抗体抗原实验

核酸疫苗载体及表达调控元件 基因免疫载体常用真核细胞表达质粒，如能在哺乳动物细胞中高效表达真核启动子的质粒，包括长末端重复序列(LTR)、猴空泡病毒(SV40)及巨细胞病毒(CMV)等启动子等。基因免疫载体由3个部分组成：①目的蛋白基因编码序列；②细菌质粒骨架元件，包括复制起点、多克隆位点和选择标记；③转录表达调控元件，包括真核启动子／增强子、转录终止／多聚腺苷酸化信号序列。表达抗原蛋白能 ...

多肽疫苗 多肽疫苗具有抗病毒、抗肿瘤、抗细菌、抗寄生虫感染功能。由于多肽疫苗价廉、安全、特异性强、容易保存和应用的优点，越来越受到重视。但也因其免疫原性差、功效低以及半衰期短等不足影响了免疫效果。可被CTL识别的肽表位对预防感染和慢性病的免疫治疗是一种非常有用的免疫原。在设计中应注意：①是否激发细胞毒性T细胞和辅助淋巴细胞。②选择性结合MHC―I／MHC―Ⅱ类分子，刺激辅助性T细胞的功 ...

多糖疫苗 细菌的细胞膜结构中存在着荚膜成分，其主要成分是多糖类物质，这类多糖常常在细菌侵袭机体的过程中表现出特定的抗原特性。另外，在某些细菌如革兰阴性菌的细胞壁外膜中，也含有脂多糖的成分，它由脂质和多糖组成，也与荚膜多糖成分相同，是细菌在侵袭机体过程中表现特定抗原特性的主要成分之一。这类脂多糖存在一定的毒性，对机体有较大影响。细菌外膜蛋白和多糖物质均存在强烈的免疫原性，例如流感杆菌菌苗的活 ...

蛋白质疫苗 对于机体免疫来说，蛋白质疫苗为较好的疫苗抗原，可被T细胞反应和B细胞反应同时识别。蛋白质疫苗抗原包括有天然蛋白质、经化学灭活的类毒素。采用定点突变方法灭活的毒素和重组技术克隆的蛋白质等。 在此类疫苗的设计中，其基本的技术要求如下： ①维持目的蛋白质的空间结构，尽量保持抗原位点的关联和可能的构象； ②具有能够诱导保护性免疫反应的抗原表位； ...

新型疫苗佐剂 佐剂是一种能够增强对疫苗组分抗原特异性免疫应答或改变免疫反应的物质。在疫苗制剂中，佐剂的功能主要包括：增强疫苗抗原的免疫原性；促进细胞免疫和体液免疫，优化免疫应答，促进免疫能力较弱人群中的免疫应答；增进抗原与黏膜之间的传递以及免疫接触；减少疫苗成分中抗原的需求量以及在实施过程中的免疫接种次数；优化抗原结构，维持抗原构象等。佐剂的种类丰富，根据其功能，可分为运载传递系统和免疫刺 ...

绿色疫苗 随着医学和高科技的发展，以植物为载体生产生物制品的“绿色疫苗”(plant―based vaccine)得以实现。从1990年首次报道植物表达链球菌表面蛋白A以来，利用植物表达系统生产疫苗蓬勃兴起。绿色疫苗主要是指在可以生食的转基因作物中表达目的疫苗抗原组分。植物表达系统主要有3个：一为稳定的整合表达系统，即以外源性基因连接于植物基因上，以表达外源性蛋白，如转基因烟草、西红柿、马 ...

树突状细胞疫苗 树突状细胞(DC)是最强的抗原呈递细胞，能有效地把抗原信息呈递给T细胞，诱导T细胞活化而导致一系列免疫应答。DC也可增强包括核酸疫苗在内的各种疫苗和疫苗佐剂(如CpG―ODN)的免疫反应，其本身也是一种天然的免疫佐剂。带有抗原信息的DC具有疫苗功能，故称树突状细胞疫苗。 目前研究较多的是以从病毒和肿瘤提取的抗原或特异性抗原基因刺激、诱导和转染DC，使其载有相应的抗原 ...

多糖和蛋白质的结合疫苗 由多糖抗原与蛋白质偶联而成。多糖对人体无毒性、容易产生、结构稳定，广泛存在这细菌表面抗原结构中。该种疫苗具有能诱导婴幼儿产生保护性免疫应答的优点。因此在设计上首先选择能够产生较好保护性免疫反应的多糖抗原，载体蛋白应安全、可靠，通过还原胺化、酰胺缩合、硫醚缩合等方法进行多糖和载体蛋白的偶联。 目前，在细菌性结合疫苗中所使用的载体蛋白有：白喉毒素、霍乱毒素、重组 ...

理想佐剂的设计及要求 对于新型佐剂的设计和开发必须建立对佐剂的作用机制、安全性、基本构成形式、投递途径等方面的深入研究。 (1)理想的新型免疫佐剂必须具备的特征：①在促进保护性免疫应答上与疫苗原有相加作用；②能有效地激发较强的细胞免疫应答、黏膜免疫等；③更为安全、可靠，毒副作用小；④佐剂的结构和成分以及生物学特性稳定，易于在体内降解和清除；⑤适应性广、易于存贮、价格低廉。 ...

疫苗的传递系统 疫苗成品中，除了应含有刺激免疫应答的特异性疫苗原外，还应包含有佐剂和适当的传递系统。传递系统是一种具有运送功能，能将疫苗原传输至相应的靶组织，呈递抗原信息给APC，并能长时间稳定抗原或缓释抗原使其发挥作用的物质。有些佐剂和传递系统在功能上可能存在一定程度的相似，两者之间难以界定。传递系统的优点主要体现在可以维持疫苗效果的长期性，减少免疫次数，还体现在缓释／控释给药、靶向给药 ...

