DNA实验技术

chenke520520 本人做转染实验，由于小鼠的细胞实在是养不活，我能否将小鼠的insig-1基因（insulin induce gene-1）转染到大鼠细胞中？能否其发挥功能？急！请战友们解答！谢谢！shao74 可以。你是需要稳定表达还是瞬间表达？若稳定表达，你可采取病毒感染的方式，如曼病毒；逆转录病毒和腺病毒；若后者你可用一般的转染方式就够了，这样一般可持续7天左右。hustokyo 不同种属的基因和细胞，外源基因表达出的蛋白 ...

小猪默默 请教高人：我现在想用GFP做报告基因，在大肠杆菌中表达蛋白，想请教一下大家用GFP做报告基因是就是在含有GFP的质粒中扩GFP的全长吗？有没有人对GFP基因进行过改造？让报告基因的序列最短还能使表达的蛋白发荧光？Fasta921 1、如果你单纯想表达GFP蛋白，那么转化含GFP基因的表达载体即行。2、如果你想表达GFP融合蛋白，那么在GFP上游或下游插入目的基因即可。只是有些细节要注意的。3、有人改造GFP基 ...

shanshuiqing 据说金黄地鼠的基因组序列已出,可我搜索了很久均未搜到,想请问各位高人金黄地鼠的基因组序列是否真的已出,如果出来到哪里搜索.不好意思,我问的可能有点不清楚,我指的是金黄地鼠的全基因组序列,NCBI上未报道！shanshuiqing 自己顶一下!freecell http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Database/hkj710 你是做金黄地鼠什么方向的啊，我是做生物节律的，金黄地鼠的全基因 ...

pumcliu 关于基因芯片结果分析方面，请高手帮忙，多谢！小长 QT (Quality Threshold) Clustering Clustering是聚类的意思。基因芯片研究中，也许可以译为“共表达分析”。基因的共表达分析（QT Clustering）下图是使用QT clustering方法对一个时间系列实验进行聚类，每一类的基因具有相似的表达谱，QT clustering方法并不一定要把所有的基因都进行分类，它根据您规定的最小相关性和最小 ...

th_chen 基因转录调控中，存在大量的活化子和抑制子。通常人们会把他们区别对待，活化子如Gal4，行使转录激活功能；抑制子如HDAC，行使转录抑制功能。但是，目前越来越多的实验表明，很多活化子能同时作为抑制子存在。如Oct4是干细胞中一种相当重要的调控因子。它与启动子的结合激活了多潜能基因的表达，却抑制了发育基因的表达。现在的问题是：在同样的细胞环境中，作为抑制子，它募集的是沉默复合物，而作为活化子，它最终募集的是 ...

feiyu1024 在看一篇文献 看到-344 T allele and -344 CT/TT genotype 请问 这几个是什么区别 请高人指点Fasta921 gene polymorphism个人觉得：某对等位基因344位所对应的碱基为CT或TT。344 CT/TT genotype 作为载体包含T allele 。feiyu1024 在文章中 好像二者是有区别的 就是没看明白本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师 ...

jellyfish102 Tenascin和Aggrecan与VEGF之间是什么关系，Tenascin和Aggrecan是VEGF的下游基因吗，课题需要，请专家答疑，谢谢。chuckdouble 不是专家的个人意见首先, 是否**因子是**因子的上游或下游 这种问题, 需要具体到哪种模型, 哪种细胞, 哪种亚型. 不然一般不存在答案.tenascin 是个家族, 有 TNC, TNR, TNX 等等. 已有的报道是TNX会和VEGF结合, 诱导其VEGF的活性(293T cells). ...

zlacrobat 这几天看到论坛上的一些关于等位基因的帖子，有个想法想向各位请教一下。以人为例，每一个基因都由来自父母的2个等位基因构成，如果这两个等位基因的序列有差异，那么DNA的互补配对是怎么实现的呢？DNA的2条链并不是完全相同么？Fasta921 zlacrobat wrote:这几天看到论坛上的一些关于等位基因的帖子，有个想法想向各位请教一下。以人为例，每一个基因都由来自父母的2个等位基因构成，如果这两个等位 ...

xthua Cell, Nature 都出版过拟南芥的甲基化图谱的文章，但是细菌的甲基化图谱未见报道，如果单从基因组的大小考虑，细菌的更加容易测序。各位以为细菌的甲基化图谱有其表观遗传学的意义么？Fasta921 xthua wrote:Cell, Nature 都出版过拟南芥的甲基化图谱的文章，但是细菌的甲基化图谱未见报道，如果单从基因组的大小考虑，细菌的更加容易测序。各位以为细菌的甲基化图谱有其表观遗传学的意义么？如果该细菌可以产生 ...

xfnidage 我要做拟南芥的转基因，构建了一个双35S启动子的T质粒用来转化，就是两个35S启动子串联。不知道这样做会不会产生负面影响，望各位指教！freecell 什么叫“负面影响”？Fasta921 xfnidage wrote:我要做拟南芥的转基因，构建了一个双35S启动子的T质粒用来转化，就是两个35S启动子串联。不知道这样做会不会产生负面影响，望各位指教！针对蛋白表达量而言不会产生负面影响。CaMV35S双启动子 ...

xmu_2008 各位大虾，有个问题想请教，就是使用NF-KB抑制剂PDTC抑制NF-KB后，怎样能知道是否抑制成功？时间紧迫，希望高手们能积极赐教，谢谢！00501101 PDTC的作用是抑制IkB的降解（prevent NF-kB activation by a mechanism that involves inhibition of I-kB degradation followed by IKK-induced phosphorylation，一篇文献的原话）RNA干扰 ...

dm0920 我有一篇文章修回。审稿人怀疑我结果的可靠性。其中一个结果是将细胞在缺氧的条件下培养4小时后，检测两个目的基因的转录和表达，RT-PCR以及细胞免疫化学染色都提示该目的基因发生了转录并表达。但是，审稿人认为仅仅4个小时这些基因（CD31和CD34）还不能转录和表达，因为4小时太短。一般基因得48小时以上方可表达。因此，审稿人怀疑我的结果。我想请教各位大侠，是否能帮忙查找一些文献表明很多基因的转录/表达可以 ...

zyk112 请问不同组织中 DNA的表观遗传状态 基因甲基化状态是否不同？Fasta921 DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。除了甲基化外还会有其他因素在控制基因表达，但基因表达或多或少都受甲基化的影响，而不同组织的基因是选择性表达的，意味不同组织基因甲基化状态是不同的。zyk112 谢谢十分感谢本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯 ...

cuixueying531 首次来请教，请大家多多帮忙，谢谢Fasta921 那你为什么选择这样的基因？说出你选择的理由，也许我们大家可以给点建议。呵呵是你发现的新基因？为什么下这样结论：在正常组织及癌组织都不表达的基因？各种组织细胞类型你都检测了或者你都有文献可供参考了？呵呵PS：我也好奇，跟贴学习！落梅风 我也好奇，正常组织和癌组织都不表达，怎么研究？sleepyabby LZ为什么要研究这个基因呢?从哪里得到它的?zfv2 ...

chacha2118 各位大侠：我想问一个问题，我做的课题的一个基因，用到它的其中一个外显子的序列，参考外国文献都说这个外显子是第四外显子，外国文献都是参考的Gene Bank的同一个登录号的序列，可是我去Gene Bank查这个序列却发现老外们说的第四外显子的序列前面标记的却是number5,这是怎么回事？谁能帮我解答一下。谢谢lalala_2004 查到的能确定是同一个基因吗。给个登录号看看。chacha2118 是NM-0 ...

00501101 NF-kB在不同的情况下，作用不一样。NF-kB不同的功能是因为什么原因，现在有没有报道？NF-kB可以对于基因的转录是一个充分条件，还是一个必要条件？NF-kB在不同的情况下，转录的基因不同吗,机制是什么呢？有没有几个特定的功能区，分别起到不同的转录作用？不同亚基或者和不同的辅助转录因子结合，或者磷酸化的位点不同等等可能性，而引起转录的不同，导致NF-kB的功能不同？这些问题还是至今没有解决？如果上述 ...

zhaomingong 本人正在进行一种物质的研究，该物质可以进入作用于特定基因的启动子序列，抑制顺式或反式作用因子与启动子序列的结合，从而影响该基因的表达。现在两个问题请教各位大侠：1、不同类型的细胞（比如内皮细胞和血管平滑肌细胞）的同一种基因的启动子序列是不是同样的结构，即一、二、三级结构是不是都是一样的？2、不同类型的细胞（比如内皮细胞和血管平滑肌细胞）应该有着同样的核染色体，那么为什么在同样的刺激因素作用下（ ...

wywdxfsh 经常看见文献里提到这2个单词，我没搞明白，举个例子，比如我用lipo2000转染一个质粒，在设对照的时候，一个孔只加Lipo2000，一个空什么也没加，那这两个空分别叫什么呢？先谢过走过路过的xdjm，更谢谢留言回复的同志！：）freecell NC: non-specific control，非特异性对照 ，例如你的问题中的“只加Lipo2000”，以探讨某种效应是否由转染试剂影响的。mock: 空白对照，例如你的问题中的 ...

zhqmjeremy 各位战友好。有一个问题，未得其解，恳请帮助。做荧光素酶报告基因的时候，检测的是细胞因子的启动子。换句话说，是细胞因子的启动子融合的报告基因被转染到细胞内，通过刺进因素作用后，检测启动子的表达情况。这个是背景。问题是，怎么通过使用内参的方法，去除转染效率不同的孔和细胞之间的差别。因为，个人认为，细胞数对报告基因的表达量影响比较大。谢谢。daidaiyidaidai 好像现在比较常用的是双报告基因检测吧， ...

yaoliduli82 本人是个新手，不知核转录调控因子有哪些，抑或哪位高手能否介绍篇文献参考下，敝人将感激不尽～◎！freecell 此帖可以转到生化版。:Dcatonetwo 好像有个FOXP3，我老板研究这个 幸亏没有要我搞catonetwo 你可以自己去查查文献 。。。不过既然是新手 应该先学学如何查阅文献资料 把这本领掌握了 其他手到擒来yaoliduli82 谢谢大家。yaoliduli82 catonetwo wrote:好像有个FOXP3，我 ...