细胞技术

小pig 之前看到有这个课件，现在找不到了，有哪位大哥能再发一次，谢谢freecell 本人孤陋寡闻，没有听说过“多基因沉默"这个概念；丁香园内搜索，也没有这个名词。不知“之前看到有这个课件"这个说法从何而来？小pig 我已经找到了，是沉默染色体的传播的课件。我是在丁香园上面看到的，中文就是多基因沉默，但内容是染色体沉默的传播本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 ...

zsf神外 小弟求助，用什么方法来观察进出缝隙连接通道的物质？恳请各位高人指点。xiaodisun 我也想知道。你找到方法了吗？请教xiaodisun 我也想知道。请问你现在找到方法了吗？谢谢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

峨眉茶客 HepG2、Eca-109、L0V0各是什么细胞？初学者不懂，望各位GG、JJ赐教freecell HepG2：人肝肿瘤细胞株Eca-109：人食管癌细胞LOVO细胞：人结肠腺癌细胞株建议楼主养成google的习惯。峨眉茶客 谢谢版主，我用百度搜了搜，没有收到。谢谢gingivalis 百度虽然口碑不佳，但也不至于那么糟吧。LOVO细胞 百度搜出来好像是 大肠癌细胞 啊，不知道跟结肠癌细胞有没有区别。本文由丁香园论坛提供，想了解更多 ...

snow359598589 求pAd/CMV载体的图谱，还想了解一下它转染细胞时要注意的地方，比如是否要脂质体包埋或者是别的载体辅助之类的freecell http://www.google.com/search?hl=en&client=firefox-a&hs=0XF&rls=org.mozilla%3Aen-US%3Aofficial&q=pAd%2FCMV+map&aq=f&aqi=&aql=&oq=&gs_rfai=upliz http ...

xuanmaochong 最近正在做一个蛋白与细胞相互作用，及未知受体的鉴定，请问各位有什么好的方法来鉴定蛋白在细胞上的未知受体？貌似我一点办法都没有啊！请教各位了！多谢！wangleisdnu could you try pulldown?use your protein as a bait and the whole membrane protein fraction as prey, do pulldown (if the receptor is membrane protein)Far western al ...

dadi_mama 最近做ERK抑制剂对实验动物的影响，要做PD98059腹腔给药，但不知道给多少剂量，给多长时间，是连续给三天，还是两周。另外，腹腔给药还是用DMSO溶解吗，DMSO对动物有没有毒性作用啊？谢谢各位解答！dadi_mama 请热心战友指点，谢谢！11shengsheng 请问楼主解决这个问题了吗，我也要做，至今还没查到相关文献，望指点一下 啊apple超人 楼主，同样的问题，求助鬼斧feng 楼主，同问，求助本文由丁香园论 ...

Rachel1123 各位大侠，我的实验需要用一种抑制剂抑制Stat3的表达，查了merck公司的Stat3 inhibitors产品，种类很多，不知该选用哪一种？chemicals 跟inhibit peptide 有什么区别？谢谢！:)ylhuang0502 对于Stat3我是外行，但是我用过很多种其他的抑制剂，选择的方法和思路应该是一致的。1.抑制剂一般是首先要考虑特异性，自然是越高越好，这Merck/calbiochem网上可以 ...

375308329 我用雷帕霉素50、100、200uM处理了细胞24小时，然后测了个MTT但是一点趋势都没有，想请问有哪位高手做过这个药的相关实验？非常感谢！jz2298 什么细胞？小有 这个药是典型的诱导自噬的chaomindai 单用这个药物处理细胞，在低浓度时对细胞几乎没有影响。我曾用rapamycin 100nM-100uM处理cortical neuron，对neuron影响不大，但在加H2O2的同时加rapamycin ...

mnidr Shocked cells were added to 1-ml SOC, incubated 1 h at 37°C, and then one-half was spread onto agar to select CmR or KmR transformants. If none grew within 24 h, the remainder was spread after standing overnight at room temperature. After primary selection, mutants were maintained on medium without ...

lsc000211 最近本人的实验课题中，需要用氧自由基诱导细胞凋亡，目前，氧自由基和凋亡均为研究的重要内容，然而通过产生氧自由基达到凋亡的实验文献却很少，我把收索到的内容上传，大家共勉：(1) 巨噬细胞的吞噬作用　　当细菌、病毒等异物侵入人体时，若身体不作出任何反应，这些异物会在体内迅速繁殖，导致身体患病；庆幸的是，人体遭到异物袭击时会动员其防御系统(主要是白细胞和巨噬细胞，以下称之为“食细胞“)将异物吞噬掉。这些细胞在不断吞噬 ...

xiongye2006 因为只知道我们所做的营养因子可以激活胞内的Akt，另营养因子的跨膜受体已知，我需要寻找一个模块，此模块能启动Akt。我的问题是，哪些位点的何种修饰可启动Akt呢?在此模块中，因为我的跨膜受体胞内段不具备酶活性，是不是还需要寻找一种酶蛋白？xiongye2006 请推荐给我一些 关于 酶作用机理 的资料或电子书ylhuang0502 先查查你的跨膜受体有没有PH domain, 因为AKT要想被激活，必须要靠该dom ...

