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        方案7 用羟胺切割 Asn-Gly 键实验

        相关实验:电泳分离的蛋白质肽谱和序列分析实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.将蛋白质直接溶解于切割缓冲溶液中,终浓度为 5 mg/ml。

        2.混合物在 45°C 孵育 4 h。

        3.冷却样品以终止反应,加人浓缩后的蚁酸 [或 3 倍体积的 2%(体积分数)TFA 水溶液],调整 pH 为 2.5。

        4.通过层析使样品在柱子上脱盐。通过液相层析立刻分析肽段混合物,或者储存样品在-20°C 以备以后分析。

        5.如果利用凝胶电泳进行分析,反应可自行终止(见步骤③)而无需酸化,但需加人 SDS-PAGE 样品缓冲液。

        来源:丁香实验

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