生物化学技术

根据酶分子大小和形状的分离方法(1)离心分离 许多酶往往富集于某一特定的细胞器内，因此匀浆处理后应先通过离心得到某一特定的亚细胞成分，如细胞核、线粒体、溶酶体等，使酶先富集10-20倍，然后再对某一特定的酶进行纯化。一般离心力越大，离心时间就越短。(2)差速离心和等密度梯度离心分离 对于某一悬浮液，可先选用较低的转速进行离心，但分辨率较低，仅适用于粗提或浓缩。如果制备的离心介质的密度梯度范围包括了 ...

目的要求（1）学习双向纸层析的原理。（2）掌握纸层析法分离混合氨基酸的操作方法。实验原理纸层析是以滤纸作支持物，用一定的溶剂系统展开，使混合样品达到分离分析的层析方法。其一般操作是将样品溶解在适当溶剂中，点样在滤纸的一端；再选用适当的溶剂系统，从点样的一端通过毛细现象向另一端展开，展开完毕，取出滤纸晾干或烘干，再以适当的显色剂或紫外灯、荧光灯下观察其图谱。样品经展开后某一物质在纸层析谱上的位置常 ...

组份浓度：2% (W/V) Tryptone ，0.5% (W/V) Yeast Extract ，0.05% (W/V) NaCl ，2.5 mM KCl 10 mM MgCl 2，20 mM glucose。 　　配制量：100 ml 　　配制方法 　　1. 配制1 M 的glucose溶液：将18 g的glucose溶解在90 ml的去离子水中，定容至100 ml，用0.22 μm滤膜 ...

SOB培养基配制每升培养基，在950ml去离子水中加入：胰化蛋白胨 20g酵母提取物 5gNaCl 0.5 g摇动容器使溶质完全溶解。加10ml 250mmol／L KCl溶液(将1.86g KCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L NaOH调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15 psi(1.05kg／cm2)高压下蒸汽灭菌20min。该溶液在使 ...

先用水将琼脂加热溶解，再溶入蔗糖，然后慢慢加入玉米粉，边加边搅拌，成为糊状后停火，待温度稍微下降后，加入丙酸，充分搅拌后立即分装于洁净的培养瓶中，待培养瓶瓶壁晾干后在培养基表面撒一层酵母待用。培养温度为(25±1)℃。常规的玉米饲料配方（150mL）见表1。表1 果蝇培养基配方Table 1 Culture medium of Drosophia melanogaster ...

　培养基好比土壤，是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。因此，在组织培养基的各个环节中，应着重掌握培养基，了解它的组成和配制方法。　　一、组成培养基的五类成分　　目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。　　1.无机营养物　　无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成，大量元素中，氮源通常有硝态氮或铵态氮，但在培养基中用硝态氮的较多，也有 ...

(1)马铃薯(去皮)蔗糖培养基(PSA)：　　马铃薯(去皮)200~250g 琼脂 20g　　白糖 20g 水 1000ml　　pH6.5(以下同)　　(2)马铃薯葡萄糖培养基(PDA)：将(1)号培养基中的白糖改为葡萄糖即可。　　(3)马铃薯蔗糖加富培养基：该培养基用于产生粉孢子多的金针菇菌株。　　马铃薯 200~250g MgSO 45g　　白糖 20g 维生素B1(B2) 100μM　 ...

菌袋生产是指出菇培养基配制（简称拌料）、装袋、灭菌、接种四个环节。出菇培养基的配制（简称拌料）香菇袋料栽培原料以木质类、纤维类、半纤维素为主，配糖类碳水化合物及一定量的含氧化合物机和无机机盐、维生素等。在多种原料中都不同程度的含碳水化合物，其中，木屑、棉籽壳、玉米含量较高，含氧化合物以米糠、麸皮为主尿素可少量配给；无机盐有生石膏、磷酸二氢钾、过磷酸钙等。此外，麸皮及米糠中富含维生素，按比例加入的麸 ...

1.配制溶液　　向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。　　配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。　　2.调节pH值　　用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培 ...

45种培养基配方45种培养基配方（细菌与植物培养基） 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基) Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8 适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种 2.Nutrie ...

　溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号，可用Polaroid 底片或带CCD 成像头的凝胶成像处理系统拍摄。　　观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色，溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和 ...

　荧光素酶（英文名称：Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自

十分感谢！！--------------------------------------------------------------------------------对了，Na3VO4是Na3PO4吗，NaF是氟化钠吗。还有，怎么蛋白定量（是用考马斯亮兰染色吗？）并鉴定是核蛋白多谢！------------------------------------------------------- ...

酶的提取，分离纯化（一）细胞破碎处理许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶，首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多，主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜，使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变。酶学破 ...

血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求：　　1. 牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。　　2. 有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。　　3. 证明所 ...

(一)　原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低( 粘度也很小，可形成高达1.3g／ml密度，采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由 于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒， 还可将受损细胞及其碎片与完好的活细 ...

1．溶菌酶　　用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液，分装成小份并保存于-20℃。每一小份一经使用后便予丢弃。　　2．蛋白水解酶类 ...

详细介绍：蒸馏水:通过蒸馏冷凝制得的水所以里面的无机盐会含的很少.如果只是经过一次蒸馏得到的水里面虽然那些不挥发的组分（盐类）被除去但水中挥发的组分（氨、二氧化碳、有机物）还是会进入蒸馏水中.双蒸水:两次蒸馏三蒸水:三次蒸馏超纯水:超纯水又称高纯水，是指将水中的导电介质几乎全部去除，又将水中不离解的胶体物质、气体和有机物均去除至很低程度的水，。超纯水的含盐量在0. 1mg/L以下电导率小于0. 1 ...

关于这个问题我是这么认为的：首先，U是体内本身就存在的一种核苷酸，并非由T去甲基而来的，也就是说这两种核苷酸在参与DNA的合成及转录之前就已经合成好了，分别参与不同的过程，本来就是不相关的，是独立的。而为什么两者的结构如此相近，就是因为都可以与A进行配对，并且都要形成两个氢键。关于转录过程中的稳定性的说法还是有一定道理的。第三位回答者是从遗传的角度讲的，我想从转录过程的角度讲。转录的产物RNA由核 ...

Masson染色用于显示组织中纤维的染色方法之一。试剂：Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。将苏木精加入蒸馏水内加温溶解冷却后加入酒精和甘油放数日后即可应用。Masson丽春红酸性复红液： 丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。0.2%冰醋酸水溶液： 冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸 ...