细胞技术

xueer1108 各位老师好：想请教一下：IL-1、IL-6等这些炎性因子介导的JAK/STAT通路中，在核内stat作用的靶基因有哪些？有IL-10吗？十分谢谢！nickandjn 有Bcl-XL，Cyclin D1，p21WAF1/CIP1,c-Myc等，不过不知道有没有IL-10.zfyyzz00 IL-10是STAT的靶基因。文献见Novakova Z,ect.Cytokine expression and signaling in drug-ind ...

zhanghaopeng 有几个问题想在此请教。1.在做免疫组化和Western时，观察ERK分子的变化是不是要先测定总ERK，而后在分别测定pERK1/2呢？可否推荐一款可以做组化和Western的一抗（我做的是小鼠）。2.关于Notch通路的研究如果受到条件、经费的限制是否可以单纯观测NICD的表达，以证明Notch的活化？3.看到Notch通路的阻断剂有很多，例如DAPT、LY411575等等，可否推荐一下哪款 ...

zw051202109 请问检测细胞内磷酸二脂酶（PDE）的方法谢谢各位战友mikal2008 化学发光法.zcxd116 内标法。可以测本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

潭深水静 请教各位园友：新买的 anisomycin用什么溶液溶解保存。谢谢！潭深水静 主要用来刺激p-38，有用生理盐水稀释到终浓度的但不知道用什么来溶解配母液yhwangcams 根据sigma的说明，可以用多种溶液配制母液：solubility ethanol: 12 mg/mLsolubility H2O: 2 mg/mL Aqueous solutions are stable over a wide range of pH at room temperature.solubility DMS ...

三天两夜 弱弱的问：G蛋白信号转导通路上的pka 和Camp怎么定量？谢谢了joanwhite 我知道camp可以用酶免，放免。pka不太清楚。dianaofyezi 我觉得用相对定量来说还是准确点，因为机体总是存在这些物质的，调控之后使之减少或者增加，所以认为相对定量来说更加准确些。如二楼所说，这两种方法都可以。三天两夜 谢谢，查了有关文献，放免是比较不错的方法pka的测定不是很详细，还是不怎么懂谢谢楼上两位，继续求问pka的问 ...

lxzhjiang 查了很久都没有查到在衰老组织中，P53表达在什么位置，哪位大侠帮帮忙！happytears 应该跟正常组织相同，只是ｐ５３功能或胞核定位发生改变lxzhjiang 哦！谢谢！其他大侠还有没有好的建议？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

skybjp123 现在我要做一种药物对培养细胞的影响，观察这种药物是通过影响何种转录因子起作用的，如何设计一个实验呢？不知道这样设计行不行？加药组和未加药组进行对比，所反应的指标用PCR测定其含量，发现加药组和未加药组有明显的区别，然后使用Wstern blot 方法测定两组的相关的转录因子表达的区别，来证明是这个药物是通过这些转录因子起了作用，不知道这样的实验是否科学？另外这些转录因子在之前的文章中已经证明可以调控 ...

yigerenguo 各位大虾，最近做实验需要检测膜结合RhoA,看文献写得RhoA移位胞膜是其激活关键，怎样分别检测膜结合RhoA 与胞质可溶性RhoA？？二者用同一抗体吗？根据分子大小不同区分吗？还有就是膜结合RhoA 是GTP-RhoA吗？？胞质可溶性RhoA就是GDP-RhoA吗？？差了不少文献，一直没找到结果，非常郁闷，谁做过或者知道相关方面的请指导一下，非常感谢！！doudouzxj 超速离心，分别提取胞膜蛋白和胞浆蛋白 ...

莲芯 请教各位高手,我做的侵袭实验,小室在倒置显微镜下怎么放呢,是正置即内膜朝上,还是倒置即外膜面朝上?我两者均看了,只能正置时看到细胞即内膜面,外膜面什么也看不到.请高手指点,我这是没穿过?还是在倒置显微镜下观察看到的就是穿到外膜面的细胞?谢谢!很急!sharpjyz 内膜面的细胞擦掉后看到的就只有穿到外膜面的细胞了shaverwoo 可以取出小室正置放于6孔板内，湿棉签把内膜上的细胞擦掉，就能看到穿过膜的细胞了。lwjs ...

