细胞技术

hedashan 实体瘤做细胞周期分析有意义吗？我想做中药抗肿瘤的体内实验，观察药物对细胞周期有无影响，疑问是取移植瘤的一小部分做细胞周期分析能代表整个瘤块的增殖状况吗？急，万分感谢！hedashan 补充一下，是小鼠Lewis肺癌移植瘤zhujoker 原代培养是可以的hedashan 谢谢！我是菜鸟级的，对分子生物学不了解，从通常的观点看，实体瘤中（小鼠Lewis肺癌移植瘤）细胞的增殖是非同步的（好像有的书中说恶性肿瘤细胞 ...

cindy10moon 写综述，看到一篇文献提到Cysteine string protein (CSPa)，说是HSP40家族中的一员，哪位高人知道怎么翻译？说和神经再生和突触传导相关，小妹**！zhujoker 半胱氨酸串联蛋白质好像比较合适了，自己再找找吧cindy10moon zhujoker wrote:半胱氨酸串联蛋白质好像比较合适了，自己再找找吧谢谢，直译是这个了，不过网上搜不到这个中文名称，所以不太敢用本文由丁香园论坛提供 ...

shenghaoisbest 文献中有的说N1-ICD是110KD，有的说是63KD。全长Notch受体被酶切后有几种形式？各自的分子量为多少？很是苦恼，盼高人指点。jessica127127 应为110 KD企鹅mpp 请问，NICD分子量到底是多少，为什么每个说的都不一样呢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

杨蕾医生 PBS是为了洗掉培养基 以便胰酶的消化 可是 能否用双蒸水呢lmnsmu 不可以用ddH2O，它里面没有离子，渗透压与细胞内液不同，会导致细胞水肿。不过偶尔用一次，时间短也不会有太大的影响。杨蕾医生 lmnsmu wrote:不可以用ddH2O，它里面没有离子，渗透压与细胞内液不同，会导致细胞水肿。不过偶尔用一次，时间短也不会有太大的影响。嗯 有道理 谢谢指点啦knightkidd 考虑渗透压！不然全爆了~本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用 ...

liufengxi HIV-1 Tat (47-57) N-term Cys 序列 H-CYGRKKRRQRRR-NH2 ；原始HIV-1 Tat (47-57)序列为YGRKKRRQRRR 。N端的半胱氨酸修饰是为了利用其含有的巯基和其他分子反应，但是C端得-NH2的修饰是什么目的呢？有这个修饰的必要吗？是为了增强多肽的活性，还是发挥一个阻断活性COOH的作用？ 附件是关于HIV-1 Tat (47-57) N-term Cys的产品介绍。请高手指导.dnazyme 个人愚见：C端得 ...

妍会 最近在养HCT116细胞，DMEM+10%胎牛血清，感觉细胞生长状态不好，虽然2天换液，但是培养基里悬浮有很多死细胞，细胞生长缓慢。最主要的，贴壁的细胞中有很大团的东西，又不像是细胞，消化之后，那些大团的东西就成了大泡，比正常细胞大数倍。养了大约2周后发现正常细胞变少了，大泡反而增多了，好像细胞被吃掉了一样。非常想知道是什么原因，不知道这种细胞状态做了转染之后会是怎么样的？急求高手指教！先谢了！zhangshuxi ...

push 1、如何从组织/细胞中提取线粒体总RNA？请各位大牛指点，谢谢。2.目的基因编码的蛋白质A在线粒体中有表达，此蛋白质A是一种核编码的蛋白质；请问能否从线粒体中提取到A蛋白的mRNA?如何提取？谢谢各位指点。knightkidd 应该只能梯度离心分离细胞器然后分离MRNA了吧，如果蛋白是表达在线粒体里应该能在线粒体中提取到其MRNA毕竟要运送到核糖体进行翻译的，不过量就难以判断了，可以试试！woxingwosu 仅 ...

nihaifeng 有做寻做notch信号通路的同道吗？我计划在肾脏方面，做notch信号通路。和大家一起讨论，可行性。wanahn8368 我是做肝癌的，也在关注Notchlaochu2000 我也准备做。交流交流.ss1002 我也准备做，多交流。QQ：583316182nihaifeng 楼上的另外二位，留QQ，我们一起聊聊。wanahn8368 30156678巧克力0925 我在做关于肿瘤方面的。384049290 我也是做肿瘤方面 ...

mckf111 现在用pEGFP-IRES2载体转染黑素瘤B16F10细胞 筛选前转染效率有20% 先1：10传代 再用700-1100mg/L G418分组筛选 基本3天后就没什么绿的了 我晕 两个月啦 就这么耗时间 后面实验。。。大家有什么建议啊bioenw 你可以考虑换个高转染效率的方法，比如用病毒构建稳定细胞mhz9988 G418浓度太高了，一般筛选浓度为400ug/mlzwh2004 在做稳定细胞株之前首先要摸清楚G418的使用浓度，不同细胞对G4 ...

