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果蝇的伴性遗传

一、目的通过实验:了解伴性遗传和常染色体遗传的区别。二、实验材料红眼果蝇,白眼果蝇三、实验原理性染色体上的基因控制的性状在遗传方式上与常染色体上基因不同。性染色体上基因随性染色体而传递,所以它们决定的性状与性别相联系。红眼与白眼是一对相对性状,分别由X染色体上的基因+与W决定,+对W是显性,因为雌果蝇的性染色体组成为XX,雄果蝇的性染色体组成是XY,而Y染色体上没有与X染色体上相对应的基因,所以红 ...

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果蝇的唾腺染色体的制片与观察

一、目的通过对果蝇唾腺染色体的观察,了解巨染色体的特征,练习果蝇幼虫解剖技术及唾腺染色体制片方法。二、材料果蝇三日龄幼虫三、原理果蝇幼虫期的唾腺细胞核非常大,唾腺染色体比其它细胞的染色体大200多倍。且总是处于前期状态,两条同源染色体间有差别时,很容易看出来。例如,当一条染色体缺失一个片段时,它的同源染色体在这一段不能配对,就会拱起来,形成一个弧状结构。此外,重复、倒位、易位等染色体畸变也可看到, ...

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巴氏(Barr)小体检查

一、目的观察性染色体的特殊存在形式,学习X染色质的检查方法。二、原理巴代小体,亦称X染色质,目前认为在哺乳类动物中,正常雌性个体两条X染色体。在不分裂的细胞中,只有一条X染色体活化,另一条固缩,固缩状态的X染色质能被碱性染料所深染。在雄性个体中,性染色体为XY型,一般无固缩状态的X染色质,故检查不出,有人实验统计得出,在雌性动物中,X染色质检出率为56-87%,雄性动物中为2-6%。性染色质的位置 ...

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染色体G显带技术

一、原理 G显带机制有许多学说,但尚无定论。目前比较倾向于多因素决定论,即带型的形成主要取决于DNA、核酸结合蛋白及染料三者的相互作用,主要是指DNA的碱基组成以其与结合蛋白形成的特定结构对染料分子的作用。Summer(1974)的实验表明,DNA分子的螺旋及折叠非组蛋白蛋白质的分布在染色体上呈区域性差异,这些差异导致二硫键与硫氢键分布不同,深染区由许多二硫键交联,因为它易与染料结合;而浅染区则 ...

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染色体C显带技术

一、原理 染色体标本经强碱(NaOH或Ba(OH)2)热处理后,在着丝粒周围区域和异染色质区经Giemsa染成深色,而染色体两臂的常染色质部分仅有浅淡轮廓。这是一种染色体上不显示带纹的特殊显带法,主要显示着丝粒区和异染色质区的变化。 这种技术称为着丝粒区异染色质法,故简称C带。常用的为CBG法(C-band by Barium hydroxide using Giemsa),即用Ba(OH)2 ...

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染色体R显带技术

一、原理 R显带的机理目前并不完全了解,在高温(80~90℃)的处理下诱发了染色体蛋白质的变化。Comings(1978)认为在高温下G带的中AT丰富区变性而显出特别亲染,但在R带中正恰相反,AT丰富区却并不显出亲染作用,故而显出浅染带区,电镜的观察进一步表明了这些带和间带区域的差异主要在于电子密度的不同,R带所显示之深浅带纹区域正同G带之带纹区域相反,即G带深染区R带为浅染区,反之亦然。 由 ...

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染色体Q显带技术

一、原理 Q显带技术早在1970年为Caspersson及其同事们首先用荧光染料染制染色体标本,在荧光显微镜下这些染色体呈现暗亮不同的条纹,为此有些学者(Coming等,1975,1978;Miller等,1973)认为主要是由于染色体中DNA内的AT丰富区对喹吖因荧光有增强作用,故显出亮带;反之,其DNA内CG丰富区对喹吖因荧光有减弱作用,故而出现暗带。 此外亦有一些学者(Pachman和R ...

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高分辨G带技术

一、原理 一般常作的G带技术在人类染色体的单倍体中仅能观察到320条带纹,这对于一些染色体细微结构异常的识别是不够的。近年来,用氨甲蝶呤等药物使细胞同步化,另加某些药物如胸腺嘧啶核苷、BrdU等阻止染色体收缩,并用有丝分裂抑制剂秋水仙素或秋水酰胺低浓度短时间处理,结果就能得大量晚前期、前中期和早中期的有丝分裂图象。这样在人类染色体的单倍体带纹数可增加到400条、550条和850条,甚至可达120 ...

