实验步骤 1. Follow the standard protocol until the samples completely pass through the HiBind® RNA Minicolumn (Steps 1-4). Prepare the following: 1) Add 300ul of RNA wash Buffer I to the column and ce ...
实验试剂 Materials to Be Provided by User1. Nuclease Free 1.5 and 2.0 mL Centrifuge Tubes2. Ice 3. Isopropanol (100%) 实验设备 Materials to Be Provided by User1. Tabletop with swinging-bucket rotor capa ...
实验原理 转化是将外源DNA分子导入到受体细胞,使之获得新的遗传特性的一种方法。转化所用的受体细胞一般是限制-修饰系统缺陷变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶(R-,M-)。将对数生长期的细菌(受体细胞)经理化方法处理后,细胞膜、的通透性发生暂时性改变,成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。进入受体细胞的DNA分子通过复制和表达实现信息的转移,使受体细胞具有了新的遗传性状。将经过转化的细胞在 ...
实验原理 If using the SQ DNA/RNA/Protein for the first time please read this booklet to become familiar with the procedure and its various modifications. Samples are first lysed in a specially formulated ...
实验试剂 1. 免疫吸附剂系结合有IgG的纤维素。取纤维素(5%,pH值10.5)与溴化氰一起室温反应10min,用0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液(pH值8.0)充分洗涤。再与IgG一起于4℃下作用18h(20ml缓冲液中含3g纤维素和100mg IgG)。制备物用27mol/L甘氨酸缓冲液(pH值8.0)配成20%(W/V)悬液,贮于4℃。2. 酶联C1q用戊二醛法将辣根过氧化物酶标记C1q, ...
实验步骤 1. PCR Precautions1) Add the following components to a sterile thin walled 0.25-ml or 0.5-ml PCR tube either at room temperature or on ice: For Small Genomic DNA ( Plasmids or cDN ...
实验步骤 1. 小鼠心脏组织总RNA的提取将冷冻保存的小鼠心脏组织在液氮条件下研磨成粉末,利用Trizol试剂采用一步法提取组织中总RNA。来自同一组别不同动物的总RNA混合提取。 1) 每100 mg研碎的组织加1 ml TRIzol,玻璃匀浆器匀浆至肉眼看不到组织样本颗粒为止。然后移入1.5 ml离心管中,室温放置15 min。 2) 按0.2 ml氯仿/1 ml Trizo ...
实验步骤 1.Prepare the DNA for sequencing as per the protocols "Purification and Concentration of Aqueous DNA Solutions" and "Alkali Denaturation of Supercoiled Plasmid DNA".2.Warm a heating block up t ...
实验原理 免疫电泳又称为γ球蛋白电泳或免疫球蛋白电泳技术,这是一种能够判断血液中三种免疫球蛋白IgM,IgG,IgA含量水平的实验方法。在这项实验技术中,首先利用蛋白质的分子量和所带电荷的比值运用水平琼脂糖凝胶电泳技术将蛋白质进行分离,然后将特异性的抗体引入到与电泳方向平行的凹槽中,在抗原和抗体的扩散过程中,抗原和抗体适当比例的结合会导致沉淀的产生。0.85%盐不仅可以终止扩散过程也 ...
实验步骤 1.肝癌 1) 二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌取体重250g左右的封闭群大白鼠,雌雄不拘。按性别分笼饲养。除给普通食物外,饲以致癌物,即用0.25%DEN水溶液灌胃,剂量为10mg/kg,每周一次,其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中,任其自由饮用。共约4个月可诱发成肝癌。或单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。 2) 4-2甲基氨基氮苯(DBA)诱 ...
实验原理 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。通常第一维电泳是等电聚焦,在细管中(φ1~3 mm)中加入含有两性电解质、8M的脲以及非离子型去污剂的聚丙烯酰胺凝胶进行等电聚焦,变性的蛋白质根据其等电点的不同进行分离。而后将凝 ...
实验原理 普通光学显微镜包括机械部分和光学部分两部分。机械部分包括镜座、镜臂、镜筒、载物台、物镜转换器、粗调节螺旋、细调节螺旋、标本夹等。光学部分包括接目镜、接物镜、反光镜、光圈(虹采)、聚光镜(集光器)等(图1-1)。浸系是在油浸镜与标本之间加1滴香柏油,调整光源检查细菌标本的方法。油浸镜是一种高倍放大的物镜,一般都刻有放大倍数,如95x、100x等。其镜头标记国产镜多用“油”字表示,国外产 ...
实验原理 常用的化学消毒剂主要有重金属及其盐类,酚、醇、醛等有机化合物以及碘、表面活性剂等。它们的杀菌或抑菌作用主要是使菌体蛋白质变性,或者与酶的—SH基结合而使酶失去活性所致。 本实验是观察某些常用的化学药品在一定浓度下对微生物的致死或抑菌作用,从而了解它们的杀菌或抑菌性能。 为了比较各种化学消毒剂的杀菌能力,常以石炭酸为标准,即将某一消毒剂作不同稀释后,在一定条件下,一定时间内致死全部供 ...
实验试剂 96–100% ethanol2–mercaptoethanol70% ethanol (in RNase-Free Water)PBS (for samples with 107 cells) 实验设备 1.5 mL RNase-free microcentrifuge tubesRNase-free pipet tipsHomogenizer RNase-free sy ...
实验试剂 Choose one of the following forms of DAPI:DAPI dihydrochloride (MW = 350.3)DAPI dihydrochloride FluoroPure™ grade (=98% pure)DAPI dilactate (MW = 457.5)For fluorescence microscopy:Phosphate-buf ...
实验试剂 Sterile PBSCell culture mediumSterile plastic petridishesRBC Lysis Buffer cat.#420301Anti-mouse CD3ε clone145-2C11 cat.#100314Anti-mouse CD28 clone37.51 cat.#102112Anti-mouse IL-4 cat# ...
实验原理 亚适剂量抗IgM抗体对B淋巴细胞的刺激较弱,当加人IL-4时,B淋巴细胞对亚适剂量抗IgM抗体刺激表现出明显的DNA合成增加,3H-TdR掺人量与IL-4含量相关。 实验步骤 1. 小鼠脾脏B细胞悬液的制备 1) 取BALB/c或C57BL/6小鼠,常规方法分离脾脏淋巴细胞。用Hanks液洗2次;再用10%NBS-IMDM培养液调整细胞浓度为1X107~2X ...
实验试剂 1. PNS营养液:每升含2.5m1 1M磷酸缓冲液(pH5.5)5ml 1M KN03,2m1 1M MgSO4.7H20,2m1 1M Ca(N03)a.4H20,2.5m1 20mM Fe.EDTA,1 ml MS微量兀素。2. 人工土: 3份蛭石,1份珍珠岩和1份黑土混合。 实验步骤 1. 将拟南芥种子种于浇过饱和PNS营养液的人工土中,当年收获的种子种植后 ...
实验步骤 1. Vigorously mix the bottle of the HTR reagent for 30 seconds to ensure the particles are throughly resuspended. Add 100ìl of HRT reagent to 200 μl of sample and mix thoroughly by vortexing ...
实验原理 Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 (CBG) 可与蛋白质结合而变色的特性来定量 (Bradford 1976);若试样中的蛋白质量较多,则结合到蛋白质而变色的CBG 也多,因而呈色较深。下例是以一组标准蛋白质为对象,制作一条蛋白质量与吸光度的标准校正线。 实验试剂 1. Buffer ...