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        SYPRO Orange 荧光染色实验

        相关实验:单向聚丙烯酰胺凝胶电泳实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1.电泳结束后,将凝胶置于盛有试剂 A 的塑料容器中,试剂 A 的量要足够覆盖整块凝股。例如,一’块典型的 mini 胶(8 cmXIOcm 或 8 cmX8 cm) 需用 50~IOOml 的试剂 A。

        2.用铝箔遮盖好容器,避免凝胶暴露在强光下。

        3.室温下摇动凝胶 60 min。

        4.移出试剂 A,留待步骤5 中使用。往盛有凝胶的容器中加入适量的试剂 B,室温下摇动 lmin。

        延长冲洗时间虽然会降低灵敏度,但背景也会减低。

        5.用荧光扫描仪对凝胶进行扫描(SYPRO Orange 的最大激发光波长是 472nm,最大发射光波长是 570nm)。扫描完后,将凝胶放回试剂 A 中。

        6.虽然荧光信号会随时间而降低,但凝胶在试剂 A 中还是可以保存几个星期。

        此外,也可以利用空气干燥凝胶法保存凝胶,尽管这样做同样会导致荧光信号的轻微减弱。至于空气干燥凝胶,需将凝胶放在两张湿的玻璃纸中间,拉紧玻璃纸,待胶静置于空气中变干。空气干燥后的凝胶可永久保存

        来源:丁香实验

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