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粗糙链孢霉的分离和交换

【实验目的】 1.用粗糙链孢霉的赖氨酸缺陷型和野生型进行杂交,并观察杂交所得后代的子囊孢子的分离和交换现象。 2.掌握顺序排列四分体的遗传学分析方法,进行有关基因与着丝粒距离的计算和作图,加深理解基因分离和连锁交换规律。 【实验原理】 粗糙链孢霉(Neurospora crassa,2n=14),又称红色面包霉,在分类学上属于真菌中的子囊菌纲、球壳目、脉孢菌属,目前已知有4~5种。利用粗 ...

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果蝇数量性状实验

【实验目的】1、以果蝇(Drosophila melanogaster)腹片着生的小刚毛为对象,研究数量性状遗传的特点。2、学习估算遗传(heritability)【实验原理】在生物中凡是可数、可度、可衡等并可用数字形式描述的性状,称数量性状(quantitative character)。数量性状大都由多基因控制。一般,控制同一性状的基因数目很多,而每个基因的作用很小,并且很容易受环境影响。群体 ...

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大肠杆菌杂交及基因定位实验

一、原理 大肠杆菌染色体呈环状。高频重组菌株(Hfr)的染色体上整合有F因子,当Hfr细菌与F-细菌细胞发生接合(即杂交)时Hfr细胞(供体菌)的染色体从Hfr细胞向F-细胞内转移。由于染色体的转移具有一定的方向性,并且可以随时中断,因此根据结合后F-细菌(以重组子形式选出)中Hfr细菌染色体基因出现次数的多少,即可得知基因转移的先后顺序,也就是说基因在染色体上排列的顺序。转移时,靠近转移起始点 ...

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染色质免疫共沉淀技术(ChIP)

真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。因此,研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay CHIP)是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉 ...

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转基因小鼠制备实验

1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。 2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。 3、第二天上午9:00前观察供体、受体,有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。 4、10:30左右,断颈处死供体,手术取出整个输卵 ...

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生物杂交技术(果蝇的杂交)实验操作规程

实验之前应熟悉果蝇的生活史,雌雄的鉴别和果蝇的一些突变性状辨别。果蝇生长的最适温度 20℃,30℃以上高温对果蝇致死,10~20℃生活期延长。实验过程中要随时记录观察结果,便于实验结果的深入分析。 第一周 1. 确定实验方案拟定杂交组合,明确预期目标,选取合适的亲本。 2. 收集所需的处女蝇。 3. 将所需亲本麻醉后挑选 5~10 对放入培养瓶中,25℃培养,(正反交都做)贴好标签,注明杂交组合 ...

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染色体组型分析实验操作规程

染色体组型分析是对染色体组中处于有丝分裂中期时染色体的数目、大小、形态、着丝点的位置以及次缢痕、随体的有无等形态特征作一描述.将一个细胞内的染色体按照一定的顺序排列起来所构成的图像就称为该细胞的组型。 1. 染色体制片》显微照相》放大。 2. 测量 测量染色体的长短臂长度,并记录。 3. 计算 臂比值、相对长度,根据臂比值确定染色体类型。 4. 配对 根据测量和计算数据,以及染色体的形态特征对同 ...

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测定遗传变异在多发性硬化症中所发挥作用的程度

研究人员发明一种新方法,有助于确定变异在多发性硬化症中所发挥作用的程度,新成果发明在5月在线出版的《自然―结构和分子生物学》期刊上。 通过人类基因组的研究,科学家们能够确定变异与特定疾病的关系,但他们至今仍难以将许多变异与某个特定的基因联系起来,从而导致了遗传学研究与疾病治疗的分离,但是,如果不能确定靶向基因,遗传性疾病是难以治疗的。 Fernando Casares J ...

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将mRNA和吗啉代反义寡核苷酸显微注射入斑马鱼胚胎

基因敲除,过表达和异常表达可被用来研究在发育过程中某个基因发挥的作用。在此我们介绍一种通过显微注射mRNA和吗啉代反义寡核苷酸实现过表达EGFP并敲除pkd2的方法。

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利用早期压力获得斑马鱼雌核发育二倍体

Streisinger等提出了获得斑马鱼雌核发育二倍体的早期压力法,即将斑马鱼卵细胞与紫外线轻度灭活的精子进行体外受精作用。

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衣藻遗传学研究—杂交和四分染色体分离

单细胞绿色植物衣藻由于其生命周期简单,易于生长和操作等优点,而成为细胞生物学和遗传学研究时常用的生物模型。衣藻杂交可产生植物二倍染色体,然后可分离出四分染色体,以研究细胞核和细胞器的遗传物质等。

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斑马鱼胚胎显微注射法分析基因功能

借助显微注射技术可导入mRNA或吗啉代至斑马鱼胚胎。显微注射法效率高,速度快,而且每小时可注射数百的胚胎。本视频对显微注射涉及到的所有步骤作了详细说明。

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