细胞技术

一、原理 某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中，并继续生长、增值。因此，由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多，异倍性，有结构畸变，常支持阳性诊断。二、用品和试剂 同外周血染色体制备。三、操作步骤 l．新鲜胸腹水20―40毫升，以1000rpm离心10分钟。弃去上清液。 2．加入37℃预温的营养液RPMI-1640 10ml ...

一、原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的，因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近，或在染色体臂上呈现“团块”，这些染色质主要由C显带技术呈现，故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA，但在C带区有很强抗性，仍保留大部分DNA，Giemsa染色后可见效果良好的C带。抽取DNA的过程由三个连续操作形成。首先，酸处理可 ...

一、原理 1949年Barr等发现，在雌性体细胞中的两条X染色体有一条（或这条的大部分）处于凝集不活动状态，从而形成X-小体（或称X-染色质、性染色质、Barr小体）。进而发现，所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体，当在个用雌或雄体中，有多于2条X染色体时，在间期细胞内除一条外，其余均形成X-小体。 人类正常的男女体细胞中，22对常染色体并无区别，但其性染色体分别为XY和X ...

概述及注意事项：细胞学检查包括有细胞的涂片与染色技术，其来源先于组织切片技术，目前是较为常用的病理检查方法之一。它所运用的范围也很广泛，如女性生殖系统、食管、胃、肺、浆膜腔积液、泌尿管道、鼻咽部等部位的脱落癌细胞，以及胸、腹腔的肿块、淋巴结、乳腺、和其它组织器官的细胞学诊断。标本采集注意事项：：1、要在较为准确病变的部位采集病变标本。2、标本应及时处理，固定。以防止细胞自溶腐败。 3、避免异物掺入 ...

准备工作： DF12加入0.1%BSA，100ml取10ml冰浴，40ml放入孵箱；其余的放入4度； DNaseI10undefined;PI：50ug/ml;Hoechst33342:1000ug/ml（allfromSigma） 计数板，冰盒；各种离心管，无菌流式管（BD），400滤网（BD） 染色方案： ①细胞染色： 细胞消化计数，用DF12重悬，调整到1×106/ml浓度 ...

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大鼠骨髓基质细胞的体外培养大鼠骨髓基质细胞的体外培养.pdf ...

人皮肤角质形成细胞的分离与原代无血清培养.pdf

上皮细胞培养 1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1平方厘米小块。 2．EDTA处理：先置入0.02％EDTA中室温置5分钟。 3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。 5．温消化：取出表皮单独处理，用剪刀剪成更小的块后，置入新的0.25％胰蛋白酶中，3 ...

高纯度黑色素细胞培养方法的改进.pdf

从活组织培养层中分离独立的细胞团.pdf

培养基的配制与灭菌1目的1.1了解并掌握培养基的配制、分装方法1.2掌握各种实验室灭菌方 以下内容需要登录后才能完全查看，请您登录马上登陆| ...

一、前言 动物细胞培养开始于本世纪初1962年，动物细胞培养规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，动物细胞培养已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市场份额的50%。动物细胞大规模培养技术是生物技术制药中非常重要的环节。目前，动物细胞有悬浮培养和贴 ...

最近看大家常提到支原体污染，就翻了翻书，做了些笔记，现在贴出来和大家分享： 支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0．2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微 ...

首先，它肯定不同于原代细胞系的，最大的区别，原代的心肌细胞基本不能分裂，而H9C2可以分裂，最大的区别了吧！原代心肌细胞会跳动，你的H9C2不会吧。虽然都是梭形的，但是H9C2来源于胚胎期心脏，而心肌细胞一般用新生大鼠分离获得。H9C2与原代心肌细胞有那么大区别，当然不能替代它，所以在研究方向上，你要根据自己的实验需求选择自己合适的细胞，一般来讲呢，如果你研究与心脏相关的信号通路，我建议你还是选用 ...

小鼠胚胎成纤维细胞的富集1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后，实施断颈法处死小鼠。2、用70％乙醇擦拭腹部，把皮肤向后拉，暴露出腹膜。用消毒过的工具，剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪开每一测的胚囊并将胚胎移到培养皿中。4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开，分离后切除内脏（所有深色的东西）。将胚胎转移到 ...

原代细胞的培养与建系 细胞的来源多样，培养方法也各不相同，凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开 ...

无血清培养基(serumfreemediumSFM):是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求，但对有些实验却不适合，如观察一种生长因子对某种细胞的作用，这时需要排除其他生长因子的干扰作用。而血清中可能含有各种生长因子；又如需要测定某种细胞在培 ...

人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养1 ).将15-20cm长的新生儿脐带放入无菌的PBS溶液中储存。（注：4℃下最多贮存24小时，室温下不超过6小时，否则废弃）2 ).用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中，用无菌的PBS溶液冲洗3-5次，将污血冲洗干净为止。3 ).用手术钳夹紧脐带下端，加入15ml 的胶原酶（1mg/ml）室温下消化15-20分钟，并不时上下摇动脐带。4 ).消化完后，将下端 ...