免疫刺激序列基因佐剂 免疫刺激序列(ISS)为非甲基化的短核苷酸(胞嘧啶和鸟嘌呤，CpG)为基序的寡脱氧核苷酸(ODN)短序列，其序列中的5’-嘌呤-嘌呤-CpG-嘧啶-嘧啶-3’对人和动物有强烈的免疫刺激作用，可以诱导以Thl为主的免疫应答，诱导产生Thl类细胞因子如IL-1、IL-6、IL-12、IL-18、TNF等，增加免疫相关细胞MHC-Ⅱ类分子、CD40、B7-2、ICAM、CM ...

细胞因子及共刺激分子佐剂 1.细胞因子 细胞因子具有许多种的生物学功能，能够调节细胞间相互作用，是T细胞和B细胞重要的刺激分子，在免疫应答过程有非常重要的作用。作为佐剂的细胞因子主要调控Thl/Th2细胞免疫过程中的反应类型，同时影响各细胞间信号传导和刺激信号，以调控复杂的细胞因子网络间的相互作用和联系。细胞因子佐剂可作为疫苗的重要组成部分，如果把某些编码细胞因子的基因片段与特异性D ...

疫苗的效果分析 1．动物模型检测 动物模型不仅可以用于检测疫苗分子的病理学、遗传学、分子生物学作用机制，还可以检测其安全性、毒性作用以及作用的效果，如毒性试验、毒力试验、保护性免疫力的效率试验等。此外，还可应用转基因动物对疫苗原导致的病理性反应、佐剂效应机制进行鉴定。一旦经动物实验被确定安全有效后再进行以下检测。 2．少量人群免疫学效果及副作用判定 即临床试验(1～Ⅳ期 ...

目前已经开发的或正处于实验阶段的疫苗 (一)病毒类疫苗 1．减毒活疫苗 HIV减毒活疫苗、甲型肝炎疫苗、流感疫苗、牛痘疫苗、脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗、腺病毒疫苗、黄热病疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗、水痘疫苗、轮状病毒疫苗、乙型脑炎疫苗。 2．全病毒灭活疫苗流感疫苗、狂犬病疫苗、脊髓灰质炎疫苗、甲型肝炎疫苗、流行性出血热疫苗、斑疹伤寒疫苗。亚单位疫苗：乙型肝炎疫苗、流感嗜血杆菌 ...

疫苗的质量检测 疫苗的生产必须遵从药品产生质量管理规范，任何一种疫苗制剂都必须在规范的质量检测体系经过严格的检测才能确保疫苗安全和有效性，以最大效率地提高接种后的效应作用，最大限度地降低免疫接种后的不良反应。无论生产规模如何，都必须设有质量保证机构和质量鉴定机构。 1．理化性质的检测 根据不同的疫苗原可使用不同的检测手段，如蛋白质测定、核酸测定、多糖光谱测定等。各种凝胶电泳技术 ...

尘螨变应原及酶性变应原的类型及理化、免疫学特性 尘螨主要存在于人类居住的环境中。能引起人类过敏性疾病的主要螨种有4类：户尘螨(Dermatophagoides pterongssinus，Der p)、粉尘螨(Dermatophagoides farznae，Derf)、微角尘螨(Dermatophagoides mzcroceras，Der m)和埋内欧尘螨(Euroglyphus ma ...

尘螨变应原与变态反应 尘螨变应原与抗原呈递细胞(APC)的相互作用在变态反应发生过程中非常重要，特异性抗原决定簇经APC处理后，向T细胞传递信息引发特异性的免疫效应。尘螨变应原的呈递过程主要途径如下：①APC的突触伸出气管上皮细胞间，与抗原接触后，因上皮细胞的通透性增加，通过细胞转运作用，呈递抗原。但目前无直接令人信服的证据。②抗原呈递在支气管相关淋巴组织(BALT)中进行。气管BALT为 ...

尘螨酶性变应原的作用机制至少有4种尘螨酶活性变应原具备蛋白水解酶作用，此类酶可通过非细胞毒性作用造成上皮细胞间的关系破坏，使变应原轻易通过气道黏膜屏障。组织学显示，细胞之间侧面及基底侧面失去黏附，酶直接损伤细胞内的连接。尘螨酶性变应原的致敏途径有：①酶的直接作用，使气管黏膜通透性增加；②上皮细胞吞转作用(transcytosis)；③直接刺激支气管相关淋巴细胞；④蛋白酶性抗原的局部黏附，导致胞内 ...

尘螨酶性变应原的调控机制 调控机制的研究主要用于指导临床免疫治疗。特异性TCR与暴露在APC表面的、能与特异性抗原多肽片段结合的MHC―Ⅱ类分子密切相关，如果能调控它们之间的相互关系，就能改变效应过程。目前，用于干扰尘螨变应原诱导变态反应过程的手段有：以特异性抗原和诱导性多肽使其在呈递后造成刺激信号的缺失以及T细胞优势表位与MHC―Ⅱ类分子竞争性结合受阻而中止效应过程。 (1)特异 ...

尘螨性变应原抗原表位的研究T细胞表位 特异性T细胞在变态反应中起着十分重要的作用。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5和几-13，而很少量或不分泌IL-2及IFN-γ。Th2细胞产生的淋巴因子可诱导B细胞合成IgE，该细胞广泛存在与外周血、鼻腔黏膜、支气管肺泡液中，过敏患者其含量非常高。随着尘螨变应原cDNA文库、重要变应原编码基因库的建立，为表位的研究提供了广泛的基础。经核酸及氨基酸系列 ...