细胞技术

zhang201009 请各位高手指点！我要做MAPK通路P38，JNK,ERK三个蛋白的表达及磷酸化水平以及下游炎症因子变化情况，这三个需要同时检测吗？还是我只选择其中一个就可以呢？这三个抑制剂SB202190，PD98059，SP600125都需要用呢还是只用其中一个就可以？xinfangyu 同时做三个，分别检测。tacitlee 首先，做哪个要取决于你的实验目的。P38，JNK,ERK在不同的组织或细胞中的重要性是 ...

a_a1 如题。kern6549 LPS不能进入细胞吧！a_a1 lps的信号转导除了 通过TLR还有什么其他途径么kern6549 我印象中好像只能通过TLR4。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

伽利略 线粒体中的内参？？？我在网上找到的这个介绍，但是没有更多内容，这个是不是通常被用来作为线粒体中的内参啊http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/439800_Rev1008.pdf谁了解，麻烦说说沈玉琳 线粒体的内参很多啊，我见过的比如complexIV，ABAD啊但是Complex V α subunit好像比较少吧具体能不能建议再看看文献伽利略 谢谢。。。。。。。。。。。本文由丁香园论 ...

linaque 信号通路RhoA/ROCK中，ROCK特异性抑制剂我们一般采用Y-27632、fasudil等，若想研究ROCK活性上调，是否有ROCK特异性的激动剂呢?我查了很多文献都没查到。求助，谢谢！linaque 没人知道吗？急，谢谢！阿兰梦 'Lipid messengers such as arachidonic acid (AA) or sphingosine phosphorylcholine (SPC) are able to efficiently stimul ...

luke_zou full-length 16S rRNA gene sequence与partial sequence有什么区别？zhujoker 就是16s的全场序列以及部分序列luke_zou 请问是否取决于primer？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

llj1985 我构建了一个转录因子表达载体，用了pcDNA3.1(+)基础载体，转染进入293T后免疫荧光检测，发现只在胞质中有表达，不知道为什么，请达人指点！谢谢了devil19840 pcDNA3.1(+)上没有任何标签，你的荧光是什么荧光呢？GFP？如何连接上去的？如果是融合表达很多时候会有GFP的单体泄露表达，而GFP单体大部分就位于胞浆中。所以不如用WB检测一下你的蛋白是否有表达，表达状态如何，最好能用GFP抗体检 ...

zllxash 请问各位研究内质网应激的战友;1、在给予细胞的应激刺激后如何检测细胞的内质网应激程度，有没有一个定量的检测标准呢？2、如何判断内质网应激引起的未折叠蛋白的三条通路激活的判断方法？通过看文献发现有的查的是受体蛋白，有的查的是下游分子，有什么区别？十分感谢！juliyxu 你好，请你帮帮我，关于膀胱癌细胞UMUC3！谢谢您了！请您看到后能否尽快回复我！谢谢了！真的急需帮忙！我给您发站内信息了，急死了！我是华东理 ...

pangpangfish 小弟欲检测T细胞的端粒长度，以对比分选细胞寿命优势，鉴于经费很有限，请各位老师指导选择适宜的检测方法，主要是费用低，又比较容易实现的，先谢谢了。pangpangfish 补充一下，是小鼠的T细胞yxunm 楼主的问题解决了吗？能否告诉我有哪些备选？楼主最后选择了哪一种？P.S.实验室新手，菜鸟一只！有劳楼主！jackhui03 你好，我也想测端粒长度以及端粒酶活性，请问你找到方法了吗shylook jackh ...

天使的密码 我想研究camp/PKA/CREB信号通路在糖尿病模型大鼠中的作用，我能否用PKA抑制剂灌胃给模型鼠，但我看很多杂志上都是采用细胞培养的办法，活体试验给予这些抑制剂可以吗？没有经验，请问各位前辈。holywater 不一定是实验问题，有可能是买不起那么多的抑制剂吧kern6549 活体不能用抑制剂。可以用基因敲除小鼠。maldinilee 还是用体外细胞培养吧，同意楼上用基因敲除。tacitlee 这种方法不可行。首先 ...

termite42 近期做实验需要用到某一基因敲出或者过度表达的实验小鼠，不知道哪里能够购买到这种小鼠？谢谢各位指教～hebrewwolf 1.首先，问问南京模式动物所，如果那边有的话，很快就能搞定，代价一千块左右；2.其次，上JAX看看，从那边买的话，在有可供应小鼠的情况下，三到四个月可到手上，但代价可能需要3万人名币左右；3.还有，就是找具有这种小鼠的作者要，耗时和代价和从JAX买差不多。4.最后，最不济的方法就是需要自己 ...

