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        SOC培养基配方+ITPG

        互联网

        12021

        SOB培养基
        配制每升培养基,在950ml去离子水中加入:
        胰化蛋白胨 20g
        酵母提取物 5g
        NaCl 0.5 g
        摇动容器使溶质完全溶解。加10ml 250mmol/L KCl溶液(将1.86g KCl用100ml去离子水溶解即配成250mmol/l KCl溶液)。用5mol/L NaOH<!>调pH值至7.0。用去离子水定容至1L。在15 psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min。该溶液在使用前,加入5ml灭菌的2 mol/l MgCl2[2mol/L MgCl2溶液的配制方法如下:用90ml去离子水溶解19g MgCl2,用去离子水调整体积为100ml,在15psi(1.05kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20min]。
        SOC培养基
        SOC培养基除含有20mmol/L葡萄糖外,其他成分与SOB培养基相同。SOB培养基经高压灭菌后冷至60℃或60℃以下,加20ml除菌的1mol/L葡萄糖溶液(1mol/l葡萄糖溶液的配制方法是:用90ml去离子水溶解18g葡萄糖,完全溶解后,用去离子水定容至100ml,用0.22um滤器过滤除菌)。
        SOC 培养基(100ml)
        2.0g Bacto® 胰蛋白胨
        0.5g Bacto® 酵母抽提物
        1ml 1M NaCl
        0.25ml 1M KCl
        1ml 2M Mg2+母液,过滤灭菌(按
        下法配制)1ml 2M 葡萄糖,过滤灭菌将Bacto® 胰蛋白胨、Bacto® 酵母抽提物、NaCl 及KCl 加到97ml 的去离子水中,搅拌使之溶解。高压灭菌并冷却到室温。加入2M Mg2+母液和2M 葡萄糖至终浓度20mM。补加消毒蒸馏水至100ml。完全培养基用0.2&mu;m 的滤膜过滤灭菌。最终pH 值为7.0。
        2M Mg2+母液
        20.33g MgCl2&bull; 6H2O
        24.65g MgSO4&bull; 7H2O
        加蒸馏水至100ml,过滤灭菌。
        IPTG 母液(0.1M)
        1.2g IPTG (目录号#V3951)补加水至终体积50ml,过滤灭菌并贮存在4℃。
        X-Gal (2ml)
        100mg 5-溴-4-氯-3-吲哚-&beta;-D-半乳糖苷(产品目录号:V3941)溶于2 ml 二甲基甲酰胺。用铝箔封裹并贮存在-20℃。

        (责任编辑:大汉昆仑王)
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