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磷酸钙-DNA共沉淀法-基因转染介绍

磷酸钙-DNA共沉淀法 核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%~5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10-4,这项技术能用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。此方法对于贴壁细胞转染是最常用并首选的方法。 1、配液 (1)2 ...

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细胞转染的步骤你了解多少?

细胞转染与实验的设计原则磷酸钙-DNA共沉淀法核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%~5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10-4,这项技术能用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。此方法对于贴壁细胞转染是最 ...

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DNA walk

DNA walkA DNA walk of a genome represents how the frequency of each nucleotide of a pairing nucleotide couple changes locally. This analysis implies measurement of the local distribution of Gs in the content of GC and of Ts in the content of TA. Lobry was the first to propose this analysis (1996, 1999). Two com ...

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A Rapid Analysis of Human Paraoxonase Gene Cluster Polymorphism

A Rapid Analysis of Human Paraoxonase Gene Cluster Polymorphism人芳香二烷基磷酸酯酶基因丛基因多态性快速分析法摘要:目的 建立一种人芳香二烷基磷酸酯酶(PON)基因丛等位基因快速分型法。方法 在Multiplex-PCR-RELP基础上,通过引物设计错配,在一体系中同时扩增分别含PON1-192、PON1-55和PON2-31l位密码子的DNA片段,当等位基因为PON1-192R/PON1- ...

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DNA walks and their transformations

DNA walks and their transformationsGraphic representation of coding DNA sequences - a spider To make a graphic representation of a coding DNA sequence in two dimensional space, we analyzed the displacement of a DNA walker which checked each position of codons separately. For the DNA walk we have ...

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一年4篇Cell一作论文 拉斯克奖得主分享科研经验

穿着印有驱动蛋白(Kinesin)T恤的 Ronald Vale 本文作者:罗纳德·韦尔 罗纳德·韦尔博士(Ronald D. Vale)是加州大学旧金山分校(UCSF)的细胞与分子药理学教授。研究方向是驱动蛋白和动力蛋白分子马达。他在 2012 年与迈克尔·希茨和詹姆斯·斯普迪赫同获拉斯克基础医学研究奖。他是 ...

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利用CTAB法提取植物基因组DNA

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DNA的酶切原理试剂和方法步骤

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琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验原理和方法步骤

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SLAF-seq技术:大规模基因分型高通量策略

大规模基因分型在遗传相关性研究中起着重要作用,尤其是和高通量测序技术结合后,它为基因挖掘带来了新的机遇。大规模基因分型的有效解决方法:SLAF-seq(specific-locus amplified fragment sequencing),该技术前期利用生物信息学方法,对目标物种的参考基因组(或已知BAC序列)进行系统分析,设计标记开发方案,后期根据前期的方案,构建SLAF-seq文库,筛选 ...

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百迈客携手国内外多家院校完成世界首个猕猴桃全基因组测序

由来自中国和美国的科学家们组成的研究小组,在一项研究中以中华猕猴桃(Actinidia chinensis)为材料,全面解析了首个猕猴桃全基因组序列信息,绘制了该物种的遗传图谱,并以此发现了这种水果的39040种基因与包括土豆和西红柿在内的其他植物物种之间存在的许多遗传相似性。同时,研究还揭示了数百万年前猕猴桃基因组中发生的两次重大进化事件。这项重要研究成果正式发表在了10月18日的《Natur ...

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miR-142-3p调控脊椎动物造血干细胞的形成和分化

过去关于造血发生的研究主要集中在信号和转录因子,然而近期的研究热点主要是包括microRNAs的表观遗传调控。本文研究者发现在斑马鱼和小鼠中,miR-142-3p在造血干细胞(HSCs)中特异性表达。敲除斑马鱼的miR-142a-3p基因导致主动脉-性腺-中肾(AGM)区的HSCs数量降低,同时胸腺中的T细胞数量也降低。从机制上来讲,miR-142a-3p通过抑制干扰素调节因子7(irf7)介导 ...

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蛋白质组学实验指南

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氨基酸的分离鉴定

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神奇的荧光素酶

在细胞和基因的微观世界中研究探索,遗传报告基因是非常有用的"可视化和量化"工具,具有广泛的应用。荧光素酶(萤光素酶)以出色的灵敏度、使用方便、可以定量检测而成为理想的报告基因。 荧光素酶不是特定的分子,是一类中能催化产生生物发光的酶的统称,不同来源的荧光素酶各有特点,可催化底物发出不同颜色的光,有的还可以配合进行双色发光检测。这种酶最早的来源,也是最有代表性一种 ...

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革命性的克隆新技术及闪电般扩增速度的Taq酶!

一、Lighteningssembly Cloning Kit 传统克隆方法:引物设计合成、PCR、连入克隆载体、酶切获得插入片段,酶切获得线性载体,连接获得重组质粒。需酶切,引物设计受酶切位点限制;需连入克隆载体;步骤多,耗时长;效率低。 北京康碧泉公司代理的Gene-Foci试剂盒的克隆方法:引物设计合成、PCR获得插入片段,PCR或酶切获得线性载体,连接获得重组质粒。无需酶切 ...

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多囊卵巢综合征病人基因组DNA甲基化免疫沉淀反应分析

多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome PCOS)是一种复杂的、病因不明的疾病,最新研究结果表明,胰岛素耐受(insulin resistance IR)在PCOS的发生过程中起了重要的作用。本研究主要致力于探究IR在PCOS发生过程中的分子机制,运用基因组DNA甲基化免疫沉淀技术(methylated DNA immunoprecipitation MeDIP) ...

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多囊卵巢综合征病人基因组DNA甲基化免疫沉淀反应分析

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酵母染色体沉淀分析方法Yeast Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) Assay

ABSTRACTThis protocol describes a method for the detection of proteins bound to specific regions of chromatin in yeast. There are many variations of this assay.MATERIALS ReagentsAntibody of choice ...

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竞争性分析Epitope Mapping实验方法

ABSTRACTThe simplest way to determine whether two monoclonal antibodies bind to distinct sites on a protein antigen is to carry out a competition assay. The assay can be used with antibodies that bind ...

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