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高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中6种玉米赤霉醇类药物残留

玉米赤霉醇(zeranol,ZER),属于雷索酸内酯类非甾体同化激素。ZER作为牛羊促生长剂,以耳根埋植的形式应用,促进蛋白质的合成,能提高胴体瘦肉率及饲料转化率。但是,玉米赤霉醇具有弱雌激素作用,在动物尿液中的残留会引起人体性机能紊乱及影响第二性征的正常发育,在外部条件诱导下,还可能致癌。ZER排出动物体外后,还可经饮水和食物造成二次污染及环境污染。1998年欧盟禁止将玉米赤霉醇等 ...

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高效液相色谱-串联质谱法检测动物源性食品中11种合成类固醇类激素多残留

合成类固醇类激素具有促进蛋白质合成的作用,雄性化作用是其主要特点。雄激素(俗称“合成类固醇”)及其相关物质是历史最悠久、最重要的违禁药品之一,在畜牧业、体育运动和保安业中一直被广泛的非法使用。早在二战时期即在德军中使用以提高战斗力。一些统计资料显示,在食品甾体类同化激素(anabolic steroids ASs)残留和体育运动兴奋剂监测中,雄性激素占阳性样品 ...

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液相色谱-串联质谱法测定尿液中的内源性类固醇激素

摘要:建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定尿液中的内源性类固醇激素的方法。尿样经葡萄糖醛酸甙酶酶解后进行液-液提取,以甲醇-0.1%甲酸缓冲液(含0.02mol/L乙酸铵)(体积比为68∶32)为流动相,采用Cosmosil C18色谱柱分离并以三重四极杆串联质谱多反应监测扫描方式对尿样中的脱氢表雄酮(DHEA)、睾酮、表睾酮、雄酮和苯胆烷醇酮等5种激素进行检测。方法的最低检出限为0 ...

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液相色谱—电喷雾串联质谱法及三级质谱法快速定性监测和定量分析赛马尿样中药物

在赛马业中滥用的药物包含种类繁多的化学药物,主要通过取复杂尿样进行分析,使得低浓度下快速、有效、诊断性检测这些药物比较困难。通常,定量分析工作是在三重四极杆质谱上用选择离子反应检测模式进行,但是这种检测方法不能监测到诊断性碎片结构确认方面的信息,需要对其进行衍生化和气相色谱-质谱联用进一步确认。 目 的: 为了建立一种简单、快速、实用性强、能够同时进行定性监测、定量分析的液相色谱- ...

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LC-MS进行尿液中完全未知药物和有毒化合物的筛选流程

摘要:临床研究实验室和法医实验室通常使用自动化免疫测定, LC-MS,HPLC-DAD技术来完成常规未知物筛选分析,即GUS分析。但其中没有任何一种方法可以完全鉴定一份样品中潜在的所有未知药物和有毒化合物。LC-MS附带的操作说明书为GUS中药物和有毒物质提供了精确、灵敏的分析方法。LC-MS GUS分析方法的优点:包含了样品的制备过程,可以在筛选方法中轻松增加新的被分析物,而且对该物质的挥发性 ...

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化学电离(CI)在β-阻断剂确证中的应用研究

摘要:在常规检测中,一些B2阻断剂(或其代谢物)的EI质谱图极其相似,给确证工作带来麻烦。本文采用GC/MS的化学电离功能得到了特征性很强的质谱图,使确证工作简单易行,并满意地应用于实际尿样分析。 1.取5 ml尿样于10 ml玻璃试管中,加入0.5ml浓盐酸和100 mg L-半胱氨酸,混匀,试管口盖上玻璃小球, 在100℃烘箱内水解30 min,冷却后加入3 ml乙醚, 在振荡 ...

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用GC、GC/MS方法检测人尿中Selegiline及其代谢物

摘要:本文采用GC、GC/MS技术对口服Selegiline Hydrochloride,一种单胺氧化酶抑制剂的尿中代谢物进行分析测定,确认检出10种代谢产物,其中三种为新检测到的羟基化代谢物。 1.尿样收集 健康男性(体重65 Kg)口服单次剂量10mg Selegiline 5片剂。分别收集所排各次尿液的全部及服药前的空白尿,于-20℃。 2.样品制备 取尿样5 ...

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芯片毛细管电泳激光诱导荧光快速分离检测麻黄碱类兴奋剂

摘要:研究用芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测系统分离测定经7-chloro-4-nitrobenzo-2-oax-13-diazole(NBD-Cl)衍生的麻黄碱和伪麻黄碱的实验条件。采用胶束毛细管电动色谱分离体系(12 mmol/L SDS+10 mmol/L硼砂缓冲液pH9.0)在45 mm长的通道上实现了麻黄碱和伪麻黄碱的快速分离,一次分离小于1.5min。10~100 mg/L范围内峰高与 ...

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兴奋剂促红细胞生成素免疫检测方法的研究

1.抗人促红细胞生成素单克隆抗体的制备复苏抗rHuFPO杂交瘤细胞,采用动物体内诱生单克隆抗体的方法,大量制备腹水。用快速蛋白液相分析仪(FPLC),联合使用疏水柱(Phenyl-SepharoseCL-4B)和ProteinASuperoseFastFlow柱纯化单克隆抗体。 2.单克隆抗体理化性质及亲和力的鉴定采用双向免疫扩散法、紫外分光光度计法和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分 ...

