免疫学技术

一 、标准管 待测管01020408016012 试管号1，23，45，67，89，1011，1213，1415，16 标准品（不同浓度）100100100100100100 待测血清100100 抗血清（二抗）100100100100100100100100 分析试剂100100100100100100100100 混匀，37℃温育2h 125I－胰岛素100100100100100100100 ...

一、放射免疫标记技术 放射免疫标记技术是将同位素分析的高灵敏度与抗原抗体反应的特异性相结合，以放射性同位素作为示踪物的标记免疫测定方法，由于此项技术具有灵敏度高 (可检测出毫微克(ng)至微微克(pg)，甚至毫微微克(fg)的超微量物质，特异性强(可分辨结构类似的抗原)、重复性强、样品及试剂用量少、测定方法易规范化和自动化等多个优点。因此、在医学及其他生物学科的研究领域和临床实验诊断中广泛应用于各 ...

造成误差的可能来源有以下几个方面： 一、各种仪器：设备的准确性、稳定性、效率以及被污染等情况带来的误差。 如：①由于放射性测量仪器的稳定性、效率、样品试管的材料和均匀性及被测物的放射性强度等原因。②由于样品的自吸收，本底校正，测定时间，可能的污染等原因。③在试验室中所有的移液管、微量取样器以及天平的刻度、校准和使用方法等原因。④由于反应试管、移液管以及测定用试管等表面清洁度和所引起的不同吸附等原因 ...

放射免疫分析（radioimmunoassay，RIA）是以放射性核素为标记物的标记免疫分析法。于1960年由美国学者Yalow和Berson创立，并首先用于糖尿病患者血浆胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破，开辟了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法测定的极微量而又具有重要生物学意义的物质得以精确定量，从而为进一步揭开生命奥秘打开了一条新的道路，使人们有可能 ...

一、基本原理 所谓平衡饱和，是指抗原和抗体反应达到再不结合，也不解离的平衡状态，称为饱和状态，即平衡饱和。所以，有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。 二、加样程序 一般先加标准物或被测样品，再加抗血清，最后加标记物。这样的顺序是让标准物或被测物与抗体有短暂的结合，提高抗原的竞争抑制能力。 在小分子半抗原的放射免疫分析中，标记抗原和未标记抗原与抗体结合的亲合力常 ...

1 、基本原理先将标准物或血样品与抗血清混匀，免疫反应6～24h，使抗原与抗体充分结合，甚至达到平衡，然后再加入标记抗原，与抗体反应12～24h，最后分离B与F，这称为顺序饱和分析法。 应用顺序饱和加样，可以提高测定方法的灵敏度。Utiger在做人促甲状腺激素（TSH）放射免疫分析时，将标记物延至第2天加入，发现其灵敏度增加两倍。如果缩短最后的温育时间，仍可取得满意的结果。所以一般认为，在顺序饱和 ...

内容提要 用免疫印迹法检测134例SLE患者多肽抗体谱，阳性率71.7%，其中Sm抗体37.3%，RNP抗体21.6%，SS-A抗体24.6%，SS-B抗体20.1%，核糖体20.1%。本法对SLE诊断、分型有一定临床价值。 系统性红斑狼疮（SLE）的血清学特征是出现多种自身抗体，尤其是识别细胞核内各种可抽提核抗原（ENA）是近年来抗核抗体（ANA）研究的一项重大进展。我们应用免疫印迹技术（IBT ...

摘　要: 目的　探讨ENA 多肽抗体谱与L E 细胞(L EC) 检查在SL E、ITP 及肾炎之间检测结果的关系。方法　对同一病人应用免疫印迹法检测ENA 多肽抗体谱以及用改良血块法检查L E 细胞共136 例(SL E 78 例、ITP 22 例、肾炎36 例)。结果 在52 例L EC 阴性SL E 患者中 ENA 多肽抗体谱总阳性率为80.0% (42/52) ; 在26 例L ...

提　要　应用免疫印迹技术( IBT ) 对临床63例常见免疫性疾病进行了检查。其中 疾病组48例 主要为SL E 等自身免疫性疾病 对照组15例。同时观察了荧光ANA、dsDNA、LBT 的结果。疾病组抗ENA 抗体阳性率为58. 3% 同一患者可有2～ 3种抗体。FANA 阳性率为54. 2% dsDNA 阳性率为18. 8% LBT 阳性率为50% 对照组1例阳性(6. 7%)。SL ...

【摘要】　目的　探讨免疫印迹法检测自身免疫性疾病ENA 多肽抗体谱的临床应用价值。方法应用免疫印迹法对系统性红斑狼疮(SL E) 、混合性结缔组织病(MCTD) 、干燥综合征(SS) 、弥漫性硬皮病( PSS) 、多发性肌炎/ 皮肌炎( PM/ DM) 、类风湿关节炎(RA) 等140 例自身免疫病患者进行可提取性核抗原( ENA) 多肽抗体谱检测。一次性同时检测抗Sm、抗U1 RNP、抗SSA、 ...

摘要:为探讨抗ENA 多肽抗体谱检测在诊断系统性红斑狼疮(SLE) 病人中的应用采用间接免疫荧光法测定ANA、抗ds- DNA、免疫印迹法( IBT) 测定ENA 多肽抗体结果抗ENA 多肽抗体谱阳性率为7119 % ANA 阳性率为8618 % 抗ds -DNA 阳性率为6711 %。抗ENA 多肽抗体谱检测灵敏度高特异性强方法简便并与ANA 检测互补提高诊断阳性率对SLE 的诊断有一定的临床价 ...

A.Sensitize a 96-well microtiter plate with purified antigen. Prepare a solution of the purified antigen of interest in phosphate buffer (see recipe below) such that a concentrati ...

A. Formalin Fixed Cell Plates 1. Trypsinize confluent flasks 2. Pool and count cells 3. Centrifuge at 1500 rpm for 10 minutes 4. ...

Materials: 1)TSBuffer:10mMTrispH8.0150mMNaCl 2)TSTBuffer:TSBufferwith0.05%Tween-20 3)Alkalin ...

一、实验目的 1、深入了解ELISA法测定抗体效价的原理。 2、掌握ELISA法测定单克隆抗体效价的方法。 二、实验原理 ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。免疫酶技术是将酶标记在抗体/抗原分子上，形成酶标抗体/酶标抗原，称为酶结合物。该酶结合物的酶在免疫反应后，作用于底物使之呈色 ...

一、材料与试剂 1、副结核分枝杆菌亲和层析抗原 2、草分枝杆菌吸收抗原 3、兔抗牛IgG酶标抗体 4、牛副结核病参考阳性血清 5、牛副结核病参考阴性血清 1～5项均由指定单位供应。 6、器材ELISA板，酶联免疫吸附检测仪、加样器、洗瓶、恒温箱等。 7、试剂及溶液配制同第五节猪瘟ELISA.。 二、操作方法 1、抗原包被以抗原稀释液将副结核亲和层析抗原稀释至50 ...

一、材料及试剂 1、猪瘟单抗纯化抗原 2、兔抗猪IgG酶标抗体 3、猪瘟阳性血清 4、猪瘟阴性血清 1～4均由指定的生物制品所购买。 5、ELISA反应板 6、包被液 碳酸钠 1.50g 碳酸氢钠 2.93g H2O加至 1 000ml pH值9.6 7、PBS液 氯化钠 8.90g 磷酸二氢钾 0.20g 无水磷酸氢二钠 2.13g 加双馏水 1 000ml 8、PBS－吐温洗涤液 PBS液 1 ...

简介：克伦特罗（Clenbuterol）属于beta兴奋剂，是一种高选择性的兴奋剂和激素，具有水解脂肪、合成代谢和对非条纹肌肉组织的松弛作用。进年来被一些人非法添加到饲料中以提高脂肪型动物的瘦肉率和加速动物的生长。当用作生长调节剂时，其添加量是治疗量的5—10倍，常在动物体内残留而给消费者带来危害。 通常，HPLC或GC-MS是克伦特罗残留检测的确证方法，但是其前处理步骤费用昂贵，而 ...

(一)原理 将放射性元素标记的抗体(或抗原)与相应的抗原(或抗体)沉淀时沉淀线通过自显影而证实。所谓自显影就是通过复合物中的标记同位素在蜕变过程中放出的射线作用于感光材料的卤化银晶体而产生潜影再经过显影把“像”显示出来。这样能检出肉眼看不见的沉淀线从而提高反应的敏感性这种方法可应用于凝胶中的所有反应。 (二)材料 1、放射性同位素标记的抗原或抗体 2、X—射线胶 ...

工作人员被放射性同位素污染是生物医学实验中最大的危害之一，为了在操作过程中确保安全，有许多严格的规定和要求。虽然在通常实验中所用同位素的量相对地讲是低的，但这些预防措施必须严格遵守。现对从事这一工作的一些原则作一简述，多半是一些普通的常识，但在执行时往往容易忽略而造成严重的后果。 一、放射免疫实验室中的放射性危险 对于没有封闭的放射性物质，主要的危险有下面三种： （1）β-或&gamma ...