52848454 请问 Akt STAT JAK2 ERK1 这几种信号蛋白属于 胞浆蛋白 还是 胞膜蛋白 ??在线等回复 谢谢ylhuang0502 AKT（包括AKT1、AKT2、AKT3)属于胞浆蛋白，plasma membrane上也有少量（属于磷酸化的激活的AKT），其实有一个（至少）专门的查蛋白定位名为LOCATE的数据库，你可以在下面的网站查查其余的蛋白的定位。http://locate.imb.uq.edu.au/52848454 多谢楼上的朋友fangw ...

carl97 本人最近想本人最近想研究某药物对凋亡调控的机理，如何筛查出该药物相关的作用通路？？？凋亡有很多的信号转导通路，每一通路中涉及很多的分子。如果要筛查，是不是每条同路的关键分子在药物作用后都要分析其表达的情况？？工作量是不是太大？？有无其它好的分析方法？谢谢！！ylhuang0502 估计你用的这个药物不是全新结构的，是否先查查它的类似物的作用靶点？如能查到，这样有的放矢，工作量就会大大降低。另外如果有钱的话，还可 ...

laiy115 各位战友，一直在查关于环腺苷酸热稳定性的文章，可是好像都没有找到。请教大家谈谈cAMP热稳定性的问题，除了在酶作用下会形成AMP，加热情况会怎么样呢？dianaofyezi 一般cAMP都是在体内或者细胞内发挥作用的，所以对于热的研究应该不会很多。fightingwanghong 我也做通路的 是个新手不知您用什么方法测定cAMP的浓度啊？上海中医药的那个试剂盒好用不 先谢谢了wangleisdnu PepTag® N ...

cctj06 请问VEGF-2578C/A多态性中2578代表什么意思？另外，其中的符号“-”代表什么意思？谢谢！zjubell 找到启动子,然后往前数2578位.就是这个位点了.zhujoker 就是在2578位存在碱基的变化，具体形式不太统一。大家在文献中一般用的都是习惯或者说惯用名称。具体表现在以下几种形式：一、突变信息之间加上位置信息主要有三种方式：比如说突变信息之间加上cDNA的位置，如C188T；突变信息之间加上DN ...

栽好梧桐等凤凰 本人最近用病毒刺激细胞后用荧光定量检测到几个基因下调表达，我的预期效果是要他上调表达的。很多文献报道的是某个基因上调表达后如何做，很少报道下调表达该怎没做，请各位前辈指教下调表达该怎么做。谢谢，提供相关文献更好，谢谢。freecell 你的问题很不清楚。是问下调基本表达的方法还是问怎样检测基因表达是否下调？LoftyMan 一样做，上去了会引起什么改变，下来了又会引起什么改变。比如你发现semaphorin ...

栽好梧桐等凤凰 本人最近用病毒刺激细胞后用荧光定量检测到几个基因下调表达，我的预期效果是要他上调表达的。很多文献报道的是某个基因上调表达后如何做，很少报道下调表达该怎没做，请各位前辈指教下调表达该怎么做。谢谢，提供相关文献更好，谢谢。ylhuang0502 这个要相对麻烦一点，一种办法就是用一种或几种下调表达的基因的质粒转染细胞，进行过表达，然后再进一步研究，你可以先查今年的文献，相作者索要质粒，大部人都会给的。祝好运！ ...

yy59410 在下在做MAPK通路对皮肤成纤维细胞凋亡诱导的作用，我分别用p38,JNK,ERK相应的通路抑制剂阻断相应的通路后看给药后细胞的情况，发现这些通路的阻断并不能阻断药物对细胞的凋亡诱导，想请教坛子里的高手们这是怎么回事？我接下来需要做什么?希望大侠们赐教。不甚感激啊。chuckdouble yy59410 wrote:在下在做MAPK通路对皮肤成纤维细胞凋亡诱导的作用，我分别用p38,JNK,ERK相应的通 ...

wangruimishu 哪位高手知道MTT实验如果用盐酸异丙醇溶解结晶的话，浓度该是多少呢？多谢赐教！！ylhuang0502 酸化异丙醇（0.1N HCL+无水异丙醇）详细步骤可参见：http://www.biotf.cn/read-htm-tid-221-page-e-fpage-1.htmlcyclin 很不错的东西wangruimishu 多谢 ylhuang0502本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实 ...

liubodoctor 各位信号转导版的老师，牛人，大家好，提前祝大家端午快乐！学生有个问题咨询下大家，我是研一的肝胆外科的研究生，这段时间设计课题，也看了一些文献，实验室的老师建议做做肝癌的WNT通路方面的。WNT激活能够引起相关的MMP cyclinD cd44 VEGF等等相关的细胞增殖和转移的促进。我想的是设计实验阻断wnt通路，以求降低beta-catenin的水平和入核内激活相关癌基因的转录水平。然后检测胞内的磷 ...