ZHJOSHUA 想检测PI3K的激活程度，利用什么方法比较好啊？或者有什么比较好用的试剂盒吗？谢谢了littleniu 直接测还是比较难得，我们测一般用FP或者Zlyte平台酶反应测，一般测下游AKT等的激活会比较容易一点ZHJOSHUA 用FP或者Zlyte平台酶反应测,怎么测的呢?能讲的详细一点吗?或者有相关的文献吗?谢谢了birano 强烈推荐美国Echelon，PI3K活性检测试剂盒，通过对PI3K代谢物PIP2， ...

nopain 近日做了p-erk的WB：不加药和加药5min的蛋白表达没有什么差别！且内源性pERK表达很高。16小时的撤血清对其表达似乎没有影响。两个月前找别人借的一点pERK抗体，做的结果能看到撤血清后ERK激活减明显少了，加药组比不加药组的激活明显得多。郁闷得很，不知道原因出在哪儿，有经验得兄弟姐妹们给点意见吧~~谢了！littleniu ERK的信号激活非常灵敏，本身就叫做细胞外信号调节激酶，对外界环境变化相当 ...

dyqin 请问PMA的作用是什么？和MAPK信号通路的关系？谢谢哦littleniu PMA是经典的PKC激活剂，可通过PKC信号通路进而激活MAPKdyqin 非常感谢dyqin 非常感谢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

zhanghaopeng 请教各位：JAK-STAT通路中上下有分子哪下在脑缺血损伤中伴有主要角色的呢、是如何调节的？研究切入点应该在哪里呢？谢谢！zfyyzz00 张建议先了解jak－stat的转导途径，目前已知jak有jak1、jak2和jak3等，stat已经发现有stat1到stat7，一般来讲研究stat1和stat3的比较多，但在各个组织器官表达的激活可能有差异。zhanghaopeng zfyyzz00 wro ...

perfectstory 各位大虾，小弟准备做白血病或淋巴瘤细胞的凋亡方面的研究，不知道最新有关细胞凋亡方面的信号途径有没有新进展啊？呵呵，比如核因子途径，NOTCH，MAPK，FAS之类的，谢谢哦xls_2008 我也是刚刚接触凋亡信号转导的研究，还有好多东西要学习，希望以后能多交流交流，比如最新进展、试验技术等等，嘿嘿。。。xls_2008 QQ983892357 注明：同路人清清河水 同路人ljldella 有不有成骨细胞方面的啊本 ...

食尸鬼 SHP2的分子量到底是多少啊，有的抗体说明书上是70KD，有的是64KD,我看的文献却说是68KD，到底是多少啊，不同细胞的会有差别吗，怎么这么大？另外有的资料上说理论值是70KD，理论值是啥意思weixiaozhu 食尸鬼 wrote:SHP2的分子量到底是多少啊，有的抗体说明书上是70KD，有的是64KD,我看的文献却说是68KD，到底是多少啊，不同细胞的会有差别吗，怎么这么大？另外有的资料上说理论值是70KD， ...

helsman 碧云天分装的Akt p-akt抗体怎样，效果如何，非常感谢岩冰 同样期待，结果。岩冰 示意图岩冰 不好意思，发错地了zhuangzongdxy 想知道楼主 是做什么的我做的是 PI3K-AKT 通路的前段时间 也遇到了 同样问题想买碧云天的分装的 Ly294002期待和你交流邮箱 zhuangzong@126.com本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiong ...

碧峤 最近在查找有关受体酪氨酸激酶的资料，可是找不到EphB2 的激动剂和抑制剂，哪位大侠知道？littleniu EphB2本身就是激动剂，可以作用于EphB4等受体，这个系列受体亚型很多，你再查一下弄清楚要问的是哪个受体亚型。碧峤 EphB2本身是受体，ephrinB是配体，EphB需要结合ephrinB形成二聚体，发生自身酪氨酸磷酸化，并可以引起下游蛋白磷酸化。由于EphB有B1,B2,B3,B4亚型，与受体结合的配体又有 ...

langtianliu 请教ERK抑制剂PD98059在大鼠的给药途径及剂量谢谢 ~如可以的话 附带一些参考文献！感激不及~！~~~~~~~shqling 腹腔注射shqling 腹腔注射langtianliu 那么请问腹腔注射的剂量范围大概多大，我看了好像有0.5-10mg/kg 都有，还有想问下PD98059在体内作用的时间或药效动力学怎样？谢谢急！！！shqling 1.视所用动物种类而定，小鼠用过10mg/kg计量，大鼠可以减量。2.细胞用过1 ...

zsping7411 有哪位高手知道PI3K细胞信号传导通路与HO-1的关系的，因为我发现在脑、肝、心肌器官的文献说PI3K通路激活，磷酸化PI3K增加，上调HO-1的表达，最后抑制细胞凋亡发挥保护作用，而在中性粒细胞（PMN）方面，PI3K激活促进PMN募集趋化作用，所以在胰腺炎、脓毒症等引起的ALI中应用PI3K抑制剂渥漫青霉素或LY294002则表现为抑制PMN在肺内聚集，所以减轻了ALI，似乎很矛盾，请问有谁 ...

ZHJOSHUA PI3K在不同的肿瘤细胞的表达量应该不一样的.想知道PI3K在常见肿瘤中，哪个肿瘤表达量高？哪个肿瘤表达量低？请各位大侠给点建议，请教各位了，先谢了。超级风 做定量PCR，western就可以了ZHJOSHUA 那有已经做过相关工作的报道吗？或已经发表的相关文献？想要在这个基础上做。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixi ...