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问：我想知道在用血细胞计数板计数时，所指的稀释倍数到底是什么，如取九滴细胞液和一滴台盼兰混合，再滴到计数板上用公式计算时其稀释倍数是10对吗，血细胞计数板计数很多文献都说在盖波片边缘加入1－2滴染色的细胞悬液，使之完全充满计数板上与盖波片间的空间我不明白如何加入细胞悬液。
答:1、将细胞吹成单细胞悬液之后，只要将滴管靠在计数板与盖波片之间的空隙上，轻轻用力，由于负压细胞悬液会轻松的进入盖玻片与计数板之间。但是要注意千万不要吹入太多的细胞悬液，这样会导致计数不准确，只要充满空隙，不要有气泡就行.(计数板上两边都有计数区，加细胞液进去时，加一边就可以了，另一边是备用的。) 2、一般数了边上的四个大格子（每个16小格），取平均数，再乘以10的4次方，这就是每毫升你的细胞个数。再乘以你的细胞液的量，比如说4毫升，就是乘以4。 “乘以你的细胞液的量” 指的是原来的那个等待计数的细胞悬液总量 。 我们加入计数板的仅仅是从原来的那个等待计数的细胞悬液 中吸取的微量的样本 ，做检测浓度用。 加入计数板的溶液铺平计数板就可以了。 你可以看到：计数细胞悬液的浓度的公式为 细胞浓度＝（4个大格细胞总数/4）×104个/ml 用这个结果（计数板算锝的细胞浓度）×你的细胞悬液总量＝等待计数的细胞悬液所含的细胞总数 。 稀释倍数的定义是稀释前的浓度是稀释后浓度的多少倍？ 1。一滴细胞液加一滴染液，则稀释前浓度是100％，稀释后浓度是50％，则稀释倍数是2 2。9滴细胞液加一滴染液，则稀释前浓度还是100％，尔稀释后浓度是9/10，则稀释倍数是10/9 稀释倍数按照常规的数理理解就行，建议你用血球计数板计数时先在板的两侧用酒精搽拭一下然后再用盖玻片盖上，这样盖玻片贴附比较牢，对计数结果的正确性有帮助，国外很多实验室都是这样做的！！然后计数时最好有固定的体积，一般为7--9ul为好，用微量加样器是最好的！！ 如果细胞数量较多的情况下，可取一滴（或100ul）细胞混悬液＋八滴（或800ul）细胞培养液＋一滴（或100ul）苔盼蓝，这样最终稀释倍数为十倍。 稀释的倍数就是你把你最终得到的细胞细胞悬液稀释的倍数， 如说你消化了一瓶细胞后制成了悬液并且想把它分瓶 或者接种需要计数一下 那么你取一地悬液 滴加到ep管然后再加一滴胎盘兰 再加上八滴缓冲液或者生理盐水之类的 那么你得到的就是你的细胞悬液的稀释十倍的细胞悬液。这个数值你可以直接用公式读出来当然公式里带的10 就是稀释的倍数。 如果还是不明白的话也可以理解 那就是你亲自做几遍后 就会理解了。 细胞计数板购买链接： http://www.biobars.cn/shop/goods.php?id=1693 (责任编辑：大汉昆仑王) |
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