feishi68 血清mirna抽血后怎么保存？运输？zhujoker 放在干冰里面就可以了。yanglong 最好是直接就做反转录，实在是没有条件反转就-80或者液氮等保存了。赵东生 请教一下，可以不提取RNA,直接拿血清作为模板做RT吗？pandace 好像那样直接用血清反转录做miR效果不好。。我之前从血清中提取过miR，量不是很多。需要用ABI那个与扩增盒子好像才有比较好的结果。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思 ...

zhaozhuozhao 各位大侠，我想请教一下：我的药物可引起细胞内活性氧的升高，NAC+药物组细胞内的活性氧检测与给药组几乎无差别，为什么呢？NAC不是或熊样的抑制剂吗？帮帮忙吧zhaozhuozhao 各位老师帮帮忙啊fanjingol 你是怎么给药的？具体的模型你说一下，又是怎么测的ROS？你要说清楚啊！zhaozhuozhao NAC我是买的碧云天的粉末，我用超纯水溶解配成10mmol/L的浓度，氢氧化钠粉末调pH值 ...

thx221 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的？？？帮忙给提供几个通路做参考！或者给我点相关的最新研究文献！我实在是找不到这方面的最新研究进展，大家帮个忙吧！先谢谢了！！！编年张 加此QQ492207858chuckdouble thx221 wrote:有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的？？？帮忙给提供几个通路做参考！或者给我点相关的最新研究文献！我实在是找不到这方面的最新研究进展，大家帮个忙吧！先谢谢了！！！你要问啥？ ...

三水223 western blot 跑出三条带 请问这三条带分别应该怎么命名 请教达人 在线等……fanfine85 老兄，你的casepase是怎么跑出来的呀，我都做不出来seagate 太夸张了，泡成内参了gutao 跟标准marker比对啊，哪条带子符合caspase8的分子量，就是哪条了。用western 跑cas8是非常难的，我当初用santa crua的抗体跑了N遍都跑不出来，后来改用其他方法才勉强解决。楼主这么清晰的条带，是怎么跑出来的 ...

fzf19871015 小弟刚接手这个实验，对信号转导实验一窍不通，老板让我查试剂盒，特请高人指点一二，是不是有专门做信号转导实验的试剂盒？（厂家，型号，价格），信号转导实验怎么设计实验方案啊？gutao 细胞信号传导通路多了，你想做那个信号啊credo 多向周围认识的同学请教，特别是做过信号转导的，再就是多找资料多看文献。我也要做这方面的实验了，也是十窍通了九窍啊，在园子里逛着找资料呢，呵呵。weicon 不好意思，我也有同样的疑 ...

bbdeng 有没有红细胞裂解液的配方？本人试了碧云天的红细胞裂解液，效果不大好，请高人指点！dnazyme http://baike.baidu.com/view/2601370.htmhttp://www.genialgenetics.com/products/reagents/erythrocyte-lysis-solution.htmlCOMPOSITION AND COMPONENT DATAPrepared or working solu ...

knightkidd 如题：手上如果有若干病历样本，如何从中筛查出未被报道过的基因突变位点？！最近在做SNP位点检测试剂，想了解前面的工作是如何进行的，如果哪位高人做过类似研究请指点！！yyyantopbt 这方面的实验我们做了很多，有需要可以交流，qq42020496。pingnana 您知道如何用基因克隆的方法鉴定双等位基因突变还是单等位基因突变吗？本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验 ...

tyssxlth 老板想检测某个基因在癌组织与癌旁组织中是否有碱基突变，请问一下大家应该怎么做？tyssxlth 顶起来！dnazyme 主要用PCR吧。如果谨慎些，可以从宏观到微观选用方法，例如，宏观上看看有没有易位、缺失之类的片段变化可以用核型分析之类的手段，最后再研究是否有点突变，例如chip、pcr等。还有很多新花招，FRET之类的，你查文献吧。yyyantopbt 最简单的方法就是PCR扩增出这个片段，然后测序观察，直 ...

nysummerer 听说是science旗下的杂志，但感觉并没有nature系列那样知名。vparp 6.120nysummerer 谢谢您！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

小米丫丫 请问哪位有知道北京有没有做膜片钳的公司或者实验室吗？就是不用自己去做的那种。请知道的一定回复我一下啊。万分感谢！！！mengyou999 爱思益普 ICE BIOSCIENCE梦飞扬674868990 北京爱思益普 ICE BIOSCIENCE，跟这个公司交流过，很不错的一家膜片钳公司。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

myz68mrq 想做细胞的Notch调控，常用的Notch激活剂有哪些啊？zhujoker 有rhNF-κB参考下面2篇文献： Wnt和notch信号通路在肿瘤干细胞自我更新中的作用 ，myz68mrq 谢谢回复。现在有研究者使用Recombinant Rat Jagged 1 Fc Chimera，作为Notch的激活剂，不知在选择上有何不同？yuncen 忘记从哪看到 EDTA可以激活notch通路，当然非特异本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的 ...