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        制备 PBAC-V2 DNA

        相关实验:单纯疱疹病毒 I 型来源的扩增子载体

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        制备 PBAC-V2 DNA

        材料

        试剂

        琼 脂 糖(电泳级; Invitrogen 或相当的产品)

        B t w n H I 限 制 酶(N e w England B i o L a b s 或相当的产品)

        氯 霉 素(Sig m a-Aldrich 或相当的产品)

        转化有 P B A C -V 2 重组质粒的 E . 甘油保藏菌株

        乙 醇(7 0 % 和 100%)

        异 丙 醇(100%)

        L B 肉 汤(E M D Chemicals or equivalent)

        质粒纯化试剂盒: Endo-free Plasmid M e g a Kit ( Q I A G E N 12381)

        仪器

        离 心 机(Sorvall R C 5B 离心机或相当的产品)带 有 S L C -1500 和 S L C -4000 转头(Sorvall 或相当的产品)

        粗 纱 布(V W R 或相当的产品)

        电泳胶盒(O w l 或相当的产品)

        E r l e n m e y e r 锥 形 瓶(125m l 和 2L , C o r n i n g 或相当的产品)

        滤 纸(S & S 588 或 606 级 ; W h a t m a n 59728435)

        落 地 摇 床(L a W i n e 或相当的产品)

        医用检查乳胶手套(无粉)

        Oakridge 瓶(250m l 和 1L ; Thermo-Electron 或相当的产品)

        移 液 器 架(D r u m m o n d 或相当的产品)

        移液器及无菌枪头(可调容量; Rainin P -20、 P -200、 P -1000 或相当的产品)

        一次性移液管(5m l 、 I O m l 和 25m l 容积,无 菌 C o r n i n g 或相当的产品)

        紫外分光光度计(B e c k m a n D U 8 0 0 或相当的产品)
        制备 PBAC-V2 DNA

        22.用 BamHI 限制酶消化 2 ug PBAC-V2 DNA, 0 •8 % 琼脂糖胶分析限制内切核酸酶图谱(图 3)。

        来源:丁香实验

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