免疫学技术

CCD积分时间就是曝光时间，就相当于普通胶片相机的快门打开~关闭的时间，积分时间越长，快门打开时间越长，进入相机到CCD表面的光线越多，拍出来的图像越亮，亮到一定程度后，图像有部分或者全白，称为饱和或者过饱和。积分时间越短，图像越暗。应该根据环境光强，合理的选择和设置积分时间。曝 光时间这个概念几乎是每个有摄影常识的人都懂得怎么调，但在化学发光实验中这个指标并不好调。这是因为化学发光是有时间效应的，通俗的说每时每刻发 ...

ViroTag 检测系统实时提供关键任务数据病毒既危害人类健康，但也可以作为一种工具（如病毒疫苗）治疗疾病，因此近年来对病毒的研究越来越受到重视。然而，科学家们遇到了不少挑战，其中最主要的就是一直缺乏实时的、在线的分析方法，用于以病毒为直接产物或者病毒为载体的蛋白表达系统的研发和生产中。现在，我们找到了一种检测病毒的新方法，应用 ViroTag 检测系统，只需要标记粗制或纯化后的样品，用 Virus Counter3100 6 min 即可获 ...

ELISA实验因灵敏度高，特异性强在生物科研上得到了广泛的认可，但对初学者而言，如不注意实验操作过程中的各个环节，可能会对最终的实验结果产生比较大的影响，比如实验出现白板，显色弱灵敏度低，花板无梯度背景高等现象。下面对以上实验现象进行一一解析。1.白板现象在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后，酶标板中所有孔的颜色均为无色，即无信号呈现。出现该现象的可能原因：试剂已过保质期，不同批次稀释液交叉使用。错加漏加检 ...

ELISA，即酶联免疫吸附实验，其基本原理是将一定浓度的抗原或者抗体通过物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待检标本，通过酶标物显色的深浅间接反映被检抗原或者抗体的存在与否或者量的多少。ELISA技术作为免疫标记技术（包含免疫荧光技术，免疫放射技术，免疫酶技术和免疫胶体金技术）中的一种，已广泛应用于科研和临床实验中，具有快速，定性或者定量甚至定位的特点。在ELISA实验方法中，比较常见的方法有双抗体夹心 ...

制备出效价高，特异性强，稳定性好的抗体是免疫学实验取得成功的基础，抗体质量的好坏直接影响着研究者研究的成败，不同的免疫学实验方法（如ELISA，IHC，IP，ICC,SDS-PAGE, WB等）对抗体的效价，浓度和纯度有不同的要求。我们知道，一般免疫血清中含有特异性抗体和非特异性抗体，血清蛋白以及其他各种杂蛋白等，在制备特异性抗体过程中当抗体的效价达到实验预期之后，我们所制备的抗体的纯度关键取决于所选择的纯化方法。下面 ...

抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。一般而言，抗体按靶位点不同主要分为单克隆抗体和多克隆抗体 ，由多个B淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体， 本篇主要讲述兔源性多克隆抗体制备的相关流程。抗原有两个基本特性，即抗原性和免疫原性。有抗原性的物质不一定有免疫原性， ...

随着免疫荧光技术的不断发展，荧光染料及其标记的抗体偶联物也被广泛的应用于生物学实验中。目前，市场上抗体及蛋白标记的荧光染料主要有CFTM系列(BIOTIUM, USA); Alexa Fluor®系列(Life technology, USA); DyLight系列; Cy系列; IR Dye系列等等。使用最多的为Alexa Fluor®系列和CFTM系列。一、CFTM系列染料的核心对比Alexa Fluor®系列具有以下几点优势：1、新型罗丹明核心罗丹明染料 ...

话说肿瘤医院的熊主任自从看到陈博上期的《CAR-T 实体瘤靶点英雄谱：夜空中最闪亮的星》之后，鸡血满满，奋发图强要做 CAR-T 实体瘤研究！派出得力干将汪博士！选择靶标！设计载体！体外验证！体内实验！过伦理！上临床！出任院长！迎娶白富美！走上人生巅峰！然而，半年过去了，熊主任内牛满面抱着陈博大腿哭诉：「一入 CAR-T 深似海，从此节操是路人」「为啥我的实验不顺利？」「为啥 CAR-T 研究到处都是坑？」陈博也很无奈：「老熊啊，你就是太顽皮，讲座听得不认真， ...

