细胞技术

Human/Mouse/rat Neural lineage Functional identification Kit（目录号 Sc028）在神经祖细胞（NPc）的分离和扩增过程中，必须通过评估它们分化成多个神经谱系的能力，从而在功能上评估它们的多能性。本文介绍的试剂盒提供了一种快速简单的技术，可确认您的起始细胞群向星形胶质细胞、神经元和少突胶质细胞谱系分化的能力。在实验过程的早期阶段验证多能性的能力：√ 定义起始干细胞群体√ 减少实验中以 ...

开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1 万单位）、7.5％NaHC03 溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS 洗液。用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至少15 分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰 ...

细胞的迁移和浸润不仅是细胞进行重要生理活动的基础，同时也在炎症反应和肿瘤发生发展等病理过程中发挥着关键的作用。细胞迁移及浸润是肿瘤细胞的主要特性之一，因此其也成为目前细胞生物学研究的热点。目前对细胞迁移及浸润研究的检测方法通常是建立在标记基础上的终点检测法，其中一种最常用的检测方法为BoydenChamber法，又称Transwell技术，通过将细胞加入上孔室，在下孔室加入血清或其他趋化因子诱导细胞迁移到 ...

InSphero是通过类器官式3D微组织培养(supplieroforganotypic,biologicalinvitro3Dmicrotissues)开展新药测试的领军型开发商。当前全世界最知名的前十家药物和护肤品制造商产品测试都使用到InSphero的专利微组织技术。InSphero3DInsight™微组织用于化学品应用的效能和毒理体外测试，包括长期效应和炎症介导的毒性效应。开发有可供选择的多种肿 ...

引言血球计数板一直是实验室细胞计数的金牌标准。自从18世纪在法国第一次被用于分析病人的血液样本，血球计数板在过去几百年中已经得到一系列的重大发展，相比以前计数更为精确、使用更为简单，并最终形成了今天我们使用的样子。现在血球计数板计数仍然是所有细胞学研究的一个组成部分，然而其计数存在的问题由于自身固有的设计和使用方法并没有随着时间而消失。我们在这里将要列出造成血球计数板计数误差的来源，并将讨论自动化计数是如 ...

一、概述 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡最早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧，这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。AnnexinV是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。碘化丙啶（Propidium Io ...

背景细胞的多能性被定义为一个干细胞能够分化成除了胚外组织（如胎盘）的身体所有类型的终末成熟细胞的能力。这种多能性随着多能干细胞分化为终末分化细胞的逐级分化过程中而逐渐丢失。两个众所周知的多能干细胞是胚胎干细胞(ESC)和诱导多能干细胞(iPS) 。图1：多能干细胞(PSC)起源和命运的图示。胚胎干细胞(ESC)来源于正在发育的胚泡的内细胞群(ICM)；诱导多能干细胞（iPS）来自于人为通过对细胞核重新编码而返回多能性状 ...

1.细胞爬片可以用含叠氮钠PBS液保存，但不知道具体浓度，请告知。答：加在液体中作为防腐剂的叠氮钠浓度一般为0.04–0.08%。但是我建议对于细胞爬片，还是尽量快的进行处理，以防不必要的问题！2.我的细胞爬片经过4%多聚甲醛固定，PBS冲洗后直接就放在了-20度，还能用于免疫组化吗？！答：应该没有问题，但是还是现作先染好些，以防抗原的丢失3.mRNA原位杂交经4%多聚甲醛固定,固定液需加DEPC水。其它建议用甲醇固定。－2 ...

ResidueTest®Estradiol ELISA kit雌二醇(E2)酶联免疫试剂盒，（编号：HM2093），采用竞争酶联免疫分析法定量检测牛奶和奶牛血清、血浆中的雌二醇Estradiol (E2)。简介：ResidueTest®雌二醇ELISA试剂盒用于定量检测牛奶和奶牛血清、血浆中雌二醇(E2)的浓度。雌二醇(1,3,5(10)-estratriene-3,17β-二醇; 17β-雌二醇; E21)是C18类固醇激素，分子量272.4。主 ...

基本原理：细胞划痕实验（Wound Healing)是一种操作简单，经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法。这种方法的原理是，当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”。划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。划痕实验在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程，是研究细胞迁移的体外试验方法中最简单的方法。实验方法：基本的步骤包括“划痕”的制造，细胞迁移期间图像的获得以及后期 ...

做cell biology实验，细胞铺板大概是最常见的一个实验了。但是有很多人不是很得要领，铺得不是均匀： 要么中间密周围稀，要么周围密中间秃顶。以前分享的一些技巧：1、一般96孔板我每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再，继续加剩余的半边板子，都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（我一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆 ...

1、称体重：2、腹腔内注射苯巴比妥钠50ｍｇ/kg将大鼠处死,用酒精严格消毒大鼠下颌至全腹皮肤及鼠毛,剪开下颌至中腹部皮肤,打开腹腔,推开肝脏并分离出肝及膈肌间的下腔静脉并给予切开放血。3、肺血管灌洗：分离并部分横断切开气管,插入连接有10ｍｌ注射器(内装ｐＨ7.0ＰＢＳ)的灌洗管并用细线加以固定,在固定的离心段剪断气管,剪开肋骨并打开胸腔将肺和心脏提出胸腔。用20号针(另一端连接20ｍｌ的注射器)穿刺进入右心室并顺 ...

1 冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分 ...

在过去几年中，基因重组新技术不断给人们惊喜。上个世纪九十年代，Sangamo公司开发出Zinc Finger nuclease (ZFN)技术，用于遗传病的基因治疗技术的开发。在2010年将科研领域的应用授权给Sigma-Aldrich公司。 直到2012年，基因重组方面一直是ZFN技术一家独大。不过，自从全基因组测序的成本大幅降低后，包括德国和美国在内的学者对于ZFN的靶向性进行研究，发现其有比较严重的脱靶现象，这也给San ...

版上很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近300种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的第一篇专题，并不是因为细胞消化最重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很 ...

一、酶消化法1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少，一般是用原代培养时，从组织消化下细胞。这种方法作用温和，对细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中 ...

一、PBMC细胞计数的现状1. 目前，绝大多数的科研工作者仍在使用血球计数板 在显微镜下进行手工计数 PBMCs；2. 但是显微镜下由于白细胞和红细胞大小非常接近， 不能完全区分白细胞和红细胞；3. 通过红细胞的双凹形形态鉴别红细胞，需要经验丰 富的操作者，且不停地调焦来鉴别；可想而知要把每个 红细胞鉴别出来，要耗费多长的时间，需要多强的工作量。PBMC样本的差异性大 由于个体的差异（如正常人和病人）和人工分离提取的差异，红细胞和血小板污染的程度差 ...

肝硬化是导致美国人死亡的主要原因之一，并且有快速蔓延之势。在世界范围内，肝硬化甚至具有不成比例的影响，正处于生命黄金期的年轻人或患有其他疾病但健康状况得到改善的病人更容受到该疾病的影响，这真令人惋惜。 为促进人类抗纤维化临床试验，以最终达成共识为目的，今年将举行AASLD新趋势主题会议，本次会议旨在商讨与解决“抗纤维化药物临床实验的新趋势：策略与方法“。本次大会举办地：美国芝加哥；举办时间：2014年6月21日-22日。 ...

1、作者：windboy77实验感受：记得刚养心肌细胞时候，开始时候很顺利，但有一次突然细胞就不怎么贴壁了，换液时候一吹打，就发现有许多细胞脱落。我检查了培养箱，可是别人的细胞都长的很好啊，培养基的问题？我仔细观察了一下，培养基粉红透亮，绝对不会污染，血清也没有问题啊，大家都是公用的血清，当时我很迷惑，后来我象老师如实反映问题，他听完我的叙述后想了想，让我把培养基拿给他看，然后告诉我，你的培养基颜色太深了，肯定偏碱，细 ...

1. 冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。2. 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分 ...