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气相色谱-质谱法测定动物组织中的β2-兴奋剂含量

摘要:应用气相色谱-质谱(GC-MS) 联用技术建立动物组织中β2-兴奋剂的测定方法。动物组织加1%的高氯酸溶液匀浆用乙酸乙酯:异丙醇(6∶4)萃取经固相萃取柱净化 BSTFA+1% TMCS衍生后进行GC-MS 测定。样品中最低检出浓度分别为特布他林015μg/kg、克伦特罗110μg/kg、沙丁胺醇012μg/kg。 1.色谱条件  色谱柱:HP 2 ...

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利用ImageXpress Micro进行长时间活细胞成像和心肌细胞功能评价

活细胞成像技术是最近几年兴起的一项技术,能够在细胞接近生理的状态下观察细胞形态改变和蛋白的表达,该技术能够避免传统采用固定细胞或组织的研究方法中,固定细胞过程中造成的细胞形态的改变和结构改变,能够更加真实的反映出细胞的特性,因而广受推崇。MD ImageXpress Micro高内涵系统具有多种特性能够进行长达数天的活细胞的观察,同时,由于采用著名的MD软件产品MetaMorph为基础的Meta ...

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恩诺沙星和环丙沙星残留检验的高效液相色谱法

(1)试剂和材料 以下所用的试剂,除特别注明外均为分析纯试剂,水为符合GB/T6682规定的二级水。 ①环丙沙星 含环丙沙星不得少于99.0% ②恩诺沙星 含环丙沙星不得少于99.0% ③乙腈:色谱纯 ④三乙胺 ...

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为观察深层标本度身定制---多光子成像物镜

随着显微技术的不断发展,用户对于成像质量和细节要求越来越高,物镜作为显微光学系统中核心的核心,其重要性毋庸置疑。奥林巴斯公司近几年针对用户不同应用的特殊需求,开发研制出了几款特殊物镜,以满足科研人员的实验要求。 奥林巴斯XLPlan N25x,数值孔径(NA)1.05,水浸物镜特别为多光子成像而设计。它使科研人员可以得到更深更 ...

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生物显微镜常见故障的修理

验教学中最常用的仪器,频繁使用之后会出现一些故障,使显微镜无法正常使用。由于显微镜是一种精密贵重仪器,不可能随时添置和更新。因此,及时排除故障,使它经常处于完好的工作状态就显得十分重要了。笔者在几年的生物实验教学中,总结了显微镜一些常见故障的修理办法,供大家参考。 一、粗调失灵 故障现象是当转动粗准焦螺旋时,镜筒不能随之升降。显微镜镜简的升降是靠齿轮带动因条来实现的,而齿轮固定在粗调旋钮的转轴上 ...

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显微镜镜台测微尺使用

测微尺的使用: 测微尺分目镜测微尺和镜台测微尺,两尺配合使用。目镜测微尺是一块圆形玻璃,中心刻有一尺,长5~10mm,分成50~100格。每个所代表的实际长度因不同物镜的放大率和不同镜筒长度而异。镜台测微尺是在一块载玻片的中央,用树胶封固一圆形的侧微尺,长1~2mm,分成100或200格。每格实际长度为0.01mm(10μm)。当用目镜测微尺来测量细胞的大小时,必须先用镜台 ...

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便携式拉曼光谱仪实时监控细胞培养液物质浓度

1.引言 细胞培养液提供了细胞或细菌生长和繁殖所需的各种营养物质,包括葡萄糖、乳糖、氨基酸、蛋白质等,指示着细胞或细菌实时的生长状况。为了保持细胞或细菌的正常生长,对体系内的营养物质含量进行实时、快速地在线监测就显得至关重要。 传统的检测手段通过取样,采用生化分析仪等方法得到各营养物质的含量,分析一个样品大概需要20~30分钟,显然无法满足实时监控的要求。拉曼光谱法分析的是分子的非弹性散射光,可 ...

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分析天平的使用方法和注意事项

1. 称量前应检查天平是否正常,是否处于水平位置,吊耳、圈码是否脱落,玻璃框内外是否清洁。 2. 应从左右两门取放称量物和砝码。 称量物不能超过天平负载(200克),不能称量热的物体. 有腐蚀性或吸湿性物体必须放在密闭容器中称量。 3. 开启升降旋钮(开关旋钮)时,一定要轻放,以免损伤玛瑙刀口; 每次加减砝码、圈码或取放称量物时,一定要先关升降旋钮(关闭天平),加完后,再开启旋钮(开启天平)。 ...

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质谱样本制备技术资料

试剂耗材: Milli-Q water、Non-powder gloves、Face mask、Hat、10μl and 200μl tips(eppendorf)、Menthol(Fisher M/4056/17)、Acetonitrile(Fisher A/0626/17)、Trypsin (Promega V528)、Trypsin resolve solution(Prome ...

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琼脂糖凝胶的制备

一、琼脂糖凝胶的特点 天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果。因此,目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳,其优点如下 ...

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SDS-PAGE胶制备

一. 实验原理: SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。 SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后,电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。 二. 试 ...

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