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        根癌农杆菌菌液的准备

        相关实验:农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        1. 从根癌农杆菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液体培养基并添加相应抗生素的 50 ml 无菌管中,28℃、250 r/min 摇床振荡培养过夜(17~20 h) 至 OD600nm =1.0~1. 5。

        2. 农杆菌细胞在 4500 g 下离心 10 min 后,弃上清(见注 4 ),用 4 ml 的 1X 侵染培养基重悬农杆菌细胞 。

        根癌农杆菌菌液的准备
        根癌农杆菌菌液的准备

        3. 将重悬后含农杆菌的侵染培养基置于 50 ml 无菌管中,28°C 黑暗条件下摇床中振荡培养 1~3 h(见注 5 ) 。

        来源:丁香实验

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