feroger 看了很多文献上测p-Rb，用的是actin做的内参，没用总的Rb，这是为什么呢kern6549 怎么能用总的Rb作为内参，看来你没有弄明白什么是内参！feroger 测磷酸化不是要和总的对照吗？像测p-AKT还要同时测总AKT，为什么很多文献上测p-Rb，而不测总的Rb呢？kern6549 为什么一定要和总的对照呢？测磷酸化的和总的意义是不一样的，你想得到哪一种信息就测相对应的一个。测磷酸化的是关心的是活化的有 ...

luke_zou 应用什么软件能将多seq文件转换成fasta文件freecell http://www.insilicase.co.uk/Desktop/SeqToMultiFasta.aspxchenhaombb 直接把txt文件改了文件类型。luke_zou 多谢freecell！）tstsw chenhaombb wrote:直接把txt文件改了文件类型。我一般也是这么改的！daiti 这个软件帮我大忙了！本文由丁香园论坛提供，想了解 ...

西地兰的启迪 PPT的链接http://www.biomart.cn/experiment/430/586/587/30549.htm第十二张中，图片中有很多苹果、梨、柠檬，有些我认识是转录因子，那么这个图是要反映什么意思呢？想截个图在下面的，怎奈学校的网到了晚上真是破啊。。。。期待高手指教，谢谢噢~~~西地兰的启迪 图就是这个样子滴，还是早上的网络好，请大家帮忙看看哦～yuxiongying 说明上下游都受到多种转录因子的调控西地兰的 ...

wzmchxz 求助各位战友：factor-related apoptosis inducing ligand指的是什么，它和TNF-α的关系？感谢您的帮助。kern6549 你这个不完整吧，应该是tumor necrosis factor(TNF)-related apoptosis inducing ligand。这个分子简称TRAIL，与相应受体结合后能够诱导细胞凋亡。目前，诱导细胞凋亡的配体主要有TNF、FasL和TRAIL 3种。wzmchxz 感谢 ...

zhanghai123 大家好！我最近在做一个受体对一种靶蛋白的调节作用。通过WB分析表明这个受体被激活后能够上调靶蛋白的水平。Realtime PCR 分析发现受体激活后，该靶蛋白的mRNA不仅没有上升，反而是在下降的。这也能理解，因为这种靶蛋白是一种转录因子，本身对自己的mRNA具有负性调控作用。于是我分析可能这种调控作用是发生在翻译水平或者蛋白稳定性方面。我用放线菌素D预处理细胞，之后再加入受体激动剂，然后再WB分 ...

银钥灵 大家好~~我准备写毕业论文，可是就一个题目就把我难倒了，想请大家帮帮我，我的实验是将一种牛的DNA的一部分与一对引物结合，最后测序，就这样，怎样起名字呢？麻烦大家帮帮我~biolinkphilic 你连实验目的都没说清楚，怎么起题目呢？你说的貌似是实验手段，实验题目一般是实验的目的和用途。银钥灵 其实我都没有弄的太清楚实验就做完了，我做的大概是这样的，从那种牛的血液中提取DNA，然后老师给我一对引物，对加入引物的DNA ...

onlylittleghost 同标题，有遇到过这方面问题的同学吗？体内是camp-pka通路，体外（原代培养）是ERK1/2zaiju512 这个问题很值得思考holywater 恭喜你，可以发两篇文章如果找出为什么不同就是3篇本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

走过去 因为最近在查阅压力相关信号转导通路的文献，粗略的看了一下，似乎相关的文献不多，而且压力相关信号转导通路在听毛细胞的研究稍多一些，不知道哪位高手可以回答一下关于压力相关信号转导通路的研究，例如在充溢性尿失禁当中的进展等均可？谢谢，请拨冗指点。走过去 自己顶一下，再求助。zaiju512 我帮你顶一下本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shi ...

yaojun2006whu 有些公司的一抗介绍明确注明可以用于“流式检测”某蛋白磷酸化或某磷酸化蛋白表达水平，但用流式细胞术检测细胞内某蛋白磷酸化或某磷酸化蛋白表达水平对一抗有特殊要求吗？是不是未标明可用于流式检测的一抗，就不能用于流式检测呢？请教园中兄弟姐妹，比较急，谢谢！kern6549 流式检测胞内磷酸化蛋白一种抗体就够了，就是荧光素偶联的该磷酸化蛋白的抗体，不需要一抗、二抗、三抗什么的。yaojun2006whu ...

sophie777 请教下！有谁知道蛋白酶抑制剂是和刺激因子一起加到细胞里还在加刺激因子之前加？kern6549 刺激前1小时加。zhaozhuozhao 请教楼上，抑制剂在刺激前1小时加后，再单独加刺激还是抑制剂与刺激同时再刺激啊？谢谢kern6549 1小时后直接加刺激剂就可以了。不要换液。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongc ...