免疫学技术

相关专题 由于免疫组织化学技术具有特异性强、灵敏度高及能将形态研究与功能、代谢研究有机地结合在一起的显著特点，所以，这门新技术从一诞生起就显示出了强大的生命力和广阔的应用前景。此方法经不断改进和发展已日趋成熟，应用范围逐渐扩大。目前已有近十种技术方法及几百种标记抗体，技术方法逐步规范化，标记抗体逐步商品化，现今它已被广泛地应用于生物学和医学研 ...

相关专题 Borrowed from David Bowtell (bowtell@ariel.ucs.unimelb.edu.au)Transfer the srongest positive clones to a 24 well plate by scraping the adhering Cells with a truncated ...

相关专题 1原理：免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物，与抗体或抗原联结，与相应的抗原或抗体作用后，通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量，亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究，即酶免疫组织化学技术。目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验（ELISA），它是使抗原或抗体吸附于固相载体，使 ...

相关专题 1．交瘤技术的技术流程如图4-1所示。图4 杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本流程2． 技术要点　　1） 免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。　　2） 骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选 ...

相关专题 次与特异性抗体和酶标第二抗体作用后，加入能形成不溶性显色物的酶反应底物，使区带染色。常用的HRP底物为3，3’-二氨基联苯胺（呈棕色）和4-氯-1-萘酚（呈蓝紫色）。阳性反应的条带清晰可辨，并可根据SDS-PAGE时加入的分子量标准，确定各组分的分子量。本法综合了SDS-PAGE的高分辨力和ELISA法的高特异性和敏感性，是一个有效 ...

相关专题 【原理】 正常人外周血中T细胞在体外能直接和绵羊红细胞（SRBC）结合形成玫瑰花样细胞团，这是因为人的T细胞膜具有能和SRBC膜上的糖蛋白相结合的受体，称为E受体。已证实E受体是人T细胞所特有的表面标志，也是T细胞的常用方法之一。 【材料】 肝素抗凝人外周血1ml 淋巴细胞分层液（见附录）2ml 0.5%SRBC：悬液将脱纤维的绵羊 ...

相关专题 【原理】 玻片凝集的原理与试管凝集相同，一般均用于诊断未知抗原，如用已知的免疫血清诊断未知的细菌和血型鉴定等。由于方法简便，并具有较高的敏感性和一定的特异性，故迄今仍为各实验室所应用。玻片凝集的反应时间短（应在2~5分钟左右出现凝集），因而对免疫血清的浓度应相应提高（如该免疫血清试管凝集效价在1:1280以上时，应做1:20 ...

相关专题 【原理】 补体介导的细胞毒试验（complement dependent cytotoxicity test）的原理是特异性抗体与细胞膜上相应抗原结合后，在补体的参与下，可产生细胞膜损伤，细胞死亡；不带相应抗原的细胞仍然存活。利用染料排斥实验判定淋巴细胞死活状态，活细胞不着色，具有折光性，大小也正常。死细胞着色，体积增大。 ...

相关专题 T细胞在体外培养时，受到非特异性有丝分裂原（如植物血凝素 Phytohemagglutimin，PHA）或特异性抗原刺激后，可出现细胞体积增大，代谢旺盛，蛋白和核酸合成增加并能进行分裂，成为淋巴母细胞，即为淋巴细胞转化现象。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体细胞免疫水平。因此可作为测定机体免疫功能的指标之 一、形态学检测法 【原理】 ...

相关专题 一、免疫球蛋白的提取与鉴定： 各类免疫球蛋白及其与其它血清蛋白间，根据它们的分子大小、电离密度、等电点以及在水溶液中的溶解度不同等，得以相互鉴别与分类。利用上述特性，还可以从液体中分离和提取各种免疫球蛋白。（一）免疫球蛋白的分离提取：1．盐析法（Salt fractionation）：蛋白质在不同浓度的盐溶液中相对溶解度不同。 ...

相关专题 【原理】 在含有特异抗体的琼脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，当抗原向周围扩散后与琼脂中抗体相结合，既形成白色沉淀环，其直径或面积与抗原浓度呈正相关。同时用标准抗原或国际参考蛋白制成标准曲线，即可用以定量检测未知标本的抗原浓度（mg/ml或IU/ml）。 应用这一实验方法可检测正常人群或患者血清中IgG、IgA及Ig ...

相关专题 【原理】 补体能使溶血素（抗绵羊红细胞抗体）致敏的绵羊红细胞（SRBC）发生溶血，当致敏的绵羊红细胞浓度恒定时，溶血程度与补体含量和活性呈正比例关系。因此，将新鲜待检血清做不同稀释后，与致敏红细胞反应，测定溶血程度，以50%溶血时的最小血清量判定终点，可测知补体总溶血活性。以50%溶血判断结果比100%溶血灵敏、准确。 【材料】 1 ...

相关专题 机体的特异性免疫反应是指机体受抗原物质刺激后产生体液免疫（抗体）和细胞免疫（致敏的T淋巴细胞及其产物多种淋巴因子）的过程。一种抗原能否引起免疫反应，一方面取决于抗原分子表面有无特异性的抗原决定簇。另一方面取决于机体有无相应的免疫活性细胞。上述条件具备时，抗原经合适途径，选择合适剂量及次数，进入机体内，经过一段潜伏期，抗体水平就逐渐升 ...

相关专题 抗体制备技术1、多克隆抗体（polyclonal antibody pAb）：用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物～。2、单克隆抗体（monoclonal antibodies mAb）：由一个识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同 ...

相关专题 【实验目的】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验原理】 当将抗原注射入实验动物体内时，一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合，受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体，这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克隆抗 ...

相关专题 免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表着机体体液免疫的水平，并进一步代表着B细胞的功能，因此测定血清Ig含量可以推知机体的体液免疫功能和诊断某些疾病引起的Ig的过高和过低。 随着免疫学的发展和需要，免疫球蛋白的纯化和其成分的提纯成为必不可少的手段。纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相结合的方法，特别 ...

相关专题 一、抗体的一些基本概念单克隆抗体 (Monoclonal AntibodyMcAb)：单个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体多克隆抗体(Polyclonal Antibody)：多个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体抗原（antigen ，Ag）表位，抗原结合位点，抗原决定簇（epitope）单克隆抗体 1、单克隆抗体的特点特异性强，具有抗原结合位 ...

相关专题 基因芯片技术在生命科学史上具有开拓性的意义，曾跻身年度自然科学领域10大进展之一，组织芯片是基因芯片的延伸，自诞生以来就获得了生命科学从业人员的热切关注。本文从组织芯片的制备方法、应用领域、以及目前的发展概况做简要的介绍。 组织芯片的制备技术： 制备组织芯片的两个关键步骤是制备受体蜡块和从供体石蜡块中精确采集微量样品。虽然至今仍然 ...

相关专题 许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下，而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。 一些研究发现，切片在室温下保存3个月以上，免疫组化染色结果会出现减弱，甚至阴性。因此，有学者进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片，共110片，常温空气中放置1个月、3个月、6个月、1年再与新切 ...

相关专题 一、目的：1、了解抗血清制备的基本过程：2、掌握抗血清的收集和保存方法。二、原理：抗血清为含有某一类具有特异免疫功能的抗体分子的血清，一般为动物被人工注射某类抗原后制备的动物血清。高效价的抗血清用于研究工作以及疾病的诊断和治疗。一种抗原能否引起抗体生成反应，一方面取决于抗原分子表面有无抗原决定簇（Antigenic determin ...