• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        免疫细胞化学技术 - 悬浮细胞样本的制备 - 粘附法

        相关实验:免疫细胞化学技术-细胞样本的制备

        最新修订时间:

        简介

        悬浮细胞样本的制备-粘附法,是免疫细胞荧光染色步骤之一。

        原理

        悬浮细胞样本的制备-粘附法的基本原理是使用化学黏附剂将悬浮细胞黏附于玻片上,常用黏附剂为多聚赖氨酸,通过其侧链粘连在固相支持物上,带正电荷的多聚赖氨酸与总体上带负电荷的细胞结合。

        材料与仪器

        器材:载玻片、盖玻片或组织培养皿、离心机。


        试剂:


        ① 蒸馏水配制1 mg/ml 多聚赖氨酸溶液 ;
        ② PBS


        步骤

        悬浮细胞样本的制备-粘附法的基本过程可分为如下几步:

        A. 用蒸馏水配制 1 mg/ml 多聚赖氨酸溶液,配制后不能长期存放,应每周新配一次。
        B. 在干净的载玻片、盖玻片或组织培养皿上滴加多聚赖氨酸,静置 10 分钟。
        C. 冲洗玻片或培养皿数次,放于支架上,空气干燥,然后室温保存。
        D. 400 g 离心 5 分钟,洗涤细胞,并重悬细胞于 PBS 中,重复一次。
        E. 重悬细胞于 PBS 中,调整浓度至 1x105/ml,滴加至固相支持物上,室温下静置 10 分钟。
        F. 细胞可进行固定。

        注意事项

        过度黏附,此时细胞形态会严重扭曲,影响对亚细胞结构的观察,应降低黏附剂浓度。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序