免疫学技术

作者：Nanci Donacki 转自www.bioon.comFormalin Fixed Cell Plates1. Trypsinize confluent flasks2. Pool and count cells3. Centrifuge at 1500 rpm for 10 minutes4. Resuspend to the appropriate concentration in complete medium4 x 105 cells/ml for epithelial cells2 x 105 cells/ml for fibrobl ...

一、免疫荧光组织化学技术的发展史概述免疫荧光组织化学是现代生物学和医学中广泛应用的技术之一，是由Coons和他的同事(1941)建立，免疫荧光技术与形态学技术相结合发展成免疫荧光细胞(或组织)化学。它与葡萄球菌A蛋白(SPA)、生物素与卵白素、植物血凝素(ConA等)相结合拓宽了领域；与激光技术、电子计算机，扫描电视和双光子显微镜等技术结合发展为定量免疫荧光组织化学技术；荧光激活细胞分类器Fluorescin acti ...

ELISA中常见问题及解决方法ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将 ...

http://www.tpims.org/scientists_eli-sercarz.aspSercarz, a native of New York, received his Ph.D. in Immunology at Harvard University in 1960 and had postdoctoral research fellowships at Harvard (1956-1960) and the Massachusetts Institute of Technology (1962-1963). Dr. Serc ...

Novo Nordisk China R&D center 委托丁香园网站招聘3位免疫学相关高级人才，待遇优厚，职位详情请参看以下说明，有意者请尽快发送简历至zj@dxyer.com丁香园负责对报名人进行初筛，并将合格简历提交给Novo Nordisk China R&D center 。岗位介绍：Scientist/Senior Scientist/Research DirectorNovo Nordisk China R&D centerZhongguancun Life S ...

常用抗体标记荧光染料的选择随着免疫荧光技术的不断发展，荧光染料及其标记的抗体偶联物也被广泛的应用于生物学实验中。目前，市场上抗体及蛋白标记的荧光染料主要有CFTM系列(BIOTIUM, USA); Alexa Fluor®系列 (Life technology, USA); DyLight系列;Cy系列; IR Dye系列等等。使用最多的为AlexaFluor®系列和CFTM系列。CFTM系列染料的核心对比AlexaFluor® ...

的2009年1-3月全文，持续更新（3月11日更新一期）《科学》09年3月06日出版pdf全文http://www.rayfile.com/files/babebccc-0dd3-11de-9021-0019d11a795f/重新整理一下，方便大家下载3月08日最新更新三期《自然》09年3月05日出版pdf全文http://www.rayfile.com/files/40b4522e-0b25-11de-b280-0014221 ...

由于免疫缺陷病涉及细胞免疫、体液免疫、吞噬功能和补体系统等多方面的原因，因此其检测方法也是多方面、综合性的；有体内试验，也有体外试验；有功能试验，也有细胞表面标志的检查。一、淋巴细胞计数和外周血像检查淋巴细胞计数可采用直接计数或百分比法，这是最简便而直接的免疫缺陷检查。成人外周血淋巴细胞的正常值为1.5×109～3×109/L，小儿略高于成人。不论什么年龄，如低于1.2×109/L应考虑为细胞免疫缺陷病。原发性免疫缺陷常 ...

一、LOCS II 晶状体混浊分类标准二、LOCS II 晶状体混浊分类标准LOCS Ⅱ也采用了裂隙灯晶状体断面彩色照片及Neitz后照明彩色照片分级，核性白内障标准照片分4级（N0、N1、N2、N3），皮质性白内障标准照片分5级（Ctr、CI、CII、CIII、CIV），后囊下型白内障标准照片分4级（P0、PI、PII、PIII）。LOCS II的局限性是各级别之间间隔不等、核的颜色分级仅一个标准、采用整数分级、95%容许限（95% tolerance ...

Rules for antigenic peptide selection by wxscmu1.Use more than one peptide2.Use 15-20 AA peptide3.Avoid signal peptide, transmembrane region. Avoid conserved region among both orthologs and paralogs (Do BLAST).4.Use the N- and C-terminal sequences if they are hydrophilic and if a suit ...

LISA技术的-操作要点 　优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出准确的结果。4.1 标本的采取和保存可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清） ...

向急需双向电泳技术等资料的战友推荐：http://www.proteomics.com.cn/paper/内容有：“生命科学中的若干关键技术”下载 Proteomic analysis of ubiquitin-proteasome effects: insight into function of eukaryotic initiation factor 5A. Oncogene (2003) 22, 4819-4830. 这是目前国内发表影响因子较高的蛋白质组学论文蛋白质非共价复合 ...

美国科学家近日通过研究，打破了一个古老的免疫学教条——一个抗体只能绑定到一个抗原上。他们成功地使一个抗体紧密地绑定到两个不同的抗原上。相关论文发表在3月20日的《科学》杂志上。这一抗体作用于2种蛋白——血管内皮生长因子（VEGF）和人类表皮生长因子受体2（HER2），前者被认为会促进肿瘤的生长，而后者则在一些侵略性的乳腺肿瘤里高表达。科学家以前经常发现一些抗体能够松散地绑定到多个抗原上，但一直没有发现或通过操作实现 ...

关于荧光三标如何选择抗体？做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标记，一个红色的（如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等）的荧光标记。 ...

Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统，广泛应用于Western blotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸（Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys）组成的多肽片断。FLAG标签只有8个氨基酸组成，因此它不会占据其他表位与结合域，避免导致融合蛋白的功能、 ...

Fundamental Immunology 7OverviewFundamental ImmunologySeventh EditionThis standard-setting textbook has defined the field of immunology since 1984, and is now in its Seventh Edition continuing to deliver the detailed, authoritative, and timely coverage readers expec ...

随着生命科学的发展，围绕蛋白进行的研究越来越多，抗体试剂在实验中的重要性越来越举足轻重。面临着纷呈复杂的抗体试剂市场，如何选择到适合自己实验的抗体就变得尤为重要。一、关于特异性的选择：特异性的选择主要需要考虑四个方面：蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。1、蛋白特异性：针对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分，重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测，对抗体的要求是不一样的，注意查看抗体说明书的检测说 ...

http://www.cnbg.com.cn/html/news/qy/2013/0205/1781.html来自浙江大学医学院、第二军医大学和中国医学科学院等处的研究人员，在核糖核酸（RNA）病毒逃逸天然免疫杀伤清除机制研究中取得重要突破，证实RNA病毒通过诱导Siglec-G，促进RIG-I降解，抑制了先天免疫反应。这一研究成果发表在1月31号的《细胞》（Cell）杂志上。文章的通讯作者是现任职浙江大学医学院和第二军医大 ...

、非特异性染色的主要因素　　组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点：　　（1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。　　（2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。　　（3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如Forssman氏抗原），可与组织中特异性抗原以外之之相应抗体结合。　　（4）从组织中难于提纯抗原性物质，所以制备的免疫血清中往往混杂一些抗其 ...

在生物江湖过了这么多年，懂行的人都知道检测细胞活性、凋亡、毒性方面有着各式各样的试剂和方法。而大都有预见性地肯定道CCK-8法是目前最具潜力和优势的细胞活性毒性检测方法。那为什么较早期传统的MTT法，CCK-8法会此被科研和药厂等相关实验人员看好呢？今天就这个方面来和大家做个交流，给点鄙人的见解。不可否认，曾经MTT法的出现使各实验人员为之振奋。因为MTT法较当时其他细胞活性检测有不需要特殊检测仪器、无放射性同 ...