免疫细胞检测技术

B细胞发生高频突变的特点 ①通常出现在生发中心。 ②主要发生在重排过的B细胞V区基因，也可发生在V区基因旁侧区，一般不发生在C区基因中。突变大部分集中在重链和轻链V区的互补决定区(complementarlty determining region，CDR)。 ③主要是点突变，偶见发生基因缺失和重复。 ④突变频率很高，每一次细胞分裂约在l 000个bp中发生一个点突变，而 ...

肿瘤的被动免疫治疗过继性免疫疗法 过继性免疫疗法(adoptiveimmunotherapy)是把具有抗肿瘤活性的免疫血清或免疫细胞转输到免疫功能低下的肿瘤患者，在体内发挥抗肿瘤作用，以此达到治疗肿瘤的目的。 1．淋巴因子激活的杀伤细胞 小鼠脾脏细胞或人外周血淋巴细胞在体外培养中，经高浓度的细胞因子(主要为IL-2)诱导后发生扩增，产生一类能非特异性地杀伤自身和异体肿瘤细胞的效应 ...

同种反应性T细胞是参与同种异体移植排斥反应的关键效应细胞，其实验依据为：先天性无胸腺的啮齿类动物(如裸鼠)体内无成熟T细胞，不能排斥移植物；新生儿期摘除正常大鼠或小鼠的胸腺，会发生同样情况；上述情况中，若注射同系正常小鼠T细胞，则小鼠即可对移植物产生排斥反应)。长期以来，有关宿主对同种移植物的识别和效应机制存在诸多令人困惑的问题：首先，无亲缘关系个体间进行同种移植 ...

在医学上应用自体或异体的正常细胞、组织、器官置换病变的或功能缺损的细胞、组织、器官，以维持和重建机体生理功能，这种治疗方法称为细胞移植、组织移植或器官移植。移植术后，受者免疫系统可识别移植物抗原并产生应答，移植物中免疫细胞也可识别受者组织抗原并产生应答，此为移植排斥反应。随着现代免疫生物学和免疫遗传学的发展，逐渐阐明丁移植排斥反应的免疫学本质及其遗传学基础，为临床开展人 ...

由病原体引起的流行病左右了人类历史上的几次重大变迁 公元前430年，斯巴达(Sparta)和伯罗奔尼撒(Peloponnesian)联盟向当时处于文化和权力之巅的雅典人开战。斯巴达人迫使无数村民进入雅典城墙内避难，城市拥挤不堪，瘟疫接踵而来，使大批雅典人死亡。瘟疫使雅典变得如此衰弱，以・致其虽拥有强大的海军队伍，但还是花费了30多年的时间才打败了斯巴达；同时，为之付出的代价是这一城市再也不 ...

基于细胞表面标记的免疫细胞分离方法1、补体细胞毒分离法 采用特异性抗细胞表面标记的抗体，结合具有该表面标记的细胞，在补体的作用下，使具有该表面标记的细胞发生溶解，将其从混合细胞群体中去除。2、免疫磁珠分离法磁性微珠是20世纪80年代初以高分子材料和金属离子（如Fe3O4）为原料聚合而成的一种以金属离子为核心、外层均匀地包裹高分子聚合体的固相微粒，即磁性微珠。在液相中，受外加磁场的吸引作用， ...

流式细胞仪术检测各类免疫细胞的数量 流式细胞术（FCM）是一种高速度、高灵敏度、高精度和高分辨率的自动分析细胞的高新技术。主要用于定量分析单细胞表面、细胞内抗原和对分子水平的核酸含量的测定。【试剂及材料】（1） FITC（或PE）标记的抗CD的mAb及正常小鼠IgG（2） 细胞洗液：含2%BSA、0.1%NaN3的PBS。（3） 固定液：2 ...

靶细胞诱导的CTL细胞颗粒酶胞泌作用【基本原理】 该法通过抗原（靶细胞）刺激CTL的TCR，从而活化CTL。其特点是，可定量测定CTL-靶细胞特异性的相互作用，这种靶细胞诱导的CTL细胞颗粒酶胞泌作用，也可通过测定效应细胞或靶细胞的表面分子作为辅助指标。【试剂及材料】（1） 特异性靶细胞，其表面携带CTL所识别的抗原；（2） 其余材料见方法1（抗TCR介导 ...