在酶联免疫ELISA实验中，涉及到牛奶样本的时候，具体的牛奶样本处理方法有以下两种：样本处理1：取 10ml牛奶放入离心管，加入10ml乙酸乙酯，超声震荡30min，然后4000g离心10min（如两相之间出现乳化层，则将样品瓶放在80℃的水浴 中约5min，再离心）移取1ml乙酸乙酯层至另外试管中，60℃氮气流下蒸干，残留物用缓冲液2ml缓冲后备用，前处理过程约需2小时。处理2：取 10ml牛奶10℃3500G离心10MIN， ...

肿瘤标志物在1978年就被发现了，它是指在血液、体液及组织中可检测到的与肿瘤相关的物质，达到一定水平时，可反映某些肿瘤的存在。 血清肿瘤标志物分类： 一个最广谱的指标：癌胚抗原（CEA）1965年发现的CEA可谓是最广谱的指标，它的升高可见于结/直肠癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫及子宫颈癌、泌尿系肿瘤等，其他恶性肿瘤也有不同程度的阳性率。总之，腺癌中CEA最容易升高，其次是鳞癌和低分化癌。肿瘤分期晚、瘤体负荷大、肿 ...

细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分 T 淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体（TCR），与 MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽，启动获得性/特异性免疫应答机制，比如 T 细胞介导的细胞免疫和 B 细胞介导的体液免疫。由于 TCR 与 MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低，半衰期短，相互结合后容易快速脱落，重组的可溶性 MHC-抗原肽复合物单体并不适合用于抗原 ...

病毒既危害人类健康，但也可以作为一种工具（如病毒疫苗）治疗疾病，因此近年来对病毒的研究越来越受到重视。然而，科学家们遇到了不少挑战，其中最主要的就是一直缺乏实时的、在线的分析方法，用于以病毒为直接产物或者病毒为载体的蛋白表达系统的研发和生产中。现在，我们找到了一种检测病毒的新方法，应用 ViroTag 检测系统，只需要标记粗制或纯化后的样品，用 Virus Counter3100 6 min 即可获得高精度的病毒定量结果。快速追踪生产体系 ...

ELISA 试验以灵敏度较高、特异性较好的特点得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我公司将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期提高试验质量。Elisa 试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡至少 30 分钟。2 加样 可能原因：1）血清或血浆标本分离不好即进行 ...

标记免疫技术发展最早的一种是免疫荧光，它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术，通过将抗体与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括，细胞固定和通透，封闭，孵育一抗，二抗等。除了这些基本步骤，接下来的实验方法希望可以帮到您。1. 细胞固定和通透为达到最佳的检测效果，细胞需要经过固定和通透。步骤很重要，细胞和抗原需要保证最佳的结构，并利于抗体与抗原结合。通常情 ...

诊断慢性乙型肝炎可能需要进行几项血液检测，以确定感染是否对肝脏造成损害，并明确感染阶段。当决定患者是否需要进行治疗以及应如何监测时，医生会考虑所有这些结果。 现在，我们一起来讨论上述检测之一，HBV DNA检测或病毒载量检测，看看它如何快速提供患者的乙肝感染信息。 血清中乙肝病毒DNA水平是乙肝病毒复制的可靠定量指标。聚合酶链反应(PCR)技术是最常用的检测HBV DNA的方法，可以检测血液样本中迅速生成的HBV DNA片段。目前，病毒载量通常采用“国际单位/毫升” (IU/mL) 为单位。然而，在过去，它的数量单位以拷贝/升(拷贝/毫升)来表示，如果检测到的HBV DNA≥105拷贝/毫升说明乙肝病毒复制较活跃，体内的病毒量较多。在一些地区和实验室，仍然使用这一计量单位。如果需要将拷贝换算为国际单位，大约为1个国际单位≈5.6拷贝，国内一些厂家试剂盒的换算系数为1。因此，面对不同试剂的HBV DNA检测报告，需要了解检测试剂国际单位与拷贝间的换算系数，才能进行比较。 HBV DNA 检测的敏感性可能受不同实验室测试的影响，因此，最好使用相同的实

