DNA实验技术

i want to know why exactly tris is used as a buffer when we can use any inorganic salt also to reach pH 8 so what is the function of tris? ------------------------------------------------------------ ...

载体主要 ...

Transgenic Mouse and Gene Targeting Facility Tg 008 Southern Blotting Materials and Equipment Hybaid hybridization oven (ISC BioExpressH-9250) Vacuum oven (VWR52201-218) Ludlum Geiger Counter Radiati ...

Hi Can you tell me what do "SSC" in a southern blot how he act on DNA or in the protocole. (excuse-me for my traduction i never write in english) -Sebela- ----------------------------------- ...

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焦锋，楼程富 （浙江大学蚕学系，杭州310029） 摘要：综述了RAPD技术的一些理论性问题，包括RAPD与其它分子标记技术相比的优点，影响结果重复性的因素，显性标记产生的原因，条带取舍的标准等。提出在实验中解决这些问题的一些方法：严格控制反应条件，采用单倍体和单剂量标记，系统学研究中要结合其它方法进行分析，定位基因时要选用合适的群体等。 1.RAPD技术原理及特点 1．1原理RAPD（Rando ...

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1. Run the gel as normal. Often for genomic southerns it is desirable to run long gels (18cm) over 4-6hrs. 2. Photograph the gel with a ruler adjacent to the molecular weight markers as a reference. 3 ...

适合从动物细胞、动物组织或酵母菌中同步纯化总RNA 和基因组DNA纯化的总RNA ，适合用于Northern Blot、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension、S1 核酸酶作图、RNase 保护测定、制备mRNA 和构建cDNA 文库等各种RNA 分子生物学实验。 纯化的基因组DNA 适用于PCR、Southern Blot、RAPD、AFLP、RFLP 等分子生物学实验。 一、 ...

Inoculate a 5ml overnight of E.coli in LB+20 mM MgSO4. Next morninginoculate 250 ml LB+20 mM Mg++ in a 2L flask with about 2ml overnight culture.Grow at room temp (23℃)with good aeration (250rpm)to an ...

David Harry Institute of Forest Genetics USDA Forest Service Pacific Southwest Research Station August 26 1993 Background : There are many published methods for mini-preps of DNA from lambda phage cl ...

真核生物中，从个体的生长、发育、衰老、死亡，到组织的得化、调亡以及细胞对各种生物、理化因子的应答，本质上都涉及基因的选择性表达。高等生物大约有30000个不同的基因，但在生物体内任意8细胞中只有10%的基因的以表达，而这些基因的表达按特定的时间和空间顺序有序地进行着，这种表达的方式即为基因的差异表达。其包括新出现的基因的表达与表达量有差异的基因的表达。生物体表现出的各种特性，主要是由于基因的差异表 ...

I am having huge problems with bisulfite PCR. Southern analysis indicates that my DNA is unmethylated. My first bisulfite treatment also indicated that the DNA was unmethylated. Subsequent treatments ...

1. D ...

SOLUTIONS: Green and blue solutions from Clone Checker kit (cat. no. 11666-013). PROCEDURE: Place 3-6µl of an overnight culture in an Eppendorf tube (or spread part of a bacterial colony on the ...

试验原理： 碱裂解法是较常用的提取的方法。其优点是收获率高，适于多数的菌株，所得产物经纯化后可满足多数的DNA重组操作。十二烷基磺进行质粒的小量制备。十二烷基磺酸钠（SDS）是一种阴离子表面活性剂，它既能使细菌细胞裂解，又能使一些蛋白质变性。用SDS处理细菌后，会导致细菌细胞破裂，释放出质粒DNA和染色体DNA，两种DNA在强碱环境都会变性。由于质粒和主染色体的拓扑结构不同，变性时前者虽然两条链分 ...

1．感受态的制备 （1）接种单菌落于2ml LB培养液中，37℃过夜。 （2）取0.25ml过夜菌入25ml LB培养液中，37℃振摇4～6h至A590=0.4～0.6。 （3）倒入50ml管内，水浴10min，以2500～3000rpm离心5min，弃上清。 （4）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl25ml悬浮菌体，冰浴20min，同上离心弃上清。 （5）缓慢加入75mmol/L预冷CaCl2 ...

1.Obtain 65-100 µl of blood by retro-orbital bleed with a heparinized microcapillary tube.Expel blood immediately into a 1.5 ml microfuge tube containing 20 µl of 10 mM EDTA.Mix immediatel ...

第一节 概 述 DNA的提取通常用于构建文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用DNA较长的特性，可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇，的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中，可用玻棒将其取出，而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部，从而达到提取的目的。在提取过程中，染色体会发生机械断裂，产生大小不同的片段，因此分离DNA时应尽量 ...

酶切扩增多态性序列（C1eaved Amplified Polymorphic Sequences，CAPS）是一类以PCR为基础的共显性的分子标记，它的基本原理是先用已知位点的DNA 序列去设计一套特异性的PCR引物（19~27 bp）。然后应用这些去扩增该位点上的某一DNA 片段；接着用一种专一性的限制性内切酶切割所得的扩增带并进行RFLP分析。 1993年Konieczny和Ausubel首 ...