细胞技术

cnstr14 有个问题请教一下前辈们，当质粒与感受态菌混在一起做转化时，同一个菌是否有可能吸收进不同的质粒载体，比如同时吸收了含有不同目的基因的载体进入细胞？若有可能，那为什么挑去单克隆去测序，往往是单一目的片段的。若不可能，请告诉我为什么。谢谢zjubell cnstr14 wrote:有个问题请教一下前辈们，当质粒与感受态菌混在一起做转化时，同一个菌是否有可能吸收进不同的质粒载体，比如同时吸收了含有不同目的基因的载 ...

lidonghong 各位坛友：大家好！请教一个问题：提取幽门螺杆菌基因组用哪个公司的试剂盒最好，试剂盒最好是越便宜提取效率越高越好！谢谢啦！freecell 哪个最好，取决于使用者自身感受。国产试剂盒大同小异，价格也没有多大差别。lidonghong freecell wrote:哪个最好，取决于使用者自身感受。国产试剂盒大同小异，价格也没有多大差别。谢谢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方 ...

joo 如题，要做衰老，没有决定定哪家的SA-bata-gal的检测试剂，请教大家都用什么呀？另外看到碧云天很便宜，谁用过他家这个产品吗？joo 求助！joo 自己顶！zmz_1 I am using this in Boston, works very well. check the data sheet.applied biosystemshttps://products.appliedbiosystems.com/ab/en/US/adirect/ab?cmd=catNavigate ...

daydayblue212 小菜鸟求助各种大虾gene amplification 、gene gain、gene loss、gene deletion都是什么意思啊DNA copy number gain 和DNA amplification刚开始学看文献，不知道两者的区别是什么万分感谢zhujoker 都不想回答了，自己不会google一下吗？freecell gene amplification : 基因扩增gene gain：给缺乏某种基因的细胞“添加”上去gene ...

yums 由骨髓间充质干细胞逐渐分化为成骨细胞，有那些信号通路参与，其中最关键的细胞因子是什么？希望大侠们帮助解答。zmz_1 Wnt signaling,LRP5Runx2check out Dr. karsenty paper, most of them are in Cellandi1949 发错了，不好意思本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

cdduanshui 请教各位大虾一个问题：胞质分裂失败的细胞能存活吗？有说能活的，也有说不能活的，因为很多肿瘤细胞都是多核的，通过抑制胞质分裂来抑制肿瘤生长可行吗？请大家不吝赐教，谢谢。lincky2011 关键是看你的细胞的性质而定的！cdduanshui 肿瘤细胞zhujoker 这的确取决于你的细胞系以及细胞的特性，不是所有的肿瘤细胞一概而论。但是作为肿瘤细胞，一般胞质分裂失败不会影响其生存，因为其异质性的特点很显著。 ...

zaiju512 求Ca2+振荡产生Ca2+波通过缝隙连接传递的彩图！！谢谢！！zaiju512 急需！！！zaiju512 自己顶起！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

myskite 将以构建的microRNA质粒稳转至细胞系，有人做过吗，分享一下。bioenw 我做过miRNA的稳转实验，我们可以进行交流。版主zhujoker留言:不要轻易留邮箱以及联系方式。可以站内PM，也不要变相打广告myskite 我已经构建了pcDNA3.1(+)-premiR的表达载体，正在准备细胞。据说，这个实验，细胞爱死？还有，用G418溶于培养液后，用滤吗？如何挑单克隆？wingofwind1029 我用pcDNA ...

noworrynoworry 请问各位前辈，Pyk2（Pyk2信号通路)有特异性抑制剂吗？哪里能买到？noworrynoworry 拜托各位，帮帮忙啊diwen FAK/ Pyk2 tyrosine kinase inhibitor (PF-562271)http://lifesciences.b-bridge.com/products/detail/1440/PF-562271_FAK;_RTKs_Kinase_Inhibitor不知这个公司有无国内 ...

xying316 站内的各位仁兄仁姐：请问有谁买过上海复蒙的细胞？质量如何，可以给点建议吗？非常感谢！zjubell 买细胞还是去上海中科院的细胞所吧。正规点。xying316 好的，谢谢zjubell本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

miaoduan 如期，我要做wnt通路，欲用licl抑制gsk3β，licl溶液应该拿什么溶剂配置啊（三蒸水？PBS？）谢谢zmz_1 三蒸水可以，不是很容易溶解，然后过滤，一般避光4度保存使用。kailiang 楼主做得怎么样了？我也要做wnt方面的东西，想请教你的LiCl是怎么配的，设定药物浓度梯度的时候是怎么设的，还有楼主做什么细胞系。谢谢！观清 请问，我要做激活WNT经典信号通路，可以用licl抑制gsk3β来激活吗？本文 ...