125I-UdR释放试验测定NK细胞活性【基本原理】 125I-UdR（125I-2′脱氧尿嘧啶核苷）是胸腺嘧啶核苷的类似物，作为DNA合成的前体物，能相当特异地取代胸腺嘧啶核苷掺入到细胞核DNA链上。因此，可用125I-UdR标记体外传代培养的肿瘤细胞作为靶细胞，以外周血分离的单个核细胞或小鼠脾细胞作为效应细胞，进行体外NK细胞活性检测。被效应细胞杀伤的�靶细胞溶解后可释放125I-Ud ...

中性粒细胞吞噬功能的测定中性粒细胞（polymorphonuclear leukocyte，PMN）的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等，是机体天然免疫力的重要组成部分。【试剂及材料】（1） 白色葡萄球菌（2） 肉汤培养基（3） 硷性美蓝液【操作方法】 （1） 菌液的制备 将白色葡萄球菌接种于中，放37℃温箱内培养12h左右；置 ...

中性粒细胞移动功能的测定―琼脂糖平板法【试剂及材料】（1） 琼脂糖和明胶（2） 趋化因子（制备见附注）（3） Giemsa染液（4） 显微测微器【操作方法】（1） 称0.25g琼脂糖，加12.5ml蒸馏水，沸水内加热溶化，冷至47℃；（2） 另取Hanks液2ml，10％明胶25ml和蒸馏水8ml，混匀后加7％的NaHCO32滴；（3） 将二者混匀倒板。在琼脂板 ...

中性粒细胞功能硝基蓝四氮唑（NBT）还原能力的测定【试剂及材料】(1) 0.1％明胶-Hanks液(2) 0.01mol/L KCN(3) 0.1％ NBT(4) 酵母多糖处理血清【操作方法】（1） 分离中性粒细胞，调整细胞浓度至107/ml；（2） 按下表依次加样：静止时NBT的还原能力激活时NBT的还原能力0.1％白明 ...

中性粒细胞杀菌功能的检测―全血化学发光测定法【基本原理】 过氧化物生成系统在杀菌过程中起重要作用。中性粒细胞被激活时，其NADPH氧化酶亦被活化，发生氧化还原反应，形成过氧化离子，随后通过超氧化物歧化酶（SOD）将其转变为H2O2，参入细胞内杀菌。H2O2在过氧化物酶作用下，形成次氯酸和卤化物是另一种杀菌机理。过氧化离子不稳定，在其分解过程中可激活鲁米诺（氨基苯二酰-肼）类物质，并使之发生荧 ...

MHC-I单体的生物素化分析【试剂及材料】（1）链霉亲和素 0.8mg/ml（2）双蒸水（3）聚丙酰胺凝胶电泳装置及试剂【操作步骤】（1）取2个EP管，分别标上“+”和“-” ，每管加2μg MHC-I单体。（2）用双蒸水将“-”管体积补至10μl（3）在“+”管中加5μl链霉亲和素，用双蒸水将体积补至10μl（4）置室温1小时。（5）每管加10μl 2 X 电泳上样缓冲液不要煮样品，不要加D ...

流式细胞术在组织化学与免疫组织化学中的应用 流式细胞术(flow cytometry，FCM)是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术。该技术是一项集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学、免疫荧光细胞化学技术及单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。概括地说，流式细胞技术是通过流式细胞仪(flowcytometer)对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数、快速 ...

流式细胞术数据处理与分析 数据的显示通常可分为一维单参数直方图(histogram plot)、二维点图(dot plot)、二维等高图(contour)和假三维图(pseudo 3D)等。下面简述最常用的单参数直方图和二维点图。 1．单参数直方图 单参数直方图是一维数据用得最多的图形，可用来进行定性分析和定量分析。横坐标表示荧光信号或散射光信号强度的相对值，其单位用“道数”(c ...

ELISPOT（Enzyme-Linked Immunosorbent SPOT 酶联免疫斑点法）：是一种体外检测特异性抗体分泌细胞和细胞因子分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术，是ELISA技术和细胞培养技术结合而发展的新型技术。使体外检测各种细胞产生细胞因子及细胞分泌抗体研究有了新的突破ELISPOT技术优点：1. 特异性和敏感性高：能从 20万-30万 细胞中检出 1个 分泌该蛋白的细胞 ...

ELISA实验质量控制问题说明

食物不耐受在皮试和免疫球蛋白E的检测中一般没有阳性结果，它是由于机体不能充分地消化食物大分子，并被吸收入体内引发免疫应答反应，产生特异性免疫球蛋白，由此导致人体一系列症状。

promega_CDI双方致力于将更多高预测性的毒性检测相关产品引入到药物发现过程中。药物研发科学家现在可以将生物检测与人类心肌细胞结合起来，从而更好地预测那些无意中产生的有害副作用。