细胞技术

培养基作为最早将动物细胞培养基商品化的企业，GIBCO至今仍保持了在此领域的领导者地位。我们可以提供最为广泛的品种以满足用户不同的需求（培养基产品的详细信息请参考我司目录），每一种产品都通过最为严格的品质管理。同时，我们也可按客户的要求对培养基的配方进行改动，或完全按客户的配方进行生产。在培养基的剂型方面，我们可以提供传统的干粉剂型，这种剂型有利于长期储存并节省储存空间；同时，也可提供工作浓度的液 ...

1、Q：rh Annexin V R-PE 20 tests是BD公司用于凋亡流式检测的试剂盒，产品显示种属为人，请问能否用于大鼠细胞的检测？A：可以。因为Annexin V是与PS亲和，而PS在不同种属间应该没差异。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的C ...

各位大虾，大家在用96-或/和384-微孔板做cell-based assay的时候，是否会遇到边缘效应（Edge Effect），表现出来的效应一般是边缘的一圈well读值异常，我观察和请教了周边的人，大家对这种效应的处理，一般有这几种方式：& K/ $ j9 {7 Wj$ D( C( d1、周围一圈微孔放弃不用，不种细胞，而是铺上培养基或者水；2、Microplate在CO2培养箱培养时， ...

传代培养的细胞是细胞系；细胞株就是从细胞系筛选出来的 有特殊属性的 比如无线增值的。细胞株(Cell Strain)：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株(Cell Strain)，也就是说，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。原代培养物经首次传代成功后即为细胞系(c ...

1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。2、Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅 ...

1．人无菌室之前用肥皂洗手，用75％酒精擦拭消毒双手。2．倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置37℃下预热。3．超净台台面应整洁，用0.1％新洁尔灭溶液擦净。4．打开超净台的紫外灯照射台面20min左右，关闭超净台的紫外灯，打开抽风机清洁空气，除去臭氧。5．点燃酒精灯；取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管；安上橡皮头；过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。6． ...

一、半连续式培养1.半连续式培养又称为重复分批式培养或换液培养。采用机械搅拌式生物反应器系统，悬浮培养形式。在细胞增长和产物形成过程中，每间隔一段时间，从中取出部分培养物，再用新的培养液补足到原有体积，使反应器内的总体积不变。 这种类型的操作是将细胞接种一定体积的培养基，让其生长至一定的密度，在细胞生长至最大密度之前，用新鲜的培养基稀释培养物，每次稀释反应器培养体积的1/2~3/4，以维持细胞的指 ...

1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70% ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70% ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10 分钟以 ...

1. 种类1.1. 细胞培养实验用品均为无菌，除了玻璃容器与pasteur pipet 外，其它均为塑料无菌制品。1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附，培养容器种类有Tflaskplates dishes roller bottle 等，依实验需要使用。1.3. plastic sterile pipet: 1ml 2ml5ml 10ml 25ml1.4. 塑料离 ...

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始，各种目的无血清培养最好首选AIM V（12005）培养基（SFM）。 (责任编辑：大汉昆仑王) ...

1.如何选用培养基？ 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基（SFM）。 2.为什么要热灭活血清？ 加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究 ...

1 冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后， 须立即放入37℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml ...

细胞培养中的污染分为两类，化学污染和生物污染。 化学污染 化学污染是一些对细胞有毒性的或对细胞产生刺激的化学物质。这些污染一般来自于没有洗净的器皿、不纯的化学试剂和质量较差的蒸馏水等。 化学污染中比较引人注意的是细菌内毒素。它是革兰氏阴性细菌细胞死亡后解体释放出的疏水性的细胞壁组成物质，对塑料等疏水性强的物质有很强的吸附能力。细菌内毒素可刺激部分细胞产生一些激素或细胞因子，对细胞生长和实验结果产生 ...

维持ES细胞处于未分化状态：ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于 ...

试剂准备：LB培养基: 500mL双蒸水：600mL 高压灭菌 预冷10%甘油：1000mL 预冷250ml离心杯：高压灭菌 预冷50mL离心管数个，250mL摇瓶4个，1.5mL EP管 高压灭菌制备步骤：1、接种原代菌（DH5α或DH10B），次日挑取单菌落，放入1mL LB培养基中，37℃，300rpm，6 hr；3、然后转接到含500ml LB液体培养基的2L摇瓶中（按1:50 ...

试剂准备：LB培养基，50mL离心管4个，250mL摇瓶1个，1.5mL 离心管高压灭菌0.1M CaCl2高压灭菌含15%甘油的0.1M CaCl2：50%甘油、0.15M CaCl2高压灭菌，1:2混合配制制备步骤：1．前夜接种受体菌（DH5α或DH10B），挑取单菌落（或直接用－80℃保存的单克隆菌液100μL）， 放入10mL LB培养基中37℃摇床培养过夜（约12~16 ...

1.如何选用培养基？ 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件： 细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM 10% 热灭活马血 ...

Gomori染色是用于检测细胞中骨型碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase BALP)的一种染色法，具体内容如下：一、主要试剂准备：PBS、丙酮（或甲醛、95乙醇）、3%β-甘油酸钠、2%巴比妥钠、2�Cl2、2%MgSO4、2%硝酸钴、1%硫化铵（纯的硫化铵也为液体，且由于其有强烈的刺激性味道，建议现配现用）二、实验步骤：1、将无菌玻片放在细胞的培养皿中，待细胞 ...

Wnt配体蛋白在体外含量丰富，但是纯化非常困难。该方法使用Wnt11r蛋白作为一个例子来说明如何使用293T细胞产生分泌Wnt11r和收集Wnt11r蛋白质，在体外作进一步的生化实验。材料与试剂1. 293T细胞2. 胎牛血清（Invitrogen公司，10438-026）3. DMEM（高糖 货号＃11965，Invitrogen公司）4. ...

问：我想知道在用血细胞计数板计数时，所指的稀释倍数到底是什么，如取九滴细胞液和一滴台盼兰混合，再滴到计数板上用公式计算时其稀释倍数是10对吗，血细胞计数板计数很多文献都说在盖波片边缘加入1－2滴染色的细胞悬液，使之完全充满计数板上与盖波片间的空间我不明白如何加入细胞悬液。答:1、将细胞吹成单细胞悬液之后，只要将滴管靠在计数板与盖波片之间的空隙上，轻轻用力，由于负压细胞悬液会轻松的进入盖玻片与计数板 ...