粘豆包 想研究药物减轻肝脏缺血再灌注并探讨细胞通路。请问有细胞水平的肝脏缺血再灌注模型如何建立？diving 看到有文章在细胞水平用低氧复氧 感觉是缺血再灌注模型的体现外科长征 我目前正在做johnyeungkc 细胞水平的I/R，我们实验室是通过缺氧/复氧来建立的，装置也是自己用乐扣的盒子自制的，chuckdouble 粘豆包 wrote:想研究药物减轻肝脏缺血再灌注并探讨细胞通路。请问有细胞水平的肝脏缺血再灌注模型如何建立？调整3 ...

翩pian1 现在想用毒胡萝卜素诱导肝L02细胞内质网应激，但是没看到合适的文献怎样诱导，怎样评估，有没有高手，指点一下啊，感激不尽……yuanyu 我也在做这方面的研究，希望多多交流，互相提高。我的E-mail:fdliang0104@163.combatiwangna Tg不是内质网应激的阳性药吗？直接加进去好了，时间不要太长。因为它会降低GAPDH的表达hongfunv1984 我也是做这方面的，我做的是毒胡萝卜素的类似物， ...

huangdde 如血管内皮生长因子（VEGF）与其受体（VEGFR）结合后，会刺激细胞增殖，如下现象是否可以出现：某种物质与VEGFR结合后，该物质会通过VEGFR而抑制细胞增殖？谢谢。holywater 一般来说受体结合是比较特异的，但是可能和结构类似的东西结合而促进或者抑制受体的活性，这也是竞争性抑制剂的来由。不过抑制剂不是“配体”，所以我说楼主的定义可能有些错误。huangdde 谢谢。哪请问：同一种物质，是否可以与不同 ...

tank1978 请问有人知道什么叫immunoslot blot（ISB）技术吗？ freecell ISB就是狭缝杂交，就是把反应物加到一个长方形的孔内，然后进行混合及显色。通常96孔板上的孔，都是圆的，或者你点个样在滤纸上，叫做点杂交，即dot blot；这种长方形的反应孔内进行的杂交，就叫slot blot。tank1978 学习了。。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙 ...

bettytj 本人正在研究一个蛋白在信号通路中的作用，这个蛋白的磷酸化状态是激活通路的主要因素，目前用WB检测了这个磷酸化蛋白的浓度，同时又用抗体检测的野生蛋白的浓度，请教这两者在细胞内的共存的么?能否用磷酸化蛋白的增多 来预测野生蛋白减少呢？kern6549 1、可以共存。2、不能预测。磷酸化和非磷酸化同时增加也是可能的。bettytj kern6549 wrote:1、可以共存。2、不能预测。磷酸化和非磷酸化同时增加也是可能的 ...

lamper 请问大家有会用GenePix 4100A Microarray Scanner这个仪器（http://www.moleculardevices.com/Products/Instruments/Microarray-Scanners/GenePix-4100A.html）的么？因为要做抗体芯片要用到扫描这一步骤，我想请教些问题。很急用，要毕业了，不抓紧毕不了业了。感谢好心人帮忙！请懂这个一起和相关软件的兄弟姐妹联系我，Q ...

星雪qq 大家好，我目前需要做转染细胞的实验，我的目的是构建重组蛋白，重组基因已克隆至表达载体pCEP4,目前需要提取质粒做转染，知道要用HEK293细胞，但是查到293细胞有多种，293，293A，293T，不知道到底用哪一种，大家帮忙出出主意吧，谢谢freecell ATCC上HEK-293，只有一种吧。woxingwosu HEK293T和HEK293A 均为HEK293细胞的派生。HEK: Human Embryonic Kidne ...

hsclgw 用人重组胰岛素来造HepG2细胞的胰岛素抵抗模型好做吗？做完以后仅仅测量用葡萄糖氧化酶法来测量葡萄糖消耗量，就可以判断模型成功了吗?有没有相关的方法比较全的文献借鉴一下？或者用葡萄糖、游离脂肪酸来诱导胰岛素抵抗的文献哪位大侠有吗？看了国内外参差不齐的文献，还是有点晕~先感谢了！！zhuimenzzhiyn 我目前也在做这方面课题，希望可以交流下，我的qq是：330820896，谢谢！小土豆丁 我也要构建胰岛素 ...

美丽小鸟 我现在用肝窦内皮细胞做冷缺血再灌注方面的实验，即模拟肝移植过程对肝窦内皮的损伤。现在建模过程：把肝窦内皮细胞种于96孔板（10%DMEM高糖培养基），待36小时细胞完全贴壁后，把96孔板置于4摄氏度有机玻璃箱中通氮缺氧。问题：此过程只模拟了缺氧、温度（4度），但培养基没有更换。真实肝移植过程是用UW液浸泡器官，而不是10%DMEM培养基。所以我的实验细胞低温缺氧24小时后仍未出现明显细胞死亡，而在肝移植器官冷 ...