一些要注意的问题。免疫组化双重染色按标记物分：免疫荧光双重标记，免疫酶双重标记。免疫荧光双重标记因为我没做过，没有发言权，我目前主要是做免疫酶双重标记，接下来就我个人体会谈谈自己的一些看法（绝对原创）我所要讨论的是以下三个方面：1 ：方法的选择目前主要是平行两步法和序贯平行法：前者即同时加入两个不同种属的一抗，简而言之，就是两个抗原同时染；后者 ...

请规范发贴，详情参见《免疫学技术讨论版》版规栏第二条。谢谢合作。本章讨论临床免疫学实验室用于检测分析物的分析方法，这些分析物在诊断或监测有立即发生的超敏反应或免疫性疾病的病人很有用。通常把这些实验方法总称为免疫化学技术或免疫测定方法，因为它们使用了抗体，抗原，或这两者作为检测试剂。至于天然抗体，估计一个个体能合成106-108那么多，每一种抗体都有不同的结合特异性。1.2 与抗原相互作用的结合已特异性地把宿主的防御定 ...

实用免疫细胞与核酸分子杂交技术前　言第一章　总论第一节　有关的免疫学理论一、抗原、抗体的概念及抗原抗体的关系（一）抗原（二）抗体（三）抗原与抗体的关系二、抗原的性质及种类（一）抗原的性质（二）抗原的种类三、抗体的性质和种类（一）抗体的一般性质（二）抗原性和分类特征（三）抗体的种类（四）抗原与抗体的反应四、抗体形成的机理（一）免疫反应的形成（二）影响抗体产生的因素五、补体的系统第二节　免疫细胞化学的有关技术概述一、抗体的制备和配制（一）抗体的制备 ...

原位杂交组织化学概述　　一、核酸分子杂交技术　　1961年Hall开拓了液相核酸杂交技术的研究，其基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序，通过碱基对之间非共价键的形成，出现稳定的双链区，形成杂交的双链。自此以后，由于分子生物学技术的迅猛发展，特别是70年代末到80年代初，分子克隆、质粒和噬菌体DNA的构建成功，核酸自动合成仪的诞生，大大丰富了核酸探针的来源，新的核酸分子杂交类型和方法不断涌现。按其作用方式可大致分为 ...

当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体，以及所用的检测系统是否和一抗匹配，这一点是非常重要的。比如，如果一抗是兔来源的抗体，二抗一定要用抗兔的二抗来匹配；或一抗是小鼠的IgM一抗，二抗必须是山羊/兔抗 ...

（共享） 高免血清制备的方案！！（共享） 免疫组化操作流程(共享) 实验室分子生物学免疫学等常用试剂配方(共享）92-99四军大免疫博士入学试题汇总！(共享)anti-CXCR1, anti-CXCR2, anti-CCR7 小鼠抗人单克隆抗体剩余（共享）DNA疫苗技术(共享）Eight Immunology flashs（共享）ELISA处理软件（1）(共享）elisa的通用规则(共享)Elisa分析软件（共享）ELISA数据处理软件（2）（共享）ELISA数据 ...

应助后请跟贴说明并将应助的帖子连接附上以便加分。GOOD LUCK!【求助】人胃癌BGC－823细胞相关抗原的表达【求助】大鼠急性脑片培养后将该脑片制成石蜡切片的具体方法 【求助】大鼠的T淋巴细胞亚群的正常值 【求助】原代神经细胞免疫化学染色 【求助】胶体金免疫组织化学 【求助】恶性黑色素瘤免疫组化过程中如何进行脱色和预防脱片 【求助】大鼠MCP-1免疫组化 【求助】作免疫组化时噬菌体的滴度 【求助】肾癌做免疫荧光染色常用的标志物 【求助】小鼠小脑 ...