• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        人软骨祖细胞的分化

        相关实验:从正常人和骨关节炎患者的关节软骨中分离软骨祖细胞实验

        最新修订时间:

        原理


        材料与仪器

        步骤

        (a)从培养瓶中吸出生长培养基弃之。


        (b)PBSA润洗后弃去洗液。


        (c)加人足量的胰蛋白酶/EDTA覆盖培养瓶底。


        (d)在37℃孵育5〜10 min(在显微镜下观察细胞是否脱落)


        (e)重悬细胞,置于15 ml离心管中,300g离心5min。


        (f)用1ml生长培养基洗涤,转移至普通器皿或离心管中。


        (g)用血细胞计数板对细胞进行计数。


        (h)重复离心(620g,10min),弃去上清液。


        (i)用分化培养基将其稀释到1×106个细胞/ml。


        (j)按1 ml/管分装到新Eppendorf管中。


        (k)300g离心5 min,上清保留不动。


        (l)置于37℃孵箱。


        (m)每2〜3天更换培养基(见下面的注解1)


        (n)培养2〜3周软骨生成(见注解2)

        注意事项

        注解


        (1)前几次更换培养基要格外小心,因为只有少量基质将沉淀聚集在一起,操作时很容易分散沉淀。


        (2)虽然我们在这里集中阐述的软骨生成,但适当的培养基也可用来诱导其他表型。无论沉积培养还是单层细胞培养,我们都成功地使牛软骨祖细胞获得了成骨、成脂肪和成神经的表型。

        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序