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        间充质干细胞（MSCs)的冻存

        相关实验：MSCs 培养物的扩增和冻存实验

        最新修订时间：

        材料与仪器

        实验材料
        MSCs
        试剂、试剂盒
        冻存液：含30%FBS和5%DMSO的α-MEM。过滤除菌（为进一步确保安全和使冻存液澄清。高浓度血清和DMSO混合时冻存液会变混浊）α-MEMFBS组织培养级二甲亚砜（DMSO)
        仪器、耗材
        聚丙烯离心管2ml50ml0.22μm滤膜的真空过滤器PBSA装满医用级别液氮的液氮罐微量移液器枪头NalgeneCryo-1℃冻存容器冻存管15ml和50mlThermoULT-80℃低温冰箱或同等设备

        步骤

        (a)所得的MSC细胞悬液，500g离心10min。


        (b)在冻存管上标记细胞来源、日期和细胞代数。


        (c)用预热的冻存液以1X106个细胞/ml的密度重悬沉淀，每个冻存管中加入1ml,分装成若干管。在DMSO存在的情况下，勿使MSCs在室温放置20min以上。


        (d)向Cryo-1℃冻存容器内装人异丙醇至刻度线，将冻存管置于容器内。


        (e)将容器置于-80℃至少15h。


        (f)将冻存管转移至液氮，至少可保存3年。

        来源：丁香实验

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