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        荧光光度计法测定还原反应

        相关实验:L-乳酸脱氢酶测定实验

        最新修订时间:

        原理



        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        实验所需「试剂」具体见「其他」


        1.98 ml 实验混合物

        荧光光度计法测定还原反应


        0.02 ml LDH 稀释溶液


        25℃ 时,在 260 nm 激发,470 nm 处测定每分钟荧光差异。用适当浓度范围的 NADH 浓度对荧光强度的标准曲线来确定比例因子。


        计算


        体积活性:

        荧光光度计法测定还原反应


        特殊活性:

        荧光光度计法测定还原反应

        常见问题

        试剂:


        0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0


        0.01 mol/l NADH(71 mg 溶于10 ml H2O 中)


        0.1mol/l 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110;110 mg溶于10 ml H2O 中)。


        LDH 原料溶液(从猪心脏提取,例如 10 mg/ml,用 0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 1 IU/ml)

        来源:丁香实验

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