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        蔗糖梯度纯化法

        相关实验:染色体分离实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        实验材料
        试剂、试剂盒
        仪器、耗材

        步骤

        1. 准备两种 18ml,浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液(聚胺,水相或己二醇法的缓冲液),然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中,用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。

        2. 将染色质粗品溶液轻轻地加到梯度上,用带吊桶式转头的 JS-13 ( Beckman Instruments ) 或 HB-4 ( Sorvall) 离心机在 2500 g 离心 15 分钟。

        3. 3 ml —份轻轻地从梯度顶部取出样品,取少量用相差显微镜检查染色质的存在情况。

        4. 收集含染色体的组分在 3000 g 离心 10 分钟。

        5. 用大约为起始染色体粗品溶液体积 1/30 的分离缓冲液重悬浮染色体,继续下一步研究。

        来源:丁香实验

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