基本方案1 线粒体 DNA 的筛查用 Southern blot 研究基因重排

相关实验：线粒体 DNA 突变缺失氧化磷酸化疾病的分子分析实验

最新修订时间：2024-05-13

材料与仪器

实验材料	骨骼或白细胞的基因组 DNA
试剂、试剂盒	2 X SSC(现配）乙醇乙碘氯苯丁酯溶液精液 DNA NaCl 溶液琼脂糖胶 10 X restriction 缓冲液 BamHI 和 EcoRV 限制性内切核酸酶杂交液 6 X 胶聚蔗糖 oading 缓冲液 1 X TBE 缓冲液 DNA 分子质量标记
仪器、耗材	dCTP mtDNA 探针磷光剂胶电泳仪印迹纸 Zeta探针印迹薄膜 DNA 正压转移装置离心机 Eagle Eye I I 视频影像显像系统杂交瓶恒温箱荧光尺紫外线 Stratalinker

步骤

基本方案线粒体 DNA 的筛查用 Southern blot 研究基因重排

至一个标记的I .5m l离心管，如果要得到白细胞基因组DNA，使用 4. 0〜4. 5pg。
基本方案1 线粒体 DNA 的筛查用 Southern blot 研究基因重排

支持方案使用大范围 PCR 线粒体 DNA 探针的准备

混合以下试剂，用〇.5ml微量离心管准备P C R 反应混合物（每次反应总容量30jul): I. 5jlj J 10 mmol/L 4dN T P 混合物； 0. 5jul 20 jumol/L 引物 1; 0. 5jul 20 jumol/L 弓 .丨物2;
商的技术说明书或任意寡核苷酸合成（附录3E ) 。