一、梅毒体外诊断试验 1.梅毒的体外诊断试验分类 梅毒的体外诊断试验按试验所用抗原分为非密螺旋体抗体试验(nontreponemal antibody test, NTrAT)和密螺旋体抗体试验(treponemal antibody test, TrAT)。NTrAT包括快速血浆反应素环状卡片试验(rapid plasma reagin circle card test, RPR)、不加热血清反应素试验、性病研究实验室试验和甲苯胺红不加热血清试验(tolulized red unheated serum test, TRUST)等, 均以心磷脂、胆固醇和磷脂酰胆碱等为抗原检测非特异性的抗心磷脂抗体(反应素), 故存在生物学假阳性。 2.检测特异性抗TP抗体的筛查试验 在检测特异性抗TP抗体的筛查试验中, 荧光TP抗体吸收试验(fluorescent treponemal antibody absorption, FTA-ABS)、TP血球凝集试验(treponema pallidum hemagglutination assay, TPHA)和

以更少量的样本完成对更多生物标志物的分析。由卓越的免疫试剂供应商开发，用于 Luminex® 平台，ProcartaPlex 使您可以在 25-50μL 的样本（血浆、血清、细胞培养上清液以及其他体液）。实现在 25-50μL 的样本中同时对多达 50 种因子进行检测与定量。该技术在多通道「类 ELISA」分析中，为每种靶标使用了经不同染色处理的捕获微球。相比于传统的三明治 ELISA 而言，ProcartaPlex 免疫分析可以在使用样本量少而时间相同的情况下，分 ...

（一）免疫（immunity）传统概念：指机体对病原体的感染有抵抗力。现代概念：机体免疫系统识别「自己」和「非己」，对自身成分产生天然免疫耐受，对非己异物产生排除的一种生理反应。免疫系统的功能：1. 免疫防御：识别、清除入侵的病原体及有害生物分子。2. 免疫监视：识别、清除体内突变细胞和病毒感染细胞。3. 免疫自稳：清除体内衰老、损伤或变易性细胞，对自身成分耐受，维持内外环境相对稳定。免疫的分类根据种系和个体免疫体系统的发育过程及免疫应 ...

◆ 原理自然杀伤 T 细胞（NKT 细胞）被激活后会分泌大量的细胞因子，并能分化成具有细胞毒作用的效应细胞。临床研究发现 NKT 细胞参与部分疾病的调节，尤其是参与了自身免疫病，抗肿瘤 和器官移植的抗排斥反应的调节。特别是 NKT 细胞在一些自身免疫性疾病如硬皮病，I 型糖尿病及肝炎等具有免疫保护作用。目 前已知对 NKT 细胞的刺激效应最佳的物质是脑苷脂-α-半乳糖酰基鞘胺醇（α-Galactosylcermaide,α-GalCer,KRN7000），这类物质来 ...

发热待诊患者诊断，临床常需要实验室进行伤寒相关实验诊断，请问目前是否有较敏感、特异的方法可取代肥达氏试验？ 山东大学齐鲁医院检验科王传新主任（中华医学会检验分会免疫学组副组长）：伤寒相关实验检测传统方法为细菌培养和肥达试验。细菌培养特异性高，是确诊伤寒的金标准，但结果易受抗生素、培养条件、标本采集的质、量和时间等多因素影响，敏感性低且费时；肥达试验是用伤寒杆菌的菌体（O）抗原和鞭毛（H）抗原以及副伤寒甲、乙、丙菌液与稀释的待测血清反应，根据凝集效价判断血清中有无伤寒杆菌的抗体，由于伤寒杆菌的O抗原与A群、B群沙门氏菌有部分相同抗原，与甲、乙两种副伤寒杆菌有一定的交叉反应，肥达反应诊断伤寒杆菌特异性差，敏感性低，常出现假阳性，而且抗原抗体结合出现凝集沉淀常需要时间较长；大孔反应板凝集试验原理与肥达反应相同，结果观察更为清晰。目前其他免疫学检测方法有金标法、ELISA法和PCR技术等，金标法、ELISA法具有较高的特异性和敏感性，操作简单、快速，阳性反应表明有伤寒杆菌或伤寒抗原存在的可能，但存在一定的局限性。PCR检测，高特异，受试剂、操作等因素影响，阴性不能排除伤寒可能。