抗体抗原实验

1． 固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好，结构完整，但因偏酸，对抗原有一定损害，且组织收缩明显，不适于组织标本的长期保存。 PLP液：即 ...

ELISA protocol：1.取5－10ul BMMY表达上清用0.05M NaHCO3稀释到100ul铺ELISA板，37度或室温振荡大于1小时。注意一定要做一个GS115空菌株表达上清作为阴性对照，最好还找一个带有histag的蛋白作为阳性对照。2.TPBS洗板3次，方法：倒掉铺板液，倒置于毛巾上轻轻拍打几次，加TPBS至满，重复。3.加封闭液（TPBS加1％脱脂奶粉）350ml/孔，室温 ...

顶 楼 标题: 酶联免疫斑点(ELISPOT) FAQFAQ： 关于酶联免疫斑点(ELISPOT) --------------------------------------------------------------------------------Frequently Asked Question 酶联免疫斑点(ELISPOT) FAQ------------------------- ...

National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2003. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria thatgrow aerobically5th ed. Approved standard M7�A6. National Committee ...

一、材料和试剂1、玻片：须用免疫组化专用玻片，或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液，用PBS配。3、3%牛血清白蛋白（BSA），用PBS配。4、0.01MPH7.4PBS5、1% BSA-PBS（含0.05% Tween20）6、AEC底物（1）底物缓冲液（20X） PH 4.6醋酸（分子量60.6）30.6mlTriton -100醋酸钠 3H2O（分子量 ...

Protocol for Frozen section of GFP Bone:

Embedding Bones for Frozen Section:

Enzyme Immunostaining for BrdU: Wash frozen sections with PBS 2x. Put them in 0.1% Pepsin in 0.1N HCL (in PBS) at 37�C for 50min. Then in 0.3% hydrogen peroxide in PBS 30min. Then rinse with PBS 3x. T ...

ß-gal Staining:Reagents:0.1M Phosphate Buffer (pH 7.3):0.1M Sodium Phosphate monobasic115ml0.1M sodium phosphate dibasic385mlTotal Volume500 ml Fix solution:0.5% Gluteraldehyde:25% gl ...

Fluorescent Label in BoneSome fluorescent compounds which are fixed in newly formed calcified tissue are used to label bone deposition. Such labels help to determine the time sequence of bone growth. ...

Immunostaining for Factor VIII Related Antigen (endothelium): Deparaffinize and rehydrate tissue sections. Rinse 3 times with PBS. 0.1%Pepsin in 0.1N HCL in PBS incubated sections at 37°C for 40min. R ...

核酸杂交技术是根据两条互补的核苷酸单链可以杂交结合成双链的原理所建立，用一段已知序列的放射性或非放射性标记的核苷酸单链做探针，与待检标本中的DNA杂交来探查待检标本中有无与之相互补的核酸。该方法特异性高，但敏感性低于PCR方法。　　本实验学习用非放射性标记物-地高辛(DIG)标记DNA片段作探针，用斑点杂交法检测病原微生物DNA的方法。　　【原理】　　用地高辛（DIG）类固醇半抗原标记特异DNA片 ...

多聚酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)是一种模拟天然DNA复制过程，在体外扩增特异性DNA（或RNA）片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板，然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物，引物分别与待扩增DNA片段的两端互补，经55℃低温退火，引物与模板互补结合。在72℃条件下，结合于模板上的引物在DNA聚合酶的催化下，利用反应体系中的4种dN ...

ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 　　(一)　原理 　　ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、�9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验 ...

蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段，现介绍几种常用的浓缩技术。（一）透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（6 000－12 000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂配成30％－40％浓度的溶液，将装有蛋白液的透析袋放入即可。吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥 ...

一、材料和试剂1、0.01M PBS(pH7.4)： NaCl 8.0g； KCl 0.2g； Na2HPO4 1.44g； KH2PO40.24g； ddH2O至1000ml ； 高压灭菌分装。2、0.25%胰酶：称取EDTA 0.02g NaCl 0.8gKCl0.04g加三蒸水100ml溶解后加0.25g 胰酶轻轻搅动使胰酶溶解不要产生泡沫加酚红少许调PH值到8.2- ...

一些基本概念和基本知识：1 荧光免疫测定技术的概念：将试剂抗原或试剂抗体用荧光素进行标记，试剂与标本中相应的抗体或抗原反应后，测定复合物中的荧光素，这种免疫技术，称为免疫荧光素技术。2.技术分类：⑴荧光抗体技术(荧光显微镜技术) 抗原抗体反应后，利用荧光显微镜判 定结果的检测方法。⑵ 免疫荧光测定技术： 抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定 荧光强度而推算被 ...

1 荧光素与抗体结合（标记）2 荧光抗体的纯化3 荧光抗体的鉴定1.荧光素与抗体结合方法： ⑴ 透析法：①适用于蛋白质含量低、样品体 积小的抗体溶液的标记 ②标记较均匀，非特异荧光较低 ⑵ 搅拌法：①适用于蛋白质含量较高、样品 体积较大的抗体溶液的标记 ...

Hoechst 33258染色固定液 50 ml Hoechst 33258染色液 50 ml 抗荧光淬灭封片液 5 ml 说明书 1 份 保存条件： 4℃保存，Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本试剂盒自订购之日起六个月内有效。 注意事项： Ø 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。 Ø 需PBS或0.9%NaCl溶液。 Ø 需盖玻片与载玻片。 ...

菌种保存和微生物常识1、常用培养基的制备、灭菌与消毒 营养：从外部环境摄取其生命活动所必需的能量和物质，满足生长和繁殖需要的一种生理过程。是生命活动的物质基础，是生命活动的起点。 营养物：具有营养功能的物质。也包括光能。提供生物的结构物质、能量、代谢调节物质和良好的生理环境。 营养要素：碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水 培养基：人工配制、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的混合养料。要求：应具 ...