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文献和实验NEB 发布:GenomONE™ 为诱导 iPSC 形成「保驾护航」
系统中的重要作用,怎么样能高效地,精准地利用诱导性多能性间充质干细胞(iPSC)生成骨髓间充质干细胞呢?研究发现使用灭活的病毒颗粒,包装和表达四个纯化重组 Yamanaka 转录因子(Sox2、Oct4,Klf4 和 c-Myc),从而引起人初级成纤维细胞的重编程。全基因组亚硫酸盐测序分析人类 iPMSCs 的全基因组 CpG 甲基化。使用 Western blot、荧光定量 PCR、免疫荧光,和体外分化评估 iPMSCs 的多能性。结果表明这些 iPS 细胞在体外和体内都成功分化成三个胚层的细胞
TALEN和CRISPR/Cas9作为现代分子生物学技术上的一次革新,它结合了转基因技术简便快速,没有物种限制及ES细胞基因打靶技术精准的优点,在短短的几年时间里便受到广大科研人员的青睐。但由于其脱靶效应至今无法避免,且难以胜任大片段的基因敲入,所以还远远谈不上成熟。如何提高TALEN和CRISPR/Cas9的效率和降低脱靶效应将是未来的主要研究方向。基于同源重组的ES打靶是基因敲除的业内金标准,它通过同源重组技术将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造基因组某一基因的目的
比起其它公司的原核表达系列来说Invitrogen有个非常突出的地方就是它的重组克隆技术。像之前Novagen大部分载体都是用传统的酶切、链接方式做重组质粒,但是Invitrogen的表达系统大量运用了它的TOPO技术和Gateway技术。 虽然现在在许多做科研的学生看来,能出实验结果是最重要的,中间的过程不是那么重要。可是只有创新的技术才能推动科学不断的进步,比如:如果我们一直采用手工法测序,那真是不知道要猴年马月才能有人类基因组测序图谱,更难以进行
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