DNA实验技术

上海##生物技术有限公司开展免费赠送Seamless Cloning kit活动。任何科研用户填写完整以下问卷都有获赠一个单价688元的Seamless Cloning kit的机会。本次活动计划赠送50个Seamless Cloning kit，本次活动赠送的kit为正式产品，非试用装。Seamless Cloning kit采用与传统方式不同的基因克隆方法，可以将目的基因定点，定向克隆到目的载体，具有简单，快速，高效的特点。可以绕过传统 ...

1、 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近，必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别序列两端有多个碱基的，则必须先切，否则就可能造成酶切失败。2、 回收PCR产物：回收的PCR产物片段=1：10　，一般取前者0.03pmol，后者取0.3pmol。pmol为单位的DNA转换为为?g单位的DNA：（X pmoles×长度bp×650）/ 1,000,000 （注：长度bp× ...

转帖自生物谷2011年中国工程院院士增选进入第二轮评审的候选人名单2011-7-1 11:32:14来源：中国工程院 作者：中国工程院 【大 中 小】药厂的竞争合并与并购？大鱼吃小鱼还是合并？医药巨头面临巨大的选择更多专题...相关阅读葛兰素史克16.5亿美元收购Reliant药业英国最大的制药企业葛兰素史克公司（NYSE: GSK）完成收购Reliant药业公司，收购价为16.5亿美元更多阅读--（各学部名单按照姓名拼音排序）中国工程院20 ...

核酸疫苗（ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｖａｃｃｉｎｅ），也叫基因疫苗（ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｃｃｉｎｅ）、核酸免疫（ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ）、ＤＮＡ免疫（ＤＮＡ ｂａｓｅｄ ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ），它是利用基因重组技术直接将编码某种抗原蛋白的外源基因（ＤＮＡ）与质粒重组后，直接导入动物细胞内，并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗包括ＤＮＡ疫苗（ ...

最近在做质粒提取方面的实验，搜集了相关资料与大家分享，这是传统提质粒的方法，与试剂盒提质粒不同，通过这个过程大家可以更好的明白实验原理。1．目的学会最常用的小量制备质粒DNA的碱裂解方法。2．原理根据共价闭合环状质粒DNA与线性DNA在拓扑学上的差异来分离。在pH12.0~12.5这个狭窄的范围内，线性DNA双螺旋结构解开而被变性。尽管在这项的条件下共价闭合环状质粒DNA也会变性，但两条互补链彼此互相盘绕，仍会紧 ...

最近看了一篇关于碱法抽提质粒的文章，觉得很好，特拿出来和各位分享。碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的研究 ...

1.核酸序列数据库•BIOSINO 我国的核酸序列公共数据库•EMBL - EMBL Nucleotide sequence database (EBI) *•GenBank - GenBank Nucleotide Sequence database (NCBI) *•DDBJ - DNA Data Bank of Japan *•dbEST - Database of Expressed Sequence Tags (NCBI)•dbSTS - Database of Sequence Tagged Sites (NCBI) 　2.基因组及相关数据库 Ge ...

不知道那些大侠做过,可以一起讨论一下.我试了几种转染试剂 ( JetpET, Lipofectine), 转染效率都极低 .只有电转的时候,转染效率也至多达到5%.不知道怎么拿这个细胞做luciferase.筛选浓度我已经用到1mg/ml了,不知道大家都用的多少?常规用FUGEGE6效果好点, 想效率高用逆转录病毒!"筛选浓度"你指什么? G418 我用过1200ug/ml, 1500ug/ml.对，就是指的G418.大侠你用过Fugene6吗?转染效率有 ...

碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。具体分析及原理:1，25 mM Tris-Cl。控制溶液的pH。2，50 mM葡萄糖。悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部。3，10 mM EDTA，pH 8.0。EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂，抑制DNase的活性，和抑制微生物生长。在溶液I中加入高达 10 mM 的EDTA，是要把大肠杆菌细胞中的所有 ...

Ethanol Precipitation of DNAEthanol precipitation is frequently used for concentration of DNA solutions and for removal of protein, salt, and unincorporated nucleotides. The two most common protocols use either 0.3 M sodium acetate (0.1 volume of 3 M) or 2.5 M ammonium acetate (0.5 volume of 7.5 M), ...

一般常识，单拷贝克隆产量低，高拷贝克隆稳定性差，一直让研究者在克隆表达时难以选择。蛋白的表达就有诱导表达系统，可以实现人为地控制蛋白的表达时间和表达量——现在连质粒的拷贝数可以借助诱导的方法来人为控制了！Epicentre的专利技术——CopyControl克隆系统能够让您共享单拷贝和高拷贝的优点。CopyControl克隆首先以单拷贝形式生长——单拷贝可以确保插入稳定及成功克隆编码毒性基因序列——在需要的时候， ...

A腺苷脱氨酶缺乏症 adenosine deaminase deficiency (ADA)腺病毒 adenovirusAlagille综合征 Alagille syndrome等位基因 allele氨基酸 amino acids动物模型 animal model抗体 antibody凋亡 apoptosis路-巴综合征 ataxia-telangiectasia常染色体显性 autosomal dominant常染色体 autosomeB细菌人工染色体 bacterial a ...

原始出处： 商业周刊 b20191c生物科学倍受关注，生物技术股票上扬。生物技术业还需作何承诺？基因技术公司（Genetech）治疗结肠癌的药物“Avastin”不是一夜之间研制成功的。13年前，公司的一位科学家发现了一种可以控制向肿瘤供血的基因，并开始研究如何杀死这种基因。公司用了5年的时间研制出一种抗体，通过对老鼠的试验，发现这种抗体可以在老鼠身上起到一个类似开关的作用，同时又开发了另外3种抗体，使之形成药物。然后，该 ...

〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓 2007年零应助帖/疑难帖集合〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓 已应助帖不代表求助已经解决，鼓励战友继续积极应助，加分机会与尚未应助帖均等不规范贴不在此次整理范围，请大家规范发贴.涉及商业相关和未叙述清楚帖不在整理范围,请大家理解.1. 【求助】关于RNAi载体的使用http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9646712&sty=1&tpg=18&age=02. 【求助】请教：如何用PEI将质粒转入动物体内？ ...

刚才在网上看到的，不知道是不是有人发过了。网址：http://www.csc.fi/oppaat/siru/下载地址：http://www.csc.fi/oppaat/siru/siruwww.pdf分部分下载地址：Part Ihttp://www.csc.fi/oppaat/siru/sirupartI.pdfPartIIhttp://www.csc.fi/oppaat/siru/sirupartII.pdfPartIIIhttp://www ...

上海普迈生物科技有限公司http://www.retbio.com新签约promega产品名称包装目录号价格(元) FuGENE® 6 Transfection Reagent1mlE26913976 FuGENE® HD Transfection Reagent5 × 1mlE231233264 TransFastTM Transfection Reagent1.2mgE24312247 FuGENE® 6 Transfection Reagent5 × 1m ...

2013年，研究者们发表多篇文章介绍CRISPR/Cas9系统，但是CRISPR/Cas9目前仍存在一个很严重且无法避免的问题，即潜在的脱靶效应不可消除。 CRISPR/Cas9是由DNA切割酶Cas9和一段与靶 DNA片段匹配的20个核苷酸长度的短 RNA片段构成。它的特点在于只需合成一个gRNA就能实现对基因的特异性修饰，Cas9蛋白不具特异性；编码gRNA的序列不超过100bp，因此构建较简单方便。但是CRISPR ...

《生物化学》清华大学出版社！第一章1,氨基酸（amino acid）：是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物，氨基一般连在α-碳上。2，必需氨基酸（essential amino acid）：指人（或其它脊椎动物）（赖氨酸，苏氨酸等）自己不能合成，需要从食物中获得的氨基酸。3，非必需氨基酸（nonessential amino acid）：指人（或其它脊椎动物）自己能由简单的前体合成不需要从食物中获得的氨基酸。4，等电点（pI,isoele ...

最近我在做一个E.coli genomic library construct，遇到一些问题，向论坛上的大侠请教。请帮忙看看问题出在哪里。万分感谢！我的方法流程如下：1。用SDS和蛋白酶K提取E.coli genomic DNA (用的是E.coli的一个突变菌株)2。insert: Sau3AI digest E.coli genomic DNA, partail digestion, to get 2kb-5kb, 这一步我摸过酶切时间梯度，用0.1unit Sau3AI，40ul 反应 ...

Restriction Endonucleases: An OverviewRestriction enzymes were discovered about 30 years ago during investigations into the phenomenon of host-specific restriction and modification of bacterial viruses. Bacteria initially resist infections by new viruses, and this "re ...