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        偶氮酪蛋白测定法

        相关实验:蛋白酶的测定实验

        最新修订时间:

        原理

        酪蛋白的敏感性鉴定可以通过这个实验得到很大程度的改善。含氮的基团与酪蛋白的共价键被蛋白水解时切断,用 TCA 上清液测定它们的颜色变化。

        材料与仪器

        步骤

        0.5 ml 偶氮酪蛋白溶液


        0.2 ml 蛋白酶溶液


        25℃ 时培养 30 min 后,加 0.2 ml 10% 三氯乙酸停止反应,离心 5 min。


        于 340 nm 处测上清液的吸收值,1U 是指 1 h 内,能使吸收值变化 1 的酶量。

        常见问题

        试剂:


        0.1 mol/L 磷酸钾,pH 8.0


        0.2% 偶氮酪蛋白(磺胺偶氮酪蛋白)溶于 0.1 mol/L 磷酸钾溶液,pH 8.0


        10% 三氯乙酸(TCA,质量浓度)

        来源:丁香实验

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