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显微镜技术――电子显微技术

The Transmission Electron Microscope (TEM) (HEI)An explanation of how the TEM works. TEM Specimen Preparation (HEI) Serial Sectioning (Walter Steffen) EM visualization techniques (HEI)An introd ...

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显微镜技术――荧光显微技术

Immunofluorescencc Microscopy of tissue culture cells (Microscopy and Electronic Imaging Lab)These methods are written for direct staining of filamentous actin with bodipy FL-phallicidin and indirect ...

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信号传导

Cytokine Bioassays (eBioscience)Biological activity of cytokines and their concentrations are commonly measured by cellular proliferation of primary cell cultures or isolated cell lines that are depen ...

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细胞遗传学――原位杂交(ISH)

In Situ Hybridization ・ In Situ Hybridization (jsmith1@po-box.mcgill.ca)In situ hybridization as the name suggests is a method of localizing either mRNA within the cytoplasm or DNA within the ...

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胞外基质

ECM Cell Attachment Assay (LTI) Cell Adherence Inhibition Assay (LTI)General protocol--Either monoclonal antibody or RGD peptide is added along with the cells during the standard adhesion assay and th ...

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细胞培养染色体显示

1) 传代培养细胞染色体显示法1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。2.加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12小时后,再于37℃温箱继续培养6~10小时处理(加秋水仙素)。3.采集分裂细胞:可利用分裂中期细胞体变圆与底物附着不牢特点,此时手持培养瓶,左右反 ...

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激光显微细胞分离技术

在基础医学研究中涉及越来越多的如某一疾病状态组织中,多种基因或遗传变化,区别发展中的组织细胞群以及疾病状态组织细胞,将有助于了解疾病发生的分子机制。因此,在下一代的分子分析方法将需要进入微观世界及自动化程度高。对某一特殊个体的切片进行遗传指纹图谱鉴定,将有助于诊断及指导治疗。 然而,即使是最经典、可靠的检测方法,也不可避免混杂多种状态细胞中DNA、RNA或蛋白质分子的干扰,因此,需要发展 ...

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肿瘤细胞培养成纤维细胞排除法

1.机械刮除法:是用不锈钢丝末端插有橡胶刮头(用胶塞剪成三角形插以不锈钢丝)、或裹少许脱脂棉制成,装入试管中高压灭菌后备用(也可用特制电热烧灼器刮除)。刮除程序为:(1)标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位;(2)刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入瓶皿中,肉眼或显微镜窥视下,刮除无标记空间;(3)用Hanks液冲洗一两次,洗除被刮掉的细胞;(4)注入培养液继续培养,如发现 ...

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细胞培养――培养基和试剂

・ Cell Culture Media and Solutions (Donis-Keller lab) ・ Cell Culture Media Formulations (LTI)Comprehensive list of cell culture media solution and reagents・ Formula Weights for ...

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细胞培养――细胞生长和细胞毒性

Articles posted in the Method Froum Cell Viability AssayDye exclusion method Viable Cell Counts Using Trypan Blue (Gibco) Soft Agar Assay For Colony Formation (Botwell Lab) 96-Well Cell Prol ...

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细胞培养――细胞保藏

Working Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank Master Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establ ...

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Annexin V 与PI双染检测细胞凋亡改进方案

Annexin V 与PI双染检测细胞凋亡改进方案标本:肺泡灌洗液标本:外周血溶血后标记检测 ...

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胚胎干细胞培养

Media and Solution required for ES Cell Culture (Bowtell Lab) Routine Culturing of ES Cells (Bowtell Lab) Routine Splitting and freezing of cells (PMCI) ES Cell Freezing and Thawing (Nagy Lab) ...

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器官培养

In vitro organ cultures (Nagy Lab) kidney lungs limb In Vitro Differentiation of ES Cells into: (Nagy Lab) Cardiac Muscle Neuronal Lineages Cystic Embryoid Bodies Procedures for In Vitro Productio ...

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细胞培养常规操作

常规操作(主要内容如下)・ Aseptic Technique ・ Culture Vessels ・ Cell Counting ・ Primary Culture ・ Maintenance of Cell Line ・ Hybridoma ・ Cell harvesting ・ ...

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转基因

DNA Preparation Gene Transfer Embryo Transfer Transgenic Identificatioin Others Transgenic Outline (University of Michigan Transgenic Animal Model Core)This is an outline of the steps necessary to obt ...

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如何使昆虫细胞适应新的培养液

市场上供应的大多数培养液的配方非常接近,这使得细胞很容易适应新的培养液。这里我将详细介绍一个方法,这个方法是保守的,在大多数情况下可以进行删减一些步骤。最简单最节省时间的情况是把细胞直接分装到新的培养液中,观察几代以保证细胞的生长参数是可以接受的。这个方法适于悬浮细胞,不过也很容易扩展到贴壁细胞。 细胞的生长参数1.翻倍时间(Doubling Time)细胞的翻倍时间在评价昆虫细胞健康程度的参数中 ...

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阻断FC受体方法

如果培养的细胞在细胞表面上有许多FC受体(如单核细胞,巨噬细胞),或者细胞在无血清的培养基上培养。通过用人AB型血清对细胞进行前处理后,会明显地阻断单克隆抗体的非特异性结合。注意此法并不适用于全血染色,因为在全血染色中有高浓度的血清存在。Ⅰ、反应体系A、 抗体1、 第一抗体:常用的或自备的抗体a、 如果第一抗体或自备的抗体能够进行荧光标记(如FITC,PE或其他),请参考直接染色步骤b ...

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激活的淋巴细胞内细胞因子的检测

简介 细胞因子是可溶性蛋白,在淋巴细胞应答中有重要的免疫调节作用。细胞因子可以调节细胞生长、分化以及一系列功能,并且介导正常与病理性免疫应答。细胞因子是具有效应及调节双重作用的独特蛋白。近来研究显示,细胞因子可以具有多重功能,作用于多个细胞亚群并可在不同亚群细胞表达。 早期细胞因子表达与T细胞功能相关性研究是基于特定克隆细胞的激活。尽管研究应用T淋巴细胞克隆证明了不同细胞因子的合成,如TH1(IL ...

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流式细胞术分析血小板

血栓性疾病、出血性疾病、心血管疾病以及自身免疫性血小板减少症等疾病的病生理过程与血小板相关。血小板功能检测包括黏附、聚集和活化功能试验。使用流式细胞仪检测全血中血小板表面相关标志物是一种新技术,它拓宽了血小板相关疾病的诊断与功能研究方法,丰富了血小板功能评估指标。 流式细胞仪血小板分析应用范围 通过分析信号传递、细胞骨架结构、颗粒释放、糖蛋白构形、膜磷脂、与抗凝因子的结合和微粒形成,分析血小板活 ...

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