Nitrogen Bomb1) Harvest cells and wash 2 times with PBS.2) Resuspend final pellet in relaxation buffer. (20 ml/1X109 cells)3) Pressurize with N2 for 20 minutes at 350 psi 40C with constant stirring in ...
Cells:We grow our CHOs with MEM (without nucleosides) + 10% Bovine Calf Serum and penn/strep/glutamine. For a prep it is best to grow twenty large plates (150 mM) and the cells should be grown to over ...
PREPARE SOLUTIONS 1. 0.25 M Sucrose Solution:Mix 40 g of sucrose (0.25M) 50 mL of 1M KH2PO4 pH 6.65 (0.1M) 2.5 mL of 1M MgCl2 (5 mM) and dH2O to 500 g. Filter through 0.45m. Add 1mL/mL of 1M DTT (adde ...
LEVEL I MATERIALS Rat liverPhysiological saline (0.85% w/v NaCl)0.25 M sucrose in 10 mM Tris-HCL pH 7.4Brendler teflon homogenizerRefrigerated preparative centrifuge0.08 M CaCl in 0.25 M sucrose plus ...
Posted on Monday November 24 2003 DescriptionPretreatment of epithelial cells with 20 µM Cytochalasin B for 30 min in RPMI prior to harvesting results in the reduction of cytoskeletal microfilaments a ...
We recommend that you first download and read this page as a PDF file. Using that as your guide you can then follow the protocol below and view a Quicktime movie demonstrating the key steps. We have a ...
This procedure describes a convenient method for the isolation of crude nuclear pellets from N. crassa. The method an adaptation of the one developed by Hautala et al ((1977 J Bact 130:704-713) utiliz ...
免疫组化试剂SP试剂盒货号品名规格价格备注C0101鼠兔通用SP(HRP)试剂盒140片400进口原料C0104大鼠SP(HRP)试剂盒140片400进口原料C0105山羊SP(HRP)试剂盒140片400进口原料C0103鼠兔通用SP(AP)试剂盒140片600进口原料C0106大鼠SP(AP)试剂盒140片600进口原料C0107山羊SP(AP)试剂盒140片600进口原料试剂盒成分(切片数以 ...
流式试剂货号品名规格价格L0001Mouse anti-Human CD2 mAbFITC50T/100T800/1200L0002Mouse anti Human CD3 mAbFITC50T/100T800/1200L0003Mouse anti-Human CD3 mAbPE50T/100T1000/1500L0004Mouse anti-Human CD3 mAbPE-Cy55 ...
目的要求通过PAS反应,了解糖原显示的基本原理、方法以及糖原在细胞中的分布。基本原理糖原由D-葡萄糖的分支或直链组成,在肝和肌肉最丰富。过碘酸是一种强氧化剂,能将葡萄糖中乙二醇基(CHOH-CHOH)氧化成二个游离醛基(―CHO),游离醛基与Schiff ‘s试剂反应生成紫红色产物,颜色深浅与多糖含量成正比。由于单糖在固定、脱水和包埋等组织化学操作过程中被抽提掉,故一般组织标本上所能显示的糖类主要 ...
一、实验目的和要求 通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。 二、实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色体组型分析。 三、实验用品 1.材料:小白鼠2.器具:注射器(1ml5ml) ...
一、实验目的 (1)了解脂肪酸的β-氧化;(2)通过测定和计算反应液内丁酸氧化生成丙酮的量,掌握测定β-氧化的方法及原理。二、实验原理根据β―氧化学说,机体组织能将脂肪酸氧化生成乙酰辅酶A。两分子乙酰辅酶A可再缩合成乙酰乙酸。在肝脏内,乙酰乙酸可脱羧生成丙酮,也可还原生成β-羟丁酸。乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮总称为酮体。酮体为机体代谢的中间产物。在正常情况下,其产量甚微;患糖尿病或食用高脂肪膳食时 ...
对骨髓基质干细胞进行改造使其在保持快速生长的同时向成骨细胞方向分化是目前国内外研究的热点。实验发现成熟的成骨细胞可以通过细胞间的直接接触作用促进骨髓基质干细胞增殖 此外成骨细胞可产生多种生长因子促进其骨髓基质干细胞的增殖、分化 。由于骨髓基质干细胞通过诱导向成骨细胞分化后难以再与原有的成骨细胞区分开因此本实验将骨髓基质干细胞与成骨细胞以1∶1 的比例直接混合培养同时将成骨细胞和骨髓基质干细胞在与混 ...
2010年7月18日应上海市公共卫生临床研究中心的邀请,上海锐赛生物技术有限公司组织参加了为上海市各大医院临床医生举办的上海市临床科研基本实验技能培训,培训的内容是细胞培养相关操作。细胞培养技术是生物医学研究领域的重要组成部分,安全稳定的细胞培养能够提供良好的实验依据。目前许多生物技术服务企业与科研单位都对如何更好的解决细胞培养问题存在很大疑问。就此基础问题上海锐赛技术部的黄博士结合多年的生物操作 ...
一 、目的:糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。不同载培条件,不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定,可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。二、原理糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物,反应如下:糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生蓝绿色物质,其在可见光区620nm波长处有最大吸收,且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比 ...
一、材料和方法1. 材料(1)材料取自当年带芽茎段为外植体,采自哈尔滨市农业科学院宿根花卉园。(2)培养基以MS 为基本培养基,附加不同的激素配比。启动、增殖培养基加蔗糖30 g/L ,生根培养基加蔗糖15 g/L 。各培养基均加琼脂6.0g / L pH 5.8 -6.0 121℃ 条件下灭菌20 min 。2. 方法(1)初代培养取宿根福禄考当年生幼嫩的枝条,剪去叶片,先用软毛刷蘸洗衣粉水 ...
肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正常细胞相比,不论在体内或在体外,在形态、生长增值、遗传性状等方面都有显著的不同。生长在体内的肿瘤细胞 ...
细胞的分裂指数一、原理体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。二、仪器、用品与试剂1、仪器与用品:CO2培养箱、普通显微镜、细胞培养血、盖玻片、吸管2、试剂:培养液、胰酶、甲醇、冰醋酸、Giemsa ...
一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2~7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-164 ...
PurposeThe purpose of a chemotaxis assay is to determine whether your protein or small molecule of interest has chemotactic activity on a specific cell type. Chemotaxis is the ability of a protein to ...