免疫学技术

ELISPOT方法从创立至今已经有20多年的历史了。1983年，在地球南北两个半球地理位置相距遥远的两个研究小组几乎同时、独立的创立了这项技术。一个研究小组位于澳大利亚西部的柏斯Peth，牵头人是当时正在当地Margaret女王医院儿童医学研究所攻读博士学位的Jonathon D. Sedgwich （Sedgwick JD et. al. 1983）。另一个研究小组位于北欧瑞典城市哥德堡Got ...

ELIspot基本操作过程： 一、包被96孔板： 用70％乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30s 加入捕获抗体（PBS稀释），4℃过夜 倒空板中包被液，轻轻在纸上拍干，用PBS洗涤，禁用洗板机 加入100ul 2%的脱脂奶粉（或者BSA）室温孵育2小时，封闭板中空白位点 PBS洗涤1次。 （如果暂时不用，可将96孔板干燥后4保存，可保存2周以上） 二、细胞刺激和细胞因子捕获 从新鲜血液中用Fico ...

中国工程院院士、医学免疫学国家重点实验室主任曹雪涛率领的第二军医大学免疫学研究所、浙江大学医学院免疫学研究所和中国医学科学院的研究团队的研究论文" Intracellular MHC class II molecules promote TLR-triggered innate immune responses by maintainin ...

市场上的胎牛血清种类繁多，鱼龙混杂，很多科研工作者，特别是刚接触细胞培养的人，难以分辨血清质量的优劣。本人根据十多年来血清生产销售的经验，总结如下： 一、外观 拿到血清，最先接触的是血清外观，对于缺少细胞培养经验的人来说，外观的判断尤为重要 1、颜色 根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上，血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响， ...

据美国物理学家组织网6月29日报道，美国科学家找到了细胞因子SAMHD1蛋白抑制骨髓细胞感染HIV（艾滋病病毒）的机制，新研究扩展了人们对艾滋病患者免疫系统如何对付HIV以及HIV如何逃避免疫反应的理解，从而找到阻止HIV感染或者阻止其在感染者体内复制的新疗法。相关研究发表在6月30日出版的《自然》杂志上。 骨髓细胞是提供抗原的白血细胞的一个子集，对身体抵抗病毒和其他病原体的免疫反应非常重要。凯 ...

孵育一抗 A. 先将需要检测的抗体准备好，并决定好它们的稀释度。 B. 配好5%的Milk(TBST溶解)，按要求稀释好抗体。注意，如需高比例稀释， 最好采用梯度稀释。 C. 将稀释好的抗体和膜一起孵育。 一般采用RT 1小时，可根据抗体量和膜上 抗原量适当延长或缩短时间。 注意：为了便于后面分析结果，我们一般会选用已确定分子量大小而且纯度高的抗体作为marker与一抗同时孵育。 洗涤 用 TB ...

Ecl 显色原理：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。 2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1mi ...

显色（HRP酶） 1．增强化学发光法(ECL) Ecl 显色原理：氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮）的分子结构及化学反应式如下： 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1） ...

来源自：http://protein.dxy.cn/bbs/topic/17898080 --WB真正的难点：抗体的使用是一种艺术，一种抗体一个脾气。 对WB结果有决定性影响的因素是抗体的效价和如果正确使用手中的抗体。无论你如何提高自己的转膜技术，高效和低效之间往往只有数倍的差异，而抗体的效价可以差数千倍以上；同样，正确使用抗体可以保证抗体效价不被过分的拮抗，谋求特异性和非特异性背景之间差异的最 ...

二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑： 【一抗的种属来源】 二抗应选用与使用的一抗相同的物种 ...

R&D of Monoclonal Antibodies for HSV1一、HSV1简介 HSV，又称为单纯疱疹病毒 (herpes simplex virus)是一种双链DNA病毒。主要有两个血清型：HSV-1和HSV-2。 HSV1是引起病毒性角膜炎、病毒性脑膜炎、口唇、生殖器黏膜和新生儿感染的主要病原体。其感染在全世界非常普遍，不仅可产生原发性感染，而且还能产生潜伏感染和复发性感 ...

最新科学研究发现，心肌炎是由特定免疫细胞侵袭所导致。免疫细胞攻击内源性组织，是因为它们在成熟过程中没有机会识别一种只存在于心脏肌肉中的蛋白质。 心肌炎通常很危险，常常导致致命的心脏增大。许多情况下心脏移植是唯一的治疗希望。长期以来，医生们已有证据表明，自身免疫反应（即免疫系统的攻击）是引起危险发炎的原因。 然而至今仍不清楚，抗体或免疫细胞是否损害心脏肌肉组织。此外，也不知道免疫系统的致命攻击究竟 ...

染色质免疫沉淀（ChIP）是研究蛋白质-DNA相互作用的一项强大技术，广泛用于多个领域的染色质相关蛋白的研究（如组蛋白及其异构体，转录因子等），特别适用于已知启动子序列或整个基因位点的组蛋白修饰分析研究。这项技术采用特定抗体来富集存在组蛋白修饰或者转录调控的DNA片段，通过多种下游检测技术（定量PCR，芯片，测序等）来检测此富集片段的DNA序列。

视频介绍了微流体探针的操作和使用方法，包括如何组装和安装至倒置显微镜顶部，如何对准底层表面，以及处理侵入溶液的底层表面时的用法。

考马斯亮蓝(CBB)是SDS-PAGE电泳时常用的蛋白质染料，具有染色程序简单，效果好等优点，但其灵敏度要低于银染和荧光染色，因此后人在原始考马斯染色方法上作了一些修改。本视频介绍Kang等在2002年发表的快速、灵敏的胶体状考马斯G-250蛋白染色法。

E-选择素属于膜蛋白类型1，位于微血管内皮细胞表面，它可以帮助招募循环白细胞到皮肤，骨骼和发炎组织。本报告主要是为研究在生理性血流状态下E-选择素和E-选择素配体相互作用的最广泛使用的技术作一个可视化的，全面的描述。我们实验室联合哈佛皮肤疾病研究中心，利用最先进的平行平板流动腔装置，以及数字化可视化兼记录软件—NIS-Elements分析了微血管内皮表面白细胞滚动现象。

我们提出了一种新的多室神经元共培养微系统平台用以研究体外中枢神经系统轴突-神经胶质细胞之间的相互作用，此平台能平行开展多至6个独立实验，且由于使用新的微流体器具组装方法，大规模生产时仍具有良好的重复性。

本实验主要包括果蝇幼虫和半完整成年果蝇心脏的解剖，装片，以及固定和荧光标记特定的心肌组分。该实验可以用来详细分析心脏的结构特征。

视频演示了一个成年猴脑目的蛋白免疫检测的系统方法。这种方法依赖于组织包埋切片技术和专门的自由浮动切片批量染色工具。

德国美天旎(MACS)细胞因子分泌分析技术可以检测单细胞水平上的细胞因子分泌情况，以及富集分泌细胞因子的活细胞。