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        抗磷脂抗体 (antiphospholipid antibody, APA) 诱导的流产模型

        相关实验:自然流产动物模型

        最新修订时间:

        简介

        抗磷脂抗体致流产动物模型是指抗磷脂(anti-phospholipid, aPL)抗体是与抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome, APS)有关的一组自身抗体,主要包括抗心磷脂抗体(anti-cardiolipin, ACA)、 抗磷脂酰丝氨酸抗体(antiphosphatidylserine, aPS)、抗磷脂酸抗体(antiphosphatidicacid, aPA)抗磷脂酰 Z 醇胺抗体(antiphosphatidyle-thanolamine, aPE)抗磷脂酰胆碱抗体(antiphos-phatidvlcholine aPC)抗磷脂酰肌醇抗体(antiphos-phatidvlinositol, aPl)和狼疫疮抗凝物(lupus anticoagulant, LA)等。APS 是以反复静脉血栓形成,反复流产和血小板减少为特征的自身免疫性疾病,而大量识别不同磷脂和磷脂结合蛋白的自身 APA 被认为是 APS 的主要致病原因。

        材料与仪器

        试剂:

        各种抗磷脂抗体。

        实验动物:

        BALB/c、C5a 受体缺陷、C3a 受体缺陷、C5 缺陷小鼠以及其他免疫性小鼠。

        步骤

        抗磷脂抗体致流产动物模型的基本过程可分为如下几步:

        A. 抗体可采用各种抗磷脂抗体。抗体可来源于人和动物,可自制或购买。

        (1)人源性抗体: 包含抗磷脂抗体的人 lgG 可从患抗磷脂综合征 [具有高滴度抗磷脂抗体、血栓形成和(或)妊娠流产等特征或复发性流产患者获得。作为对照用的正常人 IgG 可自健无自身免疫疾病者分离获得。

        (2)小鼠单克隆 ACA: 可根据需要用不同抗原免疫小鼠后进行制备。抗体制备方法参考其他相关文献。

        B. 动物可根据研究需要选择不同小鼠品系,如 BALB/c、C5a 受体缺陷、C3a 受体缺陷、C5 缺陷小鼠以及其他免疫性小鼠等。

        C. 建模方法。成年小鼠,雌雄交配获得妊娠,于妊娠 d8~12 接受腹腔内注射 ACA,一般选择其中两天各注射一次(如 8 天、10 天或 8 天、12 天),注射的抗体量根据研究目的和抗体的不同而异。如人 aPL-IgG 10 mg、鼠单克隆抗体 1 mg、鼠抗人纤溶酶抗体 50 μg 等。建模后继续妊娠一定时间,将小鼠处死,切除子宫,计算死胎数,称量胎鼠和胎盘重量等。

        注意事项

        来自复发性流产妇女的 lgG 和抗磷脂抗体可引|起小鼠发生 40% 的胎儿吸收,且存活胎儿体重平均减少 35%。而接受健康个体 lgG 处理的小鼠胎儿吸收小于 10%。

        来